本文關(guān)鍵詞：新型三唑類小分子人工抗原的合成

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【摘要】：三唑是含有三個(gè)氮原子的五元雜環(huán)結(jié)構(gòu),一般認(rèn)為,雜環(huán)結(jié)構(gòu)屬于較強(qiáng)的決定簇,有可能影響半抗原特征分子結(jié)構(gòu)的特異性,因此,目前較少有將雜環(huán)作為連接臂的相關(guān)報(bào)道。本研究將“Click Chemistry'’運(yùn)用到小分子半抗原的合成中,再通過(guò)與載體蛋白偶聯(lián),成功合成了具有新型三唑類結(jié)構(gòu)作為連接臂的一系列小分子人工抗原,打破了常規(guī)的直鏈結(jié)構(gòu)的人工抗原合成方法。因此,將三唑雜環(huán)作為連接臂的人工抗原的制備路線是有效可行的。 我們運(yùn)用‘'Click Chemistry"法成功合成了兩類激素類人工抗原：胺類激素類人工抗原(包括游離甲狀腺素(FT4)、游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3))；類固醇類激素類人工抗原(包括雌二醇、孕酮、睪酮、維生素D2、維生素D3)。其中,我們對(duì)游離甲狀腺素(FT4)和游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)進(jìn)行了活性研究。 1胺類激素類人工抗原的合成及活性研究 游離甲狀腺素(FT4)、游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)人工抗原的合成及活性研究 我們選擇羧基(-COOH)為修飾位點(diǎn),首先用二碳酸二叔丁酯(Boc2O)保護(hù)氨基,再通過(guò)酰胺鍵生成端基炔,利用“Click Chemistry",從而給FT4和FT3接上一個(gè)含有三唑結(jié)構(gòu)的戊酸作為連接臂。取上述合成的FT4和FT3半抗原,利用碳二亞胺法與牛血清白蛋白(BSA)進(jìn)行偶聯(lián),經(jīng)過(guò)低溫透析,得到相應(yīng)的FT4和FT3人工抗原。將FT4和FT3人工抗原免疫小鼠,用間接ELISA法測(cè)定其抗血清的效價(jià)分別為128000,64000,FT3的IC50值為0.37μg/mL。其中FT3的人工抗原活性較好,進(jìn)一步適用于尋找相應(yīng)的抗體。 2類固醇類激素類人工抗原的合成 2.1雌二醇、維生素D2、維生素D3人工抗原的合成 我們選擇雌二醇、維生素D2、維生素D3的羥基官能團(tuán)作為修飾位點(diǎn),在強(qiáng)堿條件下,氧負(fù)離子與溴丙炔成醚,再利用“Click Chemistry",與疊氮戊酸生成含有三唑環(huán)的半抗原。利用碳二亞胺法與牛血清白蛋白(BSA)進(jìn)行偶聯(lián),經(jīng)過(guò)低溫透析,得到相應(yīng)的人工抗原。 2.2孕酮和睪酮人工抗原的合成 我們對(duì)孕酮和睪酮4位進(jìn)行環(huán)氧化,與疊氮基團(tuán)發(fā)生加成反應(yīng),生成4位疊氮取代的孕酮和睪酮衍生物。再通過(guò)“Click Chemistry",與5-己炔酸甲酯生成含有三唑結(jié)構(gòu)的半抗原。利用碳二亞胺法與牛血清白蛋白(BSA)進(jìn)行偶聯(lián),經(jīng)過(guò)低溫透析,得到相應(yīng)的人工抗原。 3FT4和FT3人工抗原新的路線探索 將‘'Click Chemistry"法直接應(yīng)用于FT4和FT3人工抗原的合成,即首先將牛血清蛋白(BSA)直接與疊氮戊酸偶聯(lián),透析；再將FT4和FT3用二碳酸二叔丁酯(Boc2O)保護(hù)氨基,再通過(guò)酰胺鍵生成端基炔,最后利用“Click Chemistry",生成的FT4和FT3人工抗原。
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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