本文關(guān)鍵詞：小鼠卵母細(xì)胞體外成熟過程中卵丘細(xì)胞上細(xì)胞周期蛋白D2的表達(dá)

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【摘要】：目的檢測在小鼠卵母細(xì)胞體外成熟過程中卵丘細(xì)胞(CCs)上細(xì)胞周期蛋白D2(CCND2)表達(dá)水平的變化,探討其在卵母細(xì)胞成熟中的作用。方法從3周齡雌性ICR小鼠獲取GV期卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體(GV-COCs),體外培養(yǎng)至MⅡ期卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體(MⅡ-COCs)。收集對應(yīng)的CCs,分成GV-CCs和MⅡ-CCs二組,實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)和蛋白印跡方法檢測CCND2mRNA和蛋白水平的表達(dá);激光共聚焦免疫熒光技術(shù)觀察COCs成熟前后CCND2的亞細(xì)胞定位。結(jié)果 GV-CCs的CCND2mRNA相對表達(dá)量(7.03±1.11),顯著高于MⅡ-CCs組(1.40±0.11)(P0.01);同樣,GVCCs組CCND2蛋白相對表達(dá)水平(1.98±0.16)也顯著高于MⅡ-CCs組(1.16±0.14)(P0.01)。免疫熒光顯示,COCs中CCND2定位于CCs,卵母細(xì)胞亦有表達(dá);CCs中CCND2主要定位于胞核,胞質(zhì)中少量表達(dá),且GV-CCs主要表達(dá)在內(nèi)層CCs,而MⅡ-CCs則失去這種表達(dá)極性,同時(shí)MⅡ-CCs的表達(dá)強(qiáng)度較GV-CCs減弱。結(jié)論卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)過程中,其周圍的CCs上CCND2表達(dá)水平下降,且伴隨細(xì)胞定位的改變,提示CCs上CCND2與卵母細(xì)胞成熟密切相關(guān),可能參與了卵母細(xì)胞成熟過程。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81270746) 國家973項(xiàng)目(2012CB944703) 衛(wèi)生公益行業(yè)科研專項(xiàng)(201402004)
【分類號】：R321
【正文快照】： Methods:Immature COCs,also known as germinal vesicle COCs(GV-COCs),were isolated from 3-weeks old mice and cultured in vitro to metaphaseⅡstage COCs(MⅡ-COCs).CCs were stripped fromGV-COCs and MⅡ-COCs respectively and defined as GV-CCs group and MⅡ-CC

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：1199809