發(fā)布時間：2017-11-16 17:01

  本文關鍵詞：慢病毒載體介導Nanog小分子干擾核糖核酸抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生長

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【摘要】：目的構建對Nanog基因有干擾作用的慢病毒載體,探討其在人胃癌細胞SGC-7901裸鼠移植瘤模型中的表達,檢測其對裸鼠移植瘤生長的影響。方法將前期細胞實驗驗證有效的siRNA序列構建于慢病毒載體中,制備攜帶shRNA-Nanog的慢病毒,同時構建胃癌裸鼠移植瘤模型。以lentivirus-shRNA-Nanog感染的裸鼠作為實驗組(目的組),以無關序列慢病毒感染的裸鼠(空載體組)及未感染的裸鼠(未感染組)作為對照組,測量腫瘤瘤體體積及質(zhì)量的變化;活體熒光成像觀察總熒光強度及轉移情況,Western blot法檢測移植瘤組織中Nanog蛋白的表達情況;TUNEL法觀察其對皮下移植瘤細胞凋亡的影響。結果經(jīng)基因測序鑒定,Nanog基因shRNA重組慢病毒表達載體構建成功�；铙w熒光成像顯示感染27 d后,目的組小鼠腫瘤總熒光強度明顯低于空載體組和未感染組,裸鼠移植瘤瘤體積及瘤質(zhì)量小于未感染組及空載體組;Western blot法顯示目的組Nanog蛋白表達較對照組明顯降低;TUNEL結果顯示目的組凋亡指數(shù)較對照組明顯增大,而空載體組與未感染組比較,差異無統(tǒng)計學意義。結論成功構建了Nanog基因shRNA表達載體并包裝成慢病毒顆粒,在體內(nèi)感染能明顯抑制腫瘤生長。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科;
【分類號】：R735.2;R-332
【正文快照】： 胃癌是世界衛(wèi)生組織公布的四大惡性腫瘤之一。全世界35%的胃癌發(fā)生在中國。手術、放療和化療是目前治療胃癌比較成熟的三大方法,但由于早期診斷率低,其死亡率一直居高不下,胃癌的基因治療為我們提供了新的思路。Nanog基因作為新轉錄因子參與胚胎干細胞的表達,同時胚胎干細胞亞

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本文編號：1193012