本文關(guān)鍵詞：亞抑菌濃度β-內(nèi)酰胺類抗生素對銅綠假單胞菌生物膜形成的影響研究

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【摘要】：目的：研究亞抑菌濃度(subminimal inhibitory concentration,sub-MIC)抗生素對細(xì)菌生物膜形成的影響,為探討細(xì)菌生物膜形成的調(diào)控機制及發(fā)現(xiàn)新的藥物靶點提供理論及實驗依據(jù)。方法：選取銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)的臨床分離菌株(PA.11、 PA.12、PA.14)和標(biāo)準(zhǔn)菌株(PAO1、ATCC27853)。采用微量肉湯稀釋法測定亞胺培南西司他丁鈉(IM/CI)、頭孢他啶(CAZ)、哌拉西林舒巴坦鈉(P/S)、頭孢曲松鈉(CRO)、頭孢噻肟(CTX)、阿莫西林氟氯西林鈉(A/F)的最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)。分別將1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC抗生素作用于PA,通過細(xì)菌黏附力試驗了解抗生素對細(xì)菌黏附力的影響。選用1/4MIC抗生素作用于PA.12,通過運動試驗、菌落計數(shù)法、結(jié)晶紫染色法及激光共聚焦顯微鏡(Confocal LaserScanning Microscope, CLSM)觀察1/4MIC抗生素對PA.12生物膜形成的影響,同時采用RT-PCR對生物膜形成相關(guān)基因algC、alg D進(jìn)行檢測分析。結(jié)果：1.細(xì)菌黏附力試驗結(jié)果顯示：(1)1/2MIC IM/CI、CAZ、P/S、CRO、CTX能增強PA.11的黏附力,1/2MIC CAZ、CTX能增強PAO1的黏附力,1/2MIC A/F均能增強5株P(guān)A的黏附力(p≤0.05)。(2)除1/4MIC CAZ對PA.14黏附力無影響外,其余1/4MIC、1/8 MIC抗生素均能增強PA黏附力(p≤0.05)。2.選取1/4MIC抗生素作用于PA.12,與無藥對照組比較：(1)運動試驗結(jié)果顯示：1/4MIC IM/CI、CRO、CTX能增強PA.12的游動能力(p≤0.05);1/4MIC M/CI、CAZ, P/S、CRO、A/F能增強PA.12的群集運動能力(p≤0.05)。(2)菌落計數(shù)法結(jié)果顯示1/4MICIM/CI、P/S、CRO、CTX組PA.12活菌數(shù)量明顯增多(p≤0.05)。(3)結(jié)晶紫染色法顯示1/4MICM/CI、P/S、CRO、CTX能誘導(dǎo)PA.12生物膜形成(p≤0.05)。(4)CLSM觀察顯示1/4MIC IM/CI、P/S、CRO、CTX誘導(dǎo)PA.12生物膜形成增多,厚度增加。(5)RT-PCR結(jié)果顯示各抗生素均能增強algC基因表達(dá)(p≤0.05),IM/CI、P/S誘導(dǎo)algD基因表達(dá)增強(p≤0.05)。結(jié)論：1/4MIC IM/CI、P/S、CRO、CTX能誘導(dǎo)PA.12生物膜形成,1/4MIC CAZ、A/F對細(xì)菌生物膜形成沒有影響；1/4MIC IM/CI、CAZ、P/S、CRO、CTX、A/F對銅綠假單胞菌群體感應(yīng)(quorum sensing, QS)系統(tǒng)具有調(diào)節(jié)作用。
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R378.991

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本文編號：1254843