本文關(guān)鍵詞：精液凝固蛋白I活性片段的表達(dá)及活性分析

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【摘要】：目的：制備重組Semenogelin (Sg)及其不同的小分子衍生肽并研究其對(duì)精子活動(dòng)的影響。 方法：用分子克隆技術(shù)從精囊中提取精囊組織總RNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,設(shè)計(jì)特異性的引物,通過(guò)PCR擴(kuò)增Sg的N端和C端片段的DNA,將DNA插入質(zhì)粒載體PET32a,篩選出序列正確的陽(yáng)性克隆,轉(zhuǎn)染BL21大腸埃希菌,通過(guò)誘導(dǎo)表達(dá)重組人類(lèi)Sg的N端和C端片段,用鎳柱親和純化重組蛋白,通過(guò)鹽透析恢復(fù)活性,通過(guò)梯度密度離心法得到正常生育男性活動(dòng)精子進(jìn)行抑制試驗(yàn)分析,研究重組Sg的C端和N端片段對(duì)精子活動(dòng)的影響。 結(jié)果：重組Sg的N端片段在200pg/個(gè)精子的濃度下具有抑制精子運(yùn)動(dòng)的作用(P0.001),C端片段對(duì)精子運(yùn)動(dòng)同樣存在抑制作用(P0.05)。結(jié)論：Sg分子中存在明顯抑制精子活性的氨基酸片段。 結(jié)論：Sg分子中存在明顯抑制精子活性的氨基酸片段。Sg24-163具有明確的精子抑制活性。Sg164-283同樣具有一定的精子抑制活性。且他們的精子抑制活性呈時(shí)間相關(guān)性。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R321.1

【參考文獻(xiàn)】

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1 王增軍;吳宏飛;錢(qián)立新;喬迪;邵劍鋒;張煒;眭元庚;徐正銓;;人類(lèi)精子表面附睪蛋白激酶抑制劑Eppin和精囊凝固蛋白Semenogelin的相互作用研究[J];中華男科學(xué)雜志;2006年05期

2 王增軍;張煒;吳宏飛;眭元庚;;精囊蛋白Semenogelin抑制精子活動(dòng)的活性片段分析[J];中華男科學(xué)雜志;2007年01期

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本文編號(hào)：1236574