本文關(guān)鍵詞：供體年齡影響融合生長(zhǎng)內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換及增殖遷移的作用

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【摘要】：目的:探討老齡和年輕個(gè)體來(lái)源融合生長(zhǎng)狀態(tài)內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)對(duì)血管平滑肌細(xì)胞(SMCs)表型轉(zhuǎn)換以及增殖和遷移的調(diào)節(jié)作用。方法:脫臼處死1~2月齡、19~26月齡SD大鼠,應(yīng)用含15%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)基(含內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑100 mg/L、肝素100 mg/L、青霉素、鏈霉素各1×105U/L)培養(yǎng)EPCs,取1~2月齡大鼠腹主動(dòng)脈,組織塊法培養(yǎng)血管SMCs,應(yīng)用Di I-Ac-LDL與FITC-UEA-1熒光雙染以及α-SM-actin免疫熒光分別對(duì)EPCs和SMCs進(jìn)行鑒定。建立細(xì)胞共培養(yǎng)體系,上室為融合生長(zhǎng)狀態(tài)的EPCs,下室為SMCs,實(shí)驗(yàn)分4組:(1)第3代SMCs(P3)組;(2)第4代SMCs(P4)組;(3)第4代SMCs與年輕大鼠來(lái)源EPCs共培養(yǎng)(P4YE)組;(4)第4代SMCs與老齡大鼠來(lái)源EPCs共培養(yǎng)(P4AE)組。Western blotting檢測(cè)α-SM-actin和osteopontin蛋白的表達(dá);[3H]-TdR摻入法檢測(cè)SMCs增殖;細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SMCs的遷移能力。結(jié)果:與P3組相比,P4組的SMCsα-SM-actin表達(dá)顯著下調(diào),而osteopontin表達(dá)顯著增強(qiáng);P4YE組SMCs的α-SM-actin及osteopontin表達(dá)與P3組比較未見(jiàn)有顯著差別;與P4組相比,年輕和老齡大鼠來(lái)源的EPCs均顯著促進(jìn)第4代SMCs的α-SM-actin和下調(diào)osteopontin的表達(dá),抑制第4代SMCs的增殖和遷移;與老齡大鼠來(lái)源的EPCs相比,年輕大鼠來(lái)源的EPCs更能夠顯著延遲SMCs表型由收縮型向合成型轉(zhuǎn)換,抑制SMCs增殖和遷移。結(jié)論:共培養(yǎng)融合生長(zhǎng)狀態(tài)的EPCs使血管SMCs表型轉(zhuǎn)換延遲、抑制SMCs增殖和遷移,年輕大鼠來(lái)源的EPCs較老齡大鼠來(lái)源的EPC更顯著延遲血管SMCs表型由收縮型向合成型轉(zhuǎn)換,并具有更強(qiáng)的抑制血管SMCs增殖和遷移的能力。
【作者單位】： 成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)科云南省干細(xì)胞與組織工程中心;第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院全軍心血管疾病研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81170316;No.81101158) “973”基礎(chǔ)研究規(guī)劃資助項(xiàng)目(No.2012CB518100)
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 2第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院全軍心血管疾病研究所,重慶430037)動(dòng)脈粥樣硬化等損傷性血管疾病病理變化主要表現(xiàn)為內(nèi)皮再生延遲以及血管傷處平滑肌細(xì)胞(smooth muscle cells,SMCs)過(guò)度增生,導(dǎo)致新生內(nèi)膜形成。大量研究證實(shí)內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progen-itor cells,EPCs)參與血管損

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【共引文獻(xiàn)】

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2 郭悅R，

本文編號(hào)：1286676