本文關(guān)鍵詞：肺炎鏈球菌糖代謝蛋白CcpA對(duì)莢膜多糖的調(diào)控作用

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【摘要】：【目的】研究肺炎鏈球菌糖代謝蛋白CcpA對(duì)肺炎鏈球菌莢膜多糖(CPS)的調(diào)控作用�！痉椒ā坷么竽c桿菌(Escherichia coli)BL21(DE3)工程菌原核表達(dá)CcpA蛋白,使用Ni2+親和層析的方法純化蛋白。利用純化后的CcpA蛋白免疫昆明小鼠并制備多克隆抗體;采用ELISA法測(cè)定抗CcpA抗體效價(jià)。隨后,利用Westertn blot方法分析CcpA蛋白在肺炎鏈球菌中的保守性。另外,利用EMSA方法分析CcpA與cps基因座啟動(dòng)子區(qū)域片段的結(jié)合。最后,構(gòu)建ccpA基因缺失株和ccpA基因回復(fù)株;利用ELISA法測(cè)定野生D39菌株、ccpA基因缺失株和ccpA基因回復(fù)株的莢膜多糖含量�！窘Y(jié)果】Western blot結(jié)果顯示CcpA蛋白在多種血清型的肺炎鏈球菌均有表達(dá),CcpA蛋白可與cps基因座啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合,且呈劑量依賴性;ccpA基因缺失時(shí),細(xì)菌CPS含量升高,回復(fù)表達(dá)CcpA蛋白后,CPS含量顯著降低�！窘Y(jié)論】CcpA是肺炎鏈球菌中一種保守表達(dá)的蛋白,可通過(guò)調(diào)節(jié)cps基因座啟動(dòng)子負(fù)性調(diào)控肺炎鏈球菌莢膜多糖的表達(dá)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;遵義醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】：高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金聯(lián)合資助課題——肺炎鏈球菌莢膜多糖cps基因座轉(zhuǎn)錄調(diào)控的分子機(jī)制研究(20135503110004)~~
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 微生物學(xué)報(bào)Acta Microbiologica Sinica55(6):732-738;4 June 2015ISSN 0001-6209;CN 11-1995/Qhttp://journals.im.ac.cn/actamicrocn肺炎鏈球菌糖代謝蛋白Ccp A對(duì)莢膜多糖的調(diào)控作用王麗濱1,徐紅梅1,吳凱峰2,鄭玉強(qiáng)1,王建敏1,馬峰1,張雪梅1,尹一兵1,張群1*1重慶醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)

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本文編號(hào)：1227042