發(fā)布時間：2017-12-13 21:36

  本文關鍵詞：供體年齡影響融合生長內皮祖細胞對平滑肌細胞表型轉換及增殖遷移的作用

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【摘要】：目的:探討老齡和年輕個體來源融合生長狀態(tài)內皮祖細胞(EPCs)對血管平滑肌細胞(SMCs)表型轉換以及增殖和遷移的調節(jié)作用。方法:脫臼處死1~2月齡、19~26月齡SD大鼠,應用含15%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)基(含內皮細胞生長添加劑100 mg/L、肝素100 mg/L、青霉素、鏈霉素各1×105U/L)培養(yǎng)EPCs,取1~2月齡大鼠腹主動脈,組織塊法培養(yǎng)血管SMCs,應用Di I-Ac-LDL與FITC-UEA-1熒光雙染以及α-SM-actin免疫熒光分別對EPCs和SMCs進行鑒定。建立細胞共培養(yǎng)體系,上室為融合生長狀態(tài)的EPCs,下室為SMCs,實驗分4組:(1)第3代SMCs(P3)組;(2)第4代SMCs(P4)組;(3)第4代SMCs與年輕大鼠來源EPCs共培養(yǎng)(P4YE)組;(4)第4代SMCs與老齡大鼠來源EPCs共培養(yǎng)(P4AE)組。Western blotting檢測α-SM-actin和osteopontin蛋白的表達;[3H]-TdR摻入法檢測SMCs增殖;細胞劃痕實驗檢測SMCs的遷移能力。結果:與P3組相比,P4組的SMCsα-SM-actin表達顯著下調,而osteopontin表達顯著增強;P4YE組SMCs的α-SM-actin及osteopontin表達與P3組比較未見有顯著差別;與P4組相比,年輕和老齡大鼠來源的EPCs均顯著促進第4代SMCs的α-SM-actin和下調osteopontin的表達,抑制第4代SMCs的增殖和遷移;與老齡大鼠來源的EPCs相比,年輕大鼠來源的EPCs更能夠顯著延遲SMCs表型由收縮型向合成型轉換,抑制SMCs增殖和遷移。結論:共培養(yǎng)融合生長狀態(tài)的EPCs使血管SMCs表型轉換延遲、抑制SMCs增殖和遷移,年輕大鼠來源的EPCs較老齡大鼠來源的EPC更顯著延遲血管SMCs表型由收縮型向合成型轉換,并具有更強的抑制血管SMCs增殖和遷移的能力。
【作者單位】： 成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院臨床實驗科云南省干細胞與組織工程中心;第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院全軍心血管疾病研究所;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.81170316;No.81101158) “973”基礎研究規(guī)劃資助項目(No.2012CB518100)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 2第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院全軍心血管疾病研究所,重慶430037)動脈粥樣硬化等損傷性血管疾病病理變化主要表現為內皮再生延遲以及血管傷處平滑肌細胞(smooth muscle cells,SMCs)過度增生,導致新生內膜形成。大量研究證實內皮祖細胞(endothelial progen-itor cells,EPCs)參與血管損

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本文編號：1286676