本文關(guān)鍵詞：耐藥鮑曼不動桿菌臨床分離株對胍類消毒劑抗性的研究

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【摘要】：[背景] 鮑曼不動桿菌(Acinetobacter Baumanii,AB)屬于不動桿菌屬(Acinetobacter),是需氧、不發(fā)酵糖類的革蘭氏陰性桿菌,廣泛分布于自然界、醫(yī)院環(huán)境、人體皮膚和黏膜表面,是一種條件致病菌,對機(jī)體免疫力低下的危重患者,如重癥監(jiān)護(hù)室(ICU)和燒傷科的病人威脅較大,可以引起各種組織和器官感染,包括肺炎、腦膜炎、菌血癥、尿路感染、外科傷口感染和軟組織感染等近年隨著臨床廣譜抗生素的廣泛使用及介入性操作的普及,鮑曼不動桿菌對臨床常用抗生素的耐藥性也呈逐年上升趨勢,多重耐藥菌比例明顯增加。近年來研究發(fā)現(xiàn),鮑曼不動桿菌的耐藥并不局限于抗生素,許多耐藥鮑曼不動桿菌對醫(yī)院常用消毒劑的抗力要高于標(biāo)準(zhǔn)菌株,這給醫(yī)院消毒劑的選擇與使用方法提出了新的要求,也對院內(nèi)感染控制工作帶來了新的挑戰(zhàn)。 [目的] 為了解鮑曼不動桿菌臨床分離菌株耐藥性和消毒劑抗性特征,本研究收集了山東省國家級醫(yī)院感染監(jiān)測點(diǎn)醫(yī)院的46株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株,選擇臨床常用的26種抗生素進(jìn)行體外藥敏試驗(yàn)、用胍類消毒劑進(jìn)行了抗性檢測(MIC、MBC試驗(yàn)),采用PCR擴(kuò)增技術(shù)對部分菌株進(jìn)行了消毒劑抗性基因篩查。其主要目的為： (1)了解山東省醫(yī)院鮑曼不動桿菌臨床分離菌株臨床分布和耐抗生素現(xiàn)狀； (2)分析比較臨床分離的多重耐藥鮑曼不動桿菌對胍類消毒劑(聚六亞甲基單胍和聚六亞甲基雙胍)的抗抑菌效果； (3)從分子水平上探討消毒劑抗性基因、鮑曼不動桿菌耐藥和消毒劑抗性表型之間的關(guān)系。 (4)為臨床合理使用消毒劑,提高消毒效果,預(yù)防控制鮑曼不動桿菌引起的感染及相關(guān)疾病提供科學(xué)依據(jù)。 [方法] 本研究收集了山東省濟(jì)南市和臨沂市的46株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株,使用藥敏紙片和最小抑菌濃度試驗(yàn)(MIC)對鮑曼不動桿菌臨床分離菌株耐藥性進(jìn)行監(jiān)測；用酸性曙紅比色法測定聚六亞甲基胍含量；使用消毒劑最小抑菌濃度(MIC)、最小殺菌濃度(MBC)測定鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對胍類消毒劑的抗性,并與標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸桿菌(8099)和鮑曼不動桿菌(ATCC10501)進(jìn)行比較；采用PCR擴(kuò)增技術(shù)篩查鮑曼不動桿菌臨床分離菌株消毒劑抗性基因攜帶情況。 [結(jié)果] (1)46株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株中,多重耐藥菌者占93.48%(42/46), 不同地區(qū)、不同醫(yī)院收集的菌株對抗生素耐藥率存在差異。 (2)44株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對聚六亞甲基單胍的MIC結(jié)果平均值和中位數(shù)分別是13.95(1.56～200)mg/L和6.25mg/L；對聚六亞甲基雙胍的MIC結(jié)果的平均值和中位數(shù)分別是18.82(3.12～200)mg/L和12.5mg/L 44株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株與鮑曼不動桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC10501、大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株8099對聚六亞甲基單胍MIC實(shí)驗(yàn)結(jié)果相比,鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對聚六亞甲基單胍的抗力與鮑曼不動桿菌ATCC10501(t=0.636,p=0.528)和大腸桿菌8099(t=0.636,p=0.528)的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 44株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株與鮑曼不動桿菌ATCC10501、大腸桿菌8099聚六亞甲基雙胍MIC實(shí)驗(yàn)結(jié)果相比,鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對聚六亞甲基雙胍的抗力大于大腸桿菌8099(t=4.075,p0.001),與鮑曼不動桿菌ATCC10501(t=-0.901,p=0.372)的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 44株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對聚六亞甲基單胍與聚六亞甲基雙胍MIC實(shí)驗(yàn)結(jié)果相比,鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對聚六亞甲基雙胍的抗性要強(qiáng)于聚六亞甲基單胍(t=-2.339,p=0.022)。 (3)36株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對聚六亞甲基單胍的MBC結(jié)果平均值及范圍、中位數(shù)分別是207.8(6.25～1600)mg/L和100mg/L；聚六亞甲基雙胍的MBC的平均值及范圍、中位數(shù)分別是380.9(12.5～1600)mg/L和400mg/L。 36株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株與鮑曼不動桿菌ATCC10501、大腸桿菌8099對聚六亞甲基單胍MBC實(shí)驗(yàn)結(jié)果相比,鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對聚六亞甲基單胍的抗力大于大腸桿菌8099(t=7.026,p0.001),與鮑曼不動桿菌ATCC10501(t=0.281,p=0.780)的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 36株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株與鮑曼不動桿菌ATCC10501、大腸桿菌8099聚六亞甲基雙胍MBC實(shí)驗(yàn)結(jié)果相比,鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對聚六亞甲基雙胍的抗力小于鮑曼不動桿菌ATCC10501(t=-2.562, p=0.015),但大于大腸桿菌8099(t=5.460,p0.001)。 36株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對聚六亞甲基單胍與聚六亞甲基雙胍MBC的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相比,鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對聚六亞甲基雙胍的抗性要強(qiáng)于聚六亞甲基單胍(t=-3.299,p=0.002)。 上述結(jié)果顯示,聚六亞甲基單胍對鮑曼不動桿菌抑菌和殺菌能力大于聚六亞甲基雙胍。 (4)選擇23株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株進(jìn)行消毒劑抗性基因攜帶情況分析,在其染色體和質(zhì)粒上均未能檢出qacA/B基因,qacA/B攜帶率為0%,結(jié)果顯示未發(fā)現(xiàn)鮑曼不動桿菌臨床分離菌株攜帶qacA/B基因；標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸桿菌8099、臨床分離的銅綠假單胞菌、大腸桿菌染色體及質(zhì)粒上也均未檢出qacA/B基因。23株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株中有21株在其染色體和質(zhì)粒上均檢出qacE△1-sull基因,1株鮑曼不動桿菌臨床分離菌株在其質(zhì)粒上檢出qacE△1-sull基因,1株菌染色體和質(zhì)粒上都未檢出qacE△1-sull基因,其質(zhì)粒和染色體qacE△1-sull基因攜帶率分別為95.65%(22/23)和91.30%(21/23)。在臨床分離的1株銅綠假單胞菌和1株大腸桿菌染色體和質(zhì)粒上均檢出qacE△1-sul1基 [結(jié)論] (1)山東省濟(jì)南市與臨沂市鮑曼不動桿菌臨床分離菌株呈多重耐藥現(xiàn)象,不同地區(qū)、不同醫(yī)院鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對抗菌藥物的耐藥性存在差異。 (2)聚六亞甲基單胍對鮑曼不動桿菌臨床分離菌株的抑菌能力與鮑曼不動桿菌ATCC10501和大腸桿菌8099相比無差異；聚六亞甲基單胍對鮑曼不動桿菌臨床分離菌株的殺菌能力與鮑曼不動桿菌ATCC10501無差異,但強(qiáng)于大腸桿菌8099。 聚六亞甲基雙胍對鮑曼不動桿菌臨床分離菌株的抑菌能力與鮑曼不動桿菌ATCC10501相比無差異,強(qiáng)于大腸桿菌8099；聚六亞甲基雙胍對鮑曼不動桿菌臨床分離菌株的殺菌能力比鮑曼不動桿菌ATCC10501較弱,強(qiáng)于大腸桿菌8099。 鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對聚六亞甲基雙胍的抗性均要強(qiáng)于聚六亞甲基單胍,說明聚六亞甲基單胍對鮑曼不動桿菌臨床分離菌株抑菌和殺菌能力要強(qiáng)于聚六亞甲基雙胍。 (3)鮑曼不動桿菌臨床分離菌株質(zhì)粒和染色體qacA/B基因攜帶率均為0%,說明臨床鮑曼不動桿菌菌株qacA/B基因攜帶率現(xiàn)象極低。而鮑曼不動桿菌臨床分離菌株質(zhì)粒和染色體qacE△1-sull基因攜帶率分別為95.65%和91.30%,說明鮑曼不動桿菌臨床分離菌株qacE△1-sull基因攜帶是普遍現(xiàn)象。質(zhì)粒上qacE△1-sull基因高攜帶率高提示鮑曼不動桿菌可能易于在菌株之間進(jìn)行基因抗性傳播。鮑曼不動桿菌qacE△1-sull基因陽性菌株與陰性菌株MIC、MBC結(jié)果對比,qacE△1-sull基因與其抗性表型可能無必然聯(lián)系。這一結(jié)論有待進(jìn)一步深入研究。 (4)鮑曼不動桿菌是引起院內(nèi)感染的重要條件致病菌,其多重耐藥菌性呈逐年上升趨勢。在醫(yī)院對鮑曼不動桿菌引發(fā)的疾病防控措施中,阻斷傳播途徑是重要手段之一。長期大量使用單一、不足量的消毒劑將使許多細(xì)菌對消毒劑產(chǎn)生了抗性,多重耐藥鮑曼不動桿菌臨床分離菌株對胍類消毒劑的抗性超過標(biāo)準(zhǔn)菌株且攜帶消毒劑抗性基因,在臨床使用消毒劑中應(yīng)引起足夠的重視,研究還表明,選擇新型單胍類消毒劑效果要好于雙胍消毒劑。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R378

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1282902