本文關(guān)鍵詞：大電導(dǎo)鈣激活鉀通道對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖影響的研究

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【摘要】：目的：通過體外開放和拮抗大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs)細(xì)胞膜大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(BKca)，觀察干預(yù)離子通道對(duì)BMSCs增殖的影響并探討其機(jī)制。 方法：該研究分離培養(yǎng)原代大鼠BMSCs，穩(wěn)定傳至3代。采用BKca通道特異性開放劑(NS1619)和拮抗劑(IBTX)對(duì)BMSCsS進(jìn)行體外干預(yù)，，根據(jù)干預(yù)條件不同，細(xì)胞分為4組：Control組、DMSO組(溶劑對(duì)照組)、NS1619組、IBTX組。平板克隆、MTT檢測(cè)細(xì)胞克隆形成能力以及細(xì)胞增殖活力;流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期分布及細(xì)胞凋亡率;Western blot、定量PCR比較周期蛋白cyclin D1在基因和蛋白表達(dá)水平上的差異;整細(xì)胞膜片鉗技術(shù)分析BMSCs細(xì)胞膜電生理特性。 結(jié)果：（1）成功分離培養(yǎng)原代大鼠BMSCs,并穩(wěn)定傳至第3代。（2）NS1619組細(xì)胞膜K+外向電流較Control組振幅增大(P0.01)；（3）NS1619組細(xì)胞增殖能力和克隆形成能力較Control組增強(qiáng)(P0.05),凋亡較Control組減少(P0.05)；（4）此外NS1619組G1期細(xì)胞數(shù)明顯小于Control組(P0.01)，G2期細(xì)胞數(shù)明顯大于Control組(P0.05)，激活BKca通道明顯促進(jìn)BMSCs從G1期向S期過渡；（5）Western blot、定量PCR都顯示激活BKca通道導(dǎo)致BMSCs細(xì)胞周期蛋白及mRNA表達(dá)上調(diào)。（6）而拮抗BKca通道則相反，IBTX組檢測(cè)的各組值均與NS1619組相反。DMSO組各檢測(cè)值與Control組無明顯差異(P0.05)，溶劑對(duì)本實(shí)驗(yàn)不造成干擾。 結(jié)論：根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)：（1）開放BKca通道可以通過影響B(tài)MSCs周期進(jìn)程最終調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖。（2）該作用可能與BKca具有調(diào)節(jié)細(xì)胞膜K+電流外流的電生理特性有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李魯生;張涵;王成俊;程洪斌;安沂華;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離方法和生物學(xué)特性[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年10期

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本文編號(hào)：1262632