本文關(guān)鍵詞：人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體基因慢病毒表達載體的構(gòu)建和鑒定

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【摘要】：目的將人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(hTfR)基因克隆到慢病毒表達載體pLENTI6.3,并鑒定其正確性,為活體干細(xì)胞MR分子成像提供實驗基礎(chǔ)。方法利用聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(PCR)擴增hTfR基因,并克隆到pLENTI6.3載體;經(jīng)過菌落PCR初步篩選、Bam H1酶切鑒定和測序鑒定構(gòu)建的pLENTI6.3-hTfR-IRES-EGFP重組載體。結(jié)果通過PCR技術(shù)成功擴增了hTfR基因;hTfR基因片段重組到pLENTI6.3載體;菌落PCR和酶切鑒定,凝膠電泳結(jié)果均顯示得到和理論大小相符的片段;DNA測序結(jié)果與Genbank序列完全一致。結(jié)論 pLENTI6.3-hTfR-IRES-EGFP慢病毒表達載體構(gòu)建成功,為下一步進行活體干細(xì)胞MR分子成像實驗研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國人民解放軍北京軍區(qū)總醫(yī)院附屬八一腦科醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(編號:81271316)
【分類號】：R445.2;R329
【正文快照】： 干細(xì)胞是臨床再生替代治療極其重要的資源,干細(xì)胞移植治療多種疾病的有效性和潛能日益受到重視,有著廣闊的應(yīng)用前景[1-5]。分子影像學(xué),特別是MR的發(fā)展使在活體狀態(tài)下示蹤移植干細(xì)胞成為現(xiàn)實。MR具有極其精細(xì)的組織分辨率、空間分辨率、無游離輻射和非侵襲性等特點,通過MR報告

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本文編號：1148271