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不同理化因素對重組人成纖維細胞生長因子21蛋白純度的影響

發(fā)布時間:2017-11-25 08:25

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【摘要】:目的:研究重組人成纖維細胞生長因子21(rhFGF21)在不同保存條件下的穩(wěn)定性,闡明溫度、pH值、緩沖溶液和反復(fù)凍融因素對rhFGF21穩(wěn)定性的影響,進一步完善純化rhFGF21的工藝。方法:rhFGF21在不同溫度(-20℃、4℃和25℃)、不同pH值緩沖液(醋酸-醋酸鈉緩沖液pH 4.0和pH 5.0、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液pH 5.0和pH 6.0、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液pH 6.0、pH 6.5和pH 7.0,TrisHCl緩沖液pH 7.5和pH 8.0)中及反復(fù)凍融條件下分別保存,采用高效液相色譜法(HPLC)檢測rhFGF21純度,同時觀察外觀性狀。結(jié)果:于-20℃和4℃分別保存時,rhFGF21的各項性質(zhì)在觀察期內(nèi)均無明顯變化;25℃時,rhFGF21存放14d純度由0d時(100.00±0.00)%下降至(15.20±0.14)%(P0.01);在pH 4.0和pH 5.0緩沖液中25℃條件下保存7d,溶液出現(xiàn)渾濁;在pH 5.0和pH 6.0緩沖液中25℃條件下保存7d,溶液出現(xiàn)渾濁;在pH 6.5和pH 8.0磷酸鹽和Tris-HCl緩沖液中,溶液澄清透明;rhFGF21原液反復(fù)凍融后其純度變化差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:rhFGF21在低溫和pH 6.5~8.0磷酸鹽和Tris-HCl緩沖液中溶液較穩(wěn)定,反復(fù)凍融處理對rhFGF21穩(wěn)定性也有明顯影響。
【作者單位】: 吉林醫(yī)藥學院公共衛(wèi)生學院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學教研室;吉林醫(yī)藥學院檢驗學院生物技術(shù)教研室;
【基金】:國家自然科學基金資助課題(81273421) 吉林省科技廳科技發(fā)展計劃項目資助課題(20116044) 吉林省教育廳科研基金資助課題(361號)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 成纖維細胞生長因子21(fibroblast growthfactor 21,FGF21)是最新被發(fā)現(xiàn)的一個成纖維細胞生長因子家族的成員,屬于成纖維細胞生長因子19(fibroblast growth factor 19,FGF19)亞族[1-3]。FGF21作為FGF家族的新成員,其具有調(diào)控多種內(nèi)分泌功能[4]。研究[5-6]顯示:FGF21的功能主要

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本文編號:1225382

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