本文關(guān)鍵詞：納升級反相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析麥氏弧菌蛋白質(zhì)組　出處：《安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)》2015年33期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：[目的]較系統(tǒng)地研究分析麥氏弧菌提取蛋白質(zhì)。[方法]利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和納升級反相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(nano-RPLC-MS/MS)法系統(tǒng)分析了來源于美國龍蝦的一株麥氏弧菌F5-1提取總蛋白和總蛋白直接酶解產(chǎn)物,并進行數(shù)據(jù)庫檢索鑒定蛋白質(zhì)。納升級反相液相色譜分析條件為:上樣量為5μl,經(jīng)C18預(yù)柱(200μm×0.5 mm,3μm,120姒)脫鹽10 min,再經(jīng)過Chrom XP C_(18)-CL毛細管柱(75μm×15 cm,3μm,120姒)分析,2%乙腈(0.1%甲酸)-98%乙腈(0.1%甲酸)梯度洗脫90 min,采用ESI-Q-TOF MS,在IDA采集模式下分析鑒定麥氏弧菌提取總蛋白酶解產(chǎn)物。[結(jié)果]直接酶解鑒定到1 538種蛋白質(zhì),通過Gene Ontology分析了麥氏弧菌F5-1提取總蛋白的分子功能、生物進程和細胞組分。提取的麥氏弧菌蛋白具有催化、結(jié)合、結(jié)構(gòu)分子、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子等功能活性,其中催化活性的蛋白比例較大,且多為參與代謝進程的相關(guān)酶類。[結(jié)論]研究可為麥氏弧菌蛋白質(zhì)組學(xué)的深入研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 山東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心;ABSCIEX公司上海應(yīng)用實驗室;
【基金】：國家質(zhì)檢總局科技項目(2012IK305,2013IK196,2015IK203)
【分類號】：R3416;O657.63
【正文快照】： 麥氏弧菌(Vibrio metschnikovii)是國際公認的11種致病性弧菌之一,也是引起感染性腹瀉的致病菌[1],主要能引起人類的創(chuàng)傷性感染和敗血癥[2]。目前對于麥氏弧菌檢測方法的研究主要集中在傳統(tǒng)的分離鑒定和分子生物學(xué)技術(shù)等方面[3],而對提取的麥氏弧菌蛋白進行系統(tǒng)分析目前未見報

【參考文獻】

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【相似文獻】

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本文編號：1310930