本文關(guān)鍵詞：脂多糖預(yù)處理對低氧誘導(dǎo)小鼠表達(dá)HIF-1α的影響

  更多相關(guān)文章： LPS 炎癥 低氧 HIF-1α RT-PCR Western blot 小鼠

【摘要】：1脂多糖預(yù)處理對細(xì)胞性低氧小鼠巨噬細(xì)胞表達(dá)HIF-1α和VEGF的影響 目的觀察致炎因子脂多糖預(yù)處理對低氧狀態(tài)誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞在體外表達(dá)HIF-1α和VEGF的影響。 方法培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞Raw264.7，采用CCK8法觀察細(xì)胞在LPS和CoCl2作用下經(jīng)不同時(shí)間培養(yǎng)后的增值情況，再將細(xì)胞分為以下4組：正常對照組(無處理因素)，LPS（1mg/L）組，CoCl2(100μmol/L)組，LPS（1mg/L）預(yù)處理組（LPS-Pre，LPS作用8h后再給予CoCl2刺激)。采用RT-PCR檢測LPS和CoCl2對Raw264.7表達(dá)HIF-1α和VEGF mRNA的影響；采用免疫細(xì)胞化學(xué)方法在鏡下定性觀察HIF-1α和VEGF蛋白在細(xì)胞的表達(dá)情況，采用Western blot定量檢測HIF-1α和VEGF蛋白表達(dá)水平的變化。 結(jié)果 （1）CCK8數(shù)據(jù)顯示LPS和CoCl2對Raw264.7細(xì)胞增殖的影響均在8h后趨向穩(wěn)定； （2）RT-PCR結(jié)果顯示，與對照組比較，CoCl2組和LPS-Pre組表達(dá)HIF-1αmRNA和VEGF mRNA均增加（P0.05），其中，LPS-Pre組表達(dá)水平高于CoCl2組（P0.05）； （3）DAB染色和Western blot檢測結(jié)果顯示，與對照組比較，LPS組，CoCl2組，LPS-Pre組表達(dá)HIF-1α和VEGF蛋白均增加（P0.05），其中，LPS-Pre組表達(dá)水平高于CoCl2組（P0.05）。 結(jié)論LPS預(yù)處理能在轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平上調(diào)CoCl2刺激的巨噬細(xì)胞表達(dá)HIF-1α和VEGF。 2脂多糖預(yù)處理對低張性低氧小鼠肺組織表達(dá)HIF-1α的影響 目的觀察致炎因子脂多糖預(yù)處理對低氧狀態(tài)誘導(dǎo)小鼠體內(nèi)肺組織表達(dá)HIF-1α的影響。 方法將雄性ICR（SPF級）小鼠隨機(jī)分為正常對照組(無處理因素)，LPS組，，低氧組，LPS預(yù)處理組(LPS-Pre組)。對照組無任何處理因素，給予低氧組咽后壁吸入生理鹽水(50μL)，給予LPS組和LPS-Pre組咽后壁吸入LPS（50μL，2g/L）。將低氧組和LPS預(yù)處理組小鼠放置于缺氧瓶中給予持續(xù)低氧處理2.5h后，處死小鼠，同時(shí)也處死未作低氧處理的對照組和LPS組小鼠，各組小鼠經(jīng)解剖取出完整肺臟稱取肺濕重，計(jì)算肺系數(shù)；取部分肺組織經(jīng)HE染色進(jìn)行組織病理學(xué)觀察；部分肺組織經(jīng)RT-PCR法檢測各組HIF-1α mRNA的表達(dá)水平、并以Western blot法檢測各組HIF-1α蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果 (1)吸入LPS的兩組小鼠肺系數(shù)明顯增高，HE染色顯示肺內(nèi)明顯炎癥細(xì)胞浸潤，部分肺組織發(fā)生炎性實(shí)變； (2) RT-PCR結(jié)果顯示， LPS-Pre組HIF-1α mRNA表達(dá)明顯高于對照組；也明顯高于LPS組和低氧組（P0.05） (3) Western blot結(jié)果顯示，與對照組比較， LPS組和LPS-Pre組HIF-1α蛋白表達(dá)增加（P0.05），低氧組HIF-1α蛋白表達(dá)雖略有增加，但尚不顯著；其中，LPS-Pre組表達(dá)水平也明顯高于LPS組和低氧組（P0.05）。 結(jié)論LPS預(yù)處理可增強(qiáng)小鼠肺組織在低氧時(shí)HIF-1α mRNA和蛋白的表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R363

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 周衛(wèi)芳;程羽青;張?zhí)K;袁紅燕;謝可鳴;;LPS誘導(dǎo)的急性炎性肝損傷中HIF-1α的表達(dá)[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年01期

2 王亮;謝平;劉立民;謝可鳴;;脂多糖誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子-1α表達(dá)的信號通路研究[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年01期

本文編號：1173419