本文關(guān)鍵詞：慢病毒載體介導(dǎo)Nanog小分子干擾核糖核酸抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)

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【摘要】：目的構(gòu)建對(duì)Nanog基因有干擾作用的慢病毒載體,探討其在人胃癌細(xì)胞SGC-7901裸鼠移植瘤模型中的表達(dá),檢測(cè)其對(duì)裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響。方法將前期細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證有效的siRNA序列構(gòu)建于慢病毒載體中,制備攜帶shRNA-Nanog的慢病毒,同時(shí)構(gòu)建胃癌裸鼠移植瘤模型。以lentivirus-shRNA-Nanog感染的裸鼠作為實(shí)驗(yàn)組(目的組),以無(wú)關(guān)序列慢病毒感染的裸鼠(空載體組)及未感染的裸鼠(未感染組)作為對(duì)照組,測(cè)量腫瘤瘤體體積及質(zhì)量的變化;活體熒光成像觀察總熒光強(qiáng)度及轉(zhuǎn)移情況,Western blot法檢測(cè)移植瘤組織中Nanog蛋白的表達(dá)情況;TUNEL法觀察其對(duì)皮下移植瘤細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果經(jīng)基因測(cè)序鑒定,Nanog基因shRNA重組慢病毒表達(dá)載體構(gòu)建成功�；铙w熒光成像顯示感染27 d后,目的組小鼠腫瘤總熒光強(qiáng)度明顯低于空載體組和未感染組,裸鼠移植瘤瘤體積及瘤質(zhì)量小于未感染組及空載體組;Western blot法顯示目的組Nanog蛋白表達(dá)較對(duì)照組明顯降低;TUNEL結(jié)果顯示目的組凋亡指數(shù)較對(duì)照組明顯增大,而空載體組與未感染組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論成功構(gòu)建了Nanog基因shRNA表達(dá)載體并包裝成慢病毒顆粒,在體內(nèi)感染能明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科;
【分類號(hào)】：R735.2;R-332
【正文快照】： 胃癌是世界衛(wèi)生組織公布的四大惡性腫瘤之一。全世界35%的胃癌發(fā)生在中國(guó)。手術(shù)、放療和化療是目前治療胃癌比較成熟的三大方法,但由于早期診斷率低,其死亡率一直居高不下,胃癌的基因治療為我們提供了新的思路。Nanog基因作為新轉(zhuǎn)錄因子參與胚胎干細(xì)胞的表達(dá),同時(shí)胚胎干細(xì)胞亞

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本文編號(hào)：1193012