脂多糖預處理對低氧誘導小鼠表達HIF-1α的影響
發(fā)布時間:2017-11-12 00:01
本文關鍵詞:脂多糖預處理對低氧誘導小鼠表達HIF-1α的影響
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【摘要】:1脂多糖預處理對細胞性低氧小鼠巨噬細胞表達HIF-1α和VEGF的影響 目的觀察致炎因子脂多糖預處理對低氧狀態(tài)誘導巨噬細胞在體外表達HIF-1α和VEGF的影響。 方法培養(yǎng)小鼠巨噬細胞Raw264.7,采用CCK8法觀察細胞在LPS和CoCl2作用下經(jīng)不同時間培養(yǎng)后的增值情況,再將細胞分為以下4組:正常對照組(無處理因素),LPS(1mg/L)組,CoCl2(100μmol/L)組,LPS(1mg/L)預處理組(LPS-Pre,LPS作用8h后再給予CoCl2刺激)。采用RT-PCR檢測LPS和CoCl2對Raw264.7表達HIF-1α和VEGF mRNA的影響;采用免疫細胞化學方法在鏡下定性觀察HIF-1α和VEGF蛋白在細胞的表達情況,采用Western blot定量檢測HIF-1α和VEGF蛋白表達水平的變化。 結(jié)果 (1)CCK8數(shù)據(jù)顯示LPS和CoCl2對Raw264.7細胞增殖的影響均在8h后趨向穩(wěn)定; (2)RT-PCR結(jié)果顯示,與對照組比較,CoCl2組和LPS-Pre組表達HIF-1αmRNA和VEGF mRNA均增加(P0.05),其中,LPS-Pre組表達水平高于CoCl2組(P0.05); (3)DAB染色和Western blot檢測結(jié)果顯示,與對照組比較,LPS組,CoCl2組,LPS-Pre組表達HIF-1α和VEGF蛋白均增加(P0.05),其中,LPS-Pre組表達水平高于CoCl2組(P0.05)。 結(jié)論LPS預處理能在轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平上調(diào)CoCl2刺激的巨噬細胞表達HIF-1α和VEGF。 2脂多糖預處理對低張性低氧小鼠肺組織表達HIF-1α的影響 目的觀察致炎因子脂多糖預處理對低氧狀態(tài)誘導小鼠體內(nèi)肺組織表達HIF-1α的影響。 方法將雄性ICR(SPF級)小鼠隨機分為正常對照組(無處理因素),LPS組,,低氧組,LPS預處理組(LPS-Pre組)。對照組無任何處理因素,給予低氧組咽后壁吸入生理鹽水(50μL),給予LPS組和LPS-Pre組咽后壁吸入LPS(50μL,2g/L)。將低氧組和LPS預處理組小鼠放置于缺氧瓶中給予持續(xù)低氧處理2.5h后,處死小鼠,同時也處死未作低氧處理的對照組和LPS組小鼠,各組小鼠經(jīng)解剖取出完整肺臟稱取肺濕重,計算肺系數(shù);取部分肺組織經(jīng)HE染色進行組織病理學觀察;部分肺組織經(jīng)RT-PCR法檢測各組HIF-1α mRNA的表達水平、并以Western blot法檢測各組HIF-1α蛋白的表達水平。 結(jié)果 (1)吸入LPS的兩組小鼠肺系數(shù)明顯增高,HE染色顯示肺內(nèi)明顯炎癥細胞浸潤,部分肺組織發(fā)生炎性實變; (2) RT-PCR結(jié)果顯示, LPS-Pre組HIF-1α mRNA表達明顯高于對照組;也明顯高于LPS組和低氧組(P0.05) (3) Western blot結(jié)果顯示,與對照組比較, LPS組和LPS-Pre組HIF-1α蛋白表達增加(P0.05),低氧組HIF-1α蛋白表達雖略有增加,但尚不顯著;其中,LPS-Pre組表達水平也明顯高于LPS組和低氧組(P0.05)。 結(jié)論LPS預處理可增強小鼠肺組織在低氧時HIF-1α mRNA和蛋白的表達。
【學位授予單位】:蘇州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R363
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 周衛(wèi)芳;程羽青;張?zhí)K;袁紅燕;謝可鳴;;LPS誘導的急性炎性肝損傷中HIF-1α的表達[J];蘇州大學學報(醫(yī)學版);2007年01期
2 王亮;謝平;劉立民;謝可鳴;;脂多糖誘導小鼠腹腔巨噬細胞缺氧誘導因子-1α表達的信號通路研究[J];蘇州大學學報(醫(yī)學版);2010年01期
本文編號:1173419
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