本文關鍵詞：伯氏瘧原蟲CSP基因N端蛋白靶向肝細胞的研究

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【摘要】：目的研究伯氏瘧原蟲CSP基因的N端蛋白與小鼠肝細胞膜HPSGs受體結合后在體外、體內的肝組織靶向性。方法將伯氏瘧原蟲CSP基因N端片段(PbCSP-N)克隆入原核表達質粒pET-28α,經IPTG誘導表達重組蛋白,經親和層析純化后采用Western blot方法鑒定;采用Pull-down方法檢測PbCSP-N蛋白與小鼠肝細胞表面受體硫酸乙酰肝素糖蛋白(Heparan sulfate proteoglycan,HSPG)的結合力;應用免疫組化、放射性碘標記示蹤方法檢測該蛋白在體外、體內特異性靶向小鼠肝組織作用。結果成功構建PbCSP-N原核表達質粒并表達、純化出PbCSP-N重組蛋白(15ku),Pull-down方法證實該蛋白可與小鼠肝細胞膜HPSGs受體結合,免疫組化試驗顯示該重組蛋白定位于正常小鼠肝細胞膜,表明該蛋白可特異結合正常小鼠肝細胞膜;放射性碘(125I)標記示蹤顯示,標記的重組蛋白在注射1、2、4、6、12h后在小鼠肝臟分布較多,表明該重組蛋白可靶向正常小鼠肝組織。結論伯氏瘧原蟲CSP基因N端蛋白與肝細胞膜HPSGs受體結合后在體內、外靶向肝細胞,可作為肝細胞靶向性藥物候選分子。
【作者單位】： 廣州醫(yī)科大學基礎學院病原生物學與免疫學教研室;襄陽市第一人民醫(yī)院;
【基金】：廣州市屬高�？萍加媱濏椖�(No.08A097,No.10A173) 廣東省醫(yī)學科研基金項目(No.B2012165) 廣州市重點學科建設項目(No.B127007) 廣東省高等教育教學改革項目(No.GDJG20142273)
【分類號】：R382
【正文快照】： ***當感染瘧原蟲按蚊叮咬中間宿主后,瘧原蟲子孢子進入宿主血液循環(huán),30min內便可入侵肝細胞[1]。子孢子之所以能迅速特異入侵肝細胞,主要是由于子孢子表面的環(huán)子孢子蛋白(Circumsporozoite protein,CSP)能夠與肝細胞表面受體硫酸乙酰肝素糖蛋白(heparan sulfate proteoglycan,

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