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鼠胎肝干細(xì)胞生物學(xué)特性與人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因介導(dǎo)的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-11-18 19:06

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【摘要】:背景:研究表明,感染人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因后的干細(xì)胞具有穩(wěn)定表達(dá)高水平端粒酶活性,且能使細(xì)胞增殖旺盛,這為建立基因工程的永生化干細(xì)胞系奠定了基礎(chǔ)。目的:探討人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因感染對(duì)體外培養(yǎng)鼠胎肝干細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的影響。方法:體外培養(yǎng)鼠胎肝干細(xì)胞,經(jīng)重組腺相關(guān)病毒作為載體介導(dǎo)人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因感染,用RT-PCR、Western blot檢測(cè)鼠胎肝干細(xì)胞人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因和蛋白的表達(dá),CCK-8法、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖情況,流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期分布的變化。結(jié)果與結(jié)論:與對(duì)照組、空載病毒組相比,基因感染組人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因和蛋白水平均有表達(dá),細(xì)胞的生長(zhǎng)速度明顯增快,G0/G1期細(xì)胞減少,S期細(xì)胞數(shù)增多。結(jié)果表明以重組腺相關(guān)病毒作為載體介導(dǎo)人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因感染能促進(jìn)體外培養(yǎng)的鼠胎肝干細(xì)胞增殖,對(duì)其培養(yǎng)有優(yōu)化作用。
【作者單位】: 天津醫(yī)科大學(xué)研究生院;天津市津南區(qū)咸水沽醫(yī)院外科;
【分類號(hào)】:R321
【正文快照】: 文章亮點(diǎn):1用重組腺相關(guān)病毒作為載體介導(dǎo)的端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因感染到體外培養(yǎng)的鼠胎肝干細(xì)胞中,感染后的細(xì)胞端粒酶活性明顯提高。2人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶的基因感染到體外培養(yǎng)的鼠胎肝干細(xì)胞中,可以使鼠胎肝干細(xì)胞壽命得以延長(zhǎng),無(wú)致瘤性,細(xì)胞仍保持正常的形態(tài)和功能。3實(shí)驗(yàn)采用重

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張曉輝;張建寧;康春生;張麗俠;;hTERT正、反義表達(dá)載體轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志;2006年03期

2 張潔;廖亞平;吳靈芝;孔令平;鄭敏;汪華僑;;hTERT基因轉(zhuǎn)染對(duì)人胚胎大腦皮質(zhì)神經(jīng)元生長(zhǎng)的影響[J];解剖學(xué)研究;2008年04期

3 孫冰;安靚;;胎肝干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定[J];中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2006年01期

4 吳靈芝;李水彬;程剛衛(wèi);汪華僑;孔令平;;hTERT基因轉(zhuǎn)染對(duì)人神經(jīng)元活力的影響[J];贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年02期

5 張志宏;曾永秋;稅青林;田強(qiáng);黃燕;趙小平;;hTERT-siRNA表達(dá)載體的構(gòu)建及對(duì)MCF-7細(xì)胞生長(zhǎng)、端粒酶活性的抑制作用[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2007年06期

6 趙矯;曾永秋;稅青林;趙小平;劉嵐;陳紹坤;;siRNA表達(dá)載體對(duì)MCF-7細(xì)胞生長(zhǎng)及其hTERT基因表達(dá)抑制的研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2008年03期

7 王開(kāi)利;遲淑萍;孫杰;邢漢前;劉俊威;趙鴻;趙軍;;外源hTERT基因?qū)θ烁渭?xì)胞增殖及CYP450 19A1表達(dá)的影響[J];軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào);2011年11期

8 肖揚(yáng),張洹;端粒酶hTR反義寡核苷酸對(duì)K562細(xì)胞端粒酶活性的影響[J];臨床血液學(xué)雜志;2003年01期

9 劉云燕;裘秀春;張殿忠;樊志強(qiáng);郭明君;文艷華;范清宇;;hTERT反義寡核苷酸對(duì)脊索瘤細(xì)胞周期及增殖的影響[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2011年10期

10 靳斌;王偉;劉澤陽(yáng);李廣振;杜剛;張宗利;韓立濤;黃國(guó)振;唐振宇;;外源hTERT基因轉(zhuǎn)染對(duì)老年大鼠供肝缺血再灌注損傷的防護(hù)作用[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年08期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫冰;孫曉艷;安靚;;構(gòu)建EGFP-PDX-1融合表達(dá)載體電穿孔轉(zhuǎn)染大鼠胎肝干細(xì)胞的研究[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2006年06期

2 劉軍;安靚;陳金拳;;胎鼠肝nestin陽(yáng)性細(xì)胞的分離培養(yǎng)和誘導(dǎo)分化研究[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2006年12期

3 肖揚(yáng),張洹,何冬梅;hTR反義寡核苷酸對(duì)急性白血病原代細(xì)胞端粒酶活性及凋亡的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2004年12期

4 趙矯;曾永秋;稅青林;趙小平;劉嵐;陳紹坤;;siRNA表達(dá)載體對(duì)MCF-7細(xì)胞生長(zhǎng)及其hTERT基因表達(dá)抑制的研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2008年03期

5 蔚洪恩;王春芳;李鵬飛;竇巖;索耀君;;大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞表面抗原CD71、CD44和CD45的檢測(cè)[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2007年04期

6 林興建;張穎冬;;粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子基因轉(zhuǎn)染的骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療腦梗死的療效及機(jī)制研究[J];臨床神經(jīng)病學(xué)雜志;2011年05期

7 曾永秋;趙矯;劉嵐;陳紹坤;余紅;稅青林;;DF3啟動(dòng)子調(diào)控的hTERT基因RNAi載體的構(gòu)建及靶向干擾效果的鑒定[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年05期

8 曾永秋;曹洋;余紅;趙矯;稅青林;;Survivin啟動(dòng)子調(diào)控的hTERT基因RNAi載體的構(gòu)建及其腫瘤靶向干擾作用研究[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年04期

9 吳靈芝;李水彬;成鋼衛(wèi);汪華僑;孔令平;;hTERT對(duì)干預(yù)后人胚胎神經(jīng)元cdk5 P-CREB表達(dá)影響的初步觀察[J];中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2014年16期

10 劉洪光;屈寶澤;陶貴周;黃建華;;RNA干擾人血凝素樣氧化型低密度脂蛋白受體表達(dá)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞骨架損傷的影響[J];中華老年心腦血管病雜志;2015年01期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 林興建;GM-CSF基因轉(zhuǎn)染的骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療缺血性腦血管病及其機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2007年

2 鐘達(dá);強(qiáng)化磷酸三鈣/富血小板血漿凝膠復(fù)合支架材料的制備及在體內(nèi)成骨的研究[D];中南大學(xué);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 徐燕;構(gòu)建永生化的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[D];石河子大學(xué);2007年

2 劉軍;肝源性nestin陽(yáng)性細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島β細(xì)胞治療1型糖尿病的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2007年

3 陳紹坤;聯(lián)合干擾hTERT和TRF2基因?qū)θ橄侔㎝CF-7細(xì)胞hTERT和TRF2蛋白表達(dá)及生長(zhǎng)抑制的研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2008年

4 錢玉紅;參芪扶正注射液聯(lián)合化療對(duì)急性白血病患者骨髓細(xì)胞端粒酶活性的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2009年

5 張士忠;GM1對(duì)大鼠脊髓半切損傷后神經(jīng)功能修復(fù)作用的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年

6 張慧慧;新型RNAi載體的構(gòu)建及其對(duì)腫瘤細(xì)胞端粒酶活性抑制的研究[D];中南大學(xué);2010年

7 高植泉;體外不同誘導(dǎo)條件對(duì)大鼠胚胎肝干細(xì)胞分化影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

8 王茂材;運(yùn)動(dòng)和胎肝細(xì)胞移植對(duì)大鼠阻塞性黃疸致肝損傷的修復(fù)與再生的影響[D];湖南師范大學(xué);2012年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 何國(guó)平,稅青林,黃燕,張思仲,余紅;乳腺癌組織中端粒酶活性的定量檢測(cè)及其與臨床病理的關(guān)系[J];癌癥;2004年09期

2 鄭秀娟;游曉青;林玲;鄭志z,

本文編號(hào):1200813


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