GFP轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞純化方法的研究
本文關(guān)鍵詞:GFP轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞純化方法的研究 出處:《口腔醫(yī)學(xué)研究》2015年04期 論文類(lèi)型:期刊論文
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【摘要】:目的:應(yīng)用兩種不同方法培養(yǎng)純化綠熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,以探求提高GFP小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞純化效率的方法。方法:取4~6周齡GFP小鼠股骨全骨髓,采用貼壁法進(jìn)行體外培養(yǎng)。待細(xì)胞融合至約80%,將細(xì)胞分為兩組,分別采用常規(guī)法和改良法進(jìn)行消化傳代。熒光顯微鏡下觀察各組細(xì)胞熒光狀態(tài)及形態(tài)學(xué)特征,MTT法繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志物及綠熒光蛋白表達(dá)率,體外誘導(dǎo)觀察其成骨、成脂能力。結(jié)果:貼壁法獲得數(shù)量較多,形態(tài)多樣的原代細(xì)胞。隨著傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞形態(tài)一致性不斷增高。與傳統(tǒng)方法相比,改良法在不影響細(xì)胞增殖、分化潛能,不影響其GFP表達(dá)率的前提下,可以更早獲得純度較高的細(xì)胞。結(jié)論:改良法可提高純化小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞效率,為其用于進(jìn)一步研究工作提供基礎(chǔ)。
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院牙體牙髓病-國(guó)家臨床重點(diǎn)專(zhuān)科;南方醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(編號(hào):81371137)
【分類(lèi)號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchy-mal stem cells,BMSCs)以其豐富的來(lái)源和多向分化潛能成為干細(xì)胞治療的研究熱點(diǎn)。然而,骨髓中間充質(zhì)干細(xì)胞所占的比例很低,如何為細(xì)胞移植及基因治療提供數(shù)量充足、活性良好的BMSCs仍是國(guó)內(nèi)外學(xué)者關(guān)注的問(wèn)題[1~3]。綠色熒光蛋白(greenf
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1310506
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