本文關鍵詞：外界環(huán)境因素對細菌整合子捕獲耐藥性基因盒調(diào)控機制的研究

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【摘要】：目的： 通過測定不同培養(yǎng)時間及不同培養(yǎng)溫度下，大腸桿菌BL21(DE3)宿主中整合子的整合頻率，研究環(huán)境因素對整合子捕獲耐藥性基因盒頻率的影響，探討整合子介導和傳播細菌耐藥性的調(diào)控機制，為臨床合理有效使用抗生素，減少耐藥菌株的產(chǎn)生和播散提供借鑒。 方法： 1.用pUC19為載體構建高表達整合酶的重組質(zhì)粒pUCINT,隨后在pACYC184載體的不同位置分別插入整合子以及氨基糖苷腺苷轉移酶（aadA2）基因盒，該重組質(zhì)粒命名為pACINAD,將這2種相容的重組質(zhì)粒轉化大腸桿菌BL21(DE3)，將10株此菌株培養(yǎng)12h和24h后用實時熒光定量PCR反應測定發(fā)生整合作用的整合子的拷貝數(shù)和總的整合子的拷貝數(shù)，整合頻率為前者與后者的比值。 2.將20株此菌株隨機分成2組，，每組各10株，分別在41℃和37℃培養(yǎng)24h后測定大腸桿菌BL21(DE3)宿主中整合子的整合效率。 結果： 1.大腸桿菌BL21(DE3)宿主中整合子在12h時點整合效率的均值為5.51×10-5，在24h時點整合效率的均值為1.82×10-4。比較10株此菌株兩個時點的整合效率，差異有統(tǒng)計學意義(t=5.165，P0.01)。 2.在41℃大腸桿菌BL21(DE3)宿主中所測得的重組效率為1.81×10-3，在37℃的重組效率為1.75×10-4。比較兩者的重組效率，41℃組明顯高于37℃組，差異具有統(tǒng)計學意義(t=9.266，P0.01)。 結論： 1.饑餓應激對整合子捕獲耐藥性基因盒頻率有明顯的提高作用. 2.高溫可顯著提高整合子對aadA2耐藥性基因盒的整合效率。 3.表明不同的外界環(huán)境因素可影響整合子捕獲基因盒的效率，研究環(huán)境因素對整合子捕獲耐藥性基因盒效率的影響，對于指導臨床合理用藥，以及可能開發(fā)出有效的藥物或者采取一定措施來阻斷這一過程以延緩耐藥性基因的水平傳播和多重耐藥菌株的出現(xiàn)奠定基礎。
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R3416;R378

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 孟甄,金建玲,高培基;細菌饑餓存活與耐受性[J];國外醫(yī)藥(抗生素分冊);2002年02期

2 李向陽;邵衛(wèi)華;刁恩杰;張洪林;;溫度、pH、藥物對大腸桿菌抑制作用的量熱法研究[J];食品科學;2007年06期

3 李心暉,石磊,楊維青,曹以誠,張宏梅,尹曉琳,鄭美萍;三類整合酶基因(intⅠ)的簡并引物PCR方法建立及應用[J];中華微生物學和免疫學雜志;2005年02期

4 許宏濤,陳東科,張秀珍;多重耐藥綠膿假單胞菌中I類整合子的研究[J];中華檢驗醫(yī)學雜志;2005年07期

5 楊澤華;蔣曉飛;魏取好;呂元;;一種研究耐藥性整合子整合功能體系的建立[J];中華檢驗醫(yī)學雜志;2007年12期

6 黃永茂;吳志鵑;陳楓;王旭;鐘利;向成玉;陳莊;鄒永勝;;大腸埃希菌Ⅰ類整合子與多藥耐藥的相關性探討[J];中華醫(yī)院感染學雜志;2011年14期

7 馮潔;石磊;肖增璜;李琳;陳洵;蘇健裕;李心暉;鄭美萍;邱春嫦;付強;;細菌耐藥整合子intI分類的多重PCR方法的建立及應用[J];中國抗生素雜志;2005年10期

8 魏取好;蔣曉飛;呂元;;細菌整合子研究進展[J];中國抗生素雜志;2008年01期

9 李彥媚;趙喜紅;徐澤智;徐振波;;新型細菌耐藥元件——整合子系統(tǒng)[J];中國抗生素雜志;2012年01期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 楊澤華;整合子捕獲基因盒效率調(diào)控機制研究[D];復旦大學;2008年

本文編號：1182003