本文關(guān)鍵詞：大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢菌素的耐藥性與ESBLs基因分型研究

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【摘要】：目的了解威海市立醫(yī)院分離的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)生的超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的基因型,以及產(chǎn)酶菌的耐藥性。 方法采用CLSI推薦的表型確證實(shí)驗(yàn)來(lái)收集產(chǎn)生ESBLs大腸埃希菌(40株)和肺炎克雷伯菌(20株),堿裂解法提取質(zhì)粒DNA；分別采用特異性引物擴(kuò)增TEM SHV CTX-M系列基因,測(cè)序后在Genbank進(jìn)行比對(duì)確定基因型；對(duì)產(chǎn)生一種基因型ESBLs的菌株采用瓊脂稀釋法測(cè)定頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢吡肟的MIC值。 結(jié)果(1)兩種細(xì)菌擴(kuò)增到TEM-1、SHV-1、CTX-M-3、CTX-M-9組基因,未擴(kuò)增到CTX-M-2組基因,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)測(cè)序檢出7種ESBL基因型,100%的大腸埃希菌和80%的肺炎克雷伯菌產(chǎn)生blaCTX-M,25%的肺炎克雷伯菌產(chǎn)生blaSHV-12;最常見(jiàn)的基因型是CTX-M-14和CTX-M-55、CTX-M-15,其中CTX-M-14在大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的檢出率分別為45%和35%,CTX-M-55在兩種菌的檢出率皆為35%,CTX-M-15的檢出率分別為20%和15%；檢出少量的CTX-M-3、CTX-M-65、CTX-M-101及CTX-M-123基因型。CTX-M-15、CTX-M-55、CTX-M-101及CTX-M-123四種具有頭孢他啶水解活性的CTX-M基因型分別占產(chǎn)ESBL的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的62.5%和55%,共同的突變位點(diǎn)是240位氨基酸發(fā)生了D240G替代。(2)常規(guī)藥敏紙片法表明我院大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢噻肟全部耐藥,除了一株肺炎克雷伯對(duì)亞胺培南中介,其余菌株對(duì)亞胺培南和美羅培南敏感,對(duì)頭孢他啶的耐藥率分別30%和65%,壞丙沙星的耐藥率與左氧氟沙星相同,對(duì)兩種菌的耐藥率分別為62.5%和70%。(3)瓊脂稀釋法藥敏結(jié)果顯示攜帶具有D240G突變的基因型菌株對(duì)頭孢他啶中介或耐藥,無(wú)D240G突變的單產(chǎn)CTX-M-14,65型ESBLs的菌株對(duì)頭孢他啶表型敏感,兩組耐藥率有顯著性差異(Fisher精確檢驗(yàn)(雙側(cè)),P=1.41*10-4)。 結(jié)論CTX-M-14和CTX-M-55是本地區(qū)主要流行的ESBL基因型,CTX-M-101及CTX-M-123型ESBLs在山東省為首次檢出。產(chǎn)生blaCTX-M-15,55,101,123是導(dǎo)致大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢他啶不敏感的重要原因；產(chǎn)ESBL的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)環(huán)丙沙星耐藥嚴(yán)重,碳青霉烯類為治療此類細(xì)菌感染的首選。我院產(chǎn)ESBL菌株的耐藥特點(diǎn)符合CLSI M100-S20頭孢噻肟折點(diǎn)；不符合頭孢他啶和頭孢吡肟折點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R3416

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1302084