本文關鍵詞：肺炎鏈球菌糖代謝蛋白CcpA對莢膜多糖的調控作用

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【摘要】：【目的】研究肺炎鏈球菌糖代謝蛋白CcpA對肺炎鏈球菌莢膜多糖(CPS)的調控作用�！痉椒ā坷么竽c桿菌(Escherichia coli)BL21(DE3)工程菌原核表達CcpA蛋白,使用Ni2+親和層析的方法純化蛋白。利用純化后的CcpA蛋白免疫昆明小鼠并制備多克隆抗體;采用ELISA法測定抗CcpA抗體效價。隨后,利用Westertn blot方法分析CcpA蛋白在肺炎鏈球菌中的保守性。另外,利用EMSA方法分析CcpA與cps基因座啟動子區(qū)域片段的結合。最后,構建ccpA基因缺失株和ccpA基因回復株;利用ELISA法測定野生D39菌株、ccpA基因缺失株和ccpA基因回復株的莢膜多糖含量�！窘Y果】Western blot結果顯示CcpA蛋白在多種血清型的肺炎鏈球菌均有表達,CcpA蛋白可與cps基因座啟動子區(qū)域結合,且呈劑量依賴性;ccpA基因缺失時,細菌CPS含量升高,回復表達CcpA蛋白后,CPS含量顯著降低�！窘Y論】CcpA是肺炎鏈球菌中一種保守表達的蛋白,可通過調節(jié)cps基因座啟動子負性調控肺炎鏈球菌莢膜多糖的表達。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院臨床檢驗診斷學教育部重點實驗室;遵義醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院檢驗科;
【基金】：高等學校博士學科點專項科研基金聯(lián)合資助課題——肺炎鏈球菌莢膜多糖cps基因座轉錄調控的分子機制研究(20135503110004)~~
【分類號】：R378
【正文快照】： 微生物學報Acta Microbiologica Sinica55(6):732-738;4 June 2015ISSN 0001-6209;CN 11-1995/Qhttp://journals.im.ac.cn/actamicrocn肺炎鏈球菌糖代謝蛋白Ccp A對莢膜多糖的調控作用王麗濱1,徐紅梅1,吳凱峰2,鄭玉強1,王建敏1,馬峰1,張雪梅1,尹一兵1,張群1*1重慶醫(yī)科大學檢驗

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