本文關(guān)鍵詞：miR-486-5p在氧化應(yīng)激引起人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞凋亡中的作用

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【摘要】：目的:觀察microRNA-486-5p(miR-486-5p)在氧化應(yīng)激引起人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(h MSCs)凋亡中的作用并探討其作用機(jī)制。方法:h MSCs經(jīng)培養(yǎng)鑒定后分為5組:空白對(duì)照組、H2O2組、miR-486-5p模擬物+H2O2組、抑制物(αnti-miR)+H2O2組及相應(yīng)的陰性對(duì)照(scrambled control)+H2O2組。熒光定量PCR(real-time PCR)檢測(cè)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)h MSCs凋亡過(guò)程中miR-486-5p的表達(dá)變化。用脂質(zhì)體分別轉(zhuǎn)染miR-486-5p的模擬物、抑制物及陰性對(duì)照到h MSCs。應(yīng)用MTT、Hoechst標(biāo)記和流式細(xì)胞術(shù)的方法檢測(cè)miR-486-5p對(duì)氧化應(yīng)激介導(dǎo)細(xì)胞活性下降及凋亡效應(yīng)的影響,Western blotting檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白、Akt與其磷酸化水平,采用試劑盒測(cè)定caspase-3活性。結(jié)果:H2O2誘導(dǎo)h MSCs凋亡過(guò)程中miR-486-5p的表達(dá)較對(duì)照組顯著下降(P0.05)。與陰性對(duì)照組相比,在h MSCs中過(guò)表達(dá)miR-486-5p,能使細(xì)胞在氧化應(yīng)激情況下活性顯著下降,凋亡發(fā)生率增高,蛋白Bcl-2/Bax比值、caspase-3酶原含量及Akt磷酸化水平降低,caspase-3活性增強(qiáng);而使用抑制物阻遏miR-486-5p的作用后,細(xì)胞在氧化應(yīng)激條件下活性增加,凋亡發(fā)生率降低,蛋白Bcl-2/Bax比值及Akt磷酸化水平升高,caspase-3活性下降。結(jié)論:過(guò)表達(dá)miR-486-5p促進(jìn)氧化應(yīng)激引起的h MSCs凋亡,阻遏miR-486-5p的作用抑制氧化應(yīng)激條件下的h MSCs凋亡,其中作用機(jī)制可能與調(diào)控Akt通路有關(guān)。
【作者單位】： 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院廣州心血管疾病研究所;
【基金】：廣州市屬高校科研項(xiàng)目(No.2012C230) 廣東省科技計(jì)劃(No.2013B021800198) 國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金資助項(xiàng)目(No.81401156)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)作為成體干細(xì)胞的一種,由于來(lái)源方便,沒(méi)有免疫排斥反應(yīng),無(wú)致瘤性,是較為理想且具有臨床運(yùn)用前景的一類干細(xì)胞。移植BMSCs治療心梗的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床前期試驗(yàn)取得了令人鼓舞的成果,但臨床試驗(yàn)效果差異較大,而且獲益主

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9 徐t，

本文編號(hào)：1290520