中國動物源性產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌的分離及菌株特征分析
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【摘要】:產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一類重要的食源性病原菌,可引起水樣腹瀉、出血性腸炎(hemorrhagic colitis, HC)、溶血性尿毒綜合征(hemolytic uremic syndrome, HUS)等病死率高的疾病。牛等反芻動物是STEC的主要儲存宿主。目前報(bào)道470多種血清型STEC可引起人類疾病,其中以0157:H7血清型為主。 雖然STECO157:H7分離鑒定方法已經(jīng)成熟,但目前尚無有效的針對所有非O157STEC菌株的分離培養(yǎng)方法。本研究在綜合國外研究的基礎(chǔ)上,建立了套STEC菌株分離鑒定方法。利用該方法,對我國不同宿主包括牦牛、豬、肉牛、旱獺及腹瀉患者中STEC流行情況進(jìn)行了調(diào)查,發(fā)現(xiàn)其非O157STEC菌株分離率分別為11.68%、6.18%、4.00%、2.47%及0.34%,表明非O157STEC在我國多種宿主動物及腹瀉患者中存在。 本研究首次重點(diǎn)對青藏高原特殊地理環(huán)境下,青海玉樹牦牛中STEC的流行情況及菌株特征進(jìn)行了詳盡分析。通過stx雙重實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測,對728份采集于2012年6月-8月的牦牛糞便進(jìn)行了檢測,其中138份標(biāo)本stx基因陽性(陽性率18.96%),從其中的85份標(biāo)本中分離出128株STEC菌株(細(xì)菌分離培養(yǎng)陽性率11.68%)。我們對128株STEC分離株進(jìn)行了血清分型、志賀毒素基因型及其亞型分析、致病相關(guān)毒力基因及黏附相關(guān)基因檢測、PFGE分型分析。128株牦牛STEC分離株分為15種不同的O血清群和36種不同的O:H血清型,主要血清型為O8:H16、O2:H45、O117:H21、O78:H8、O8:H、Ont:H8。128株STEC中,stxl陽性的有53株,均為stxla亞型,95株stx2陽性菌株分為5個(gè)不同的stx2亞型(stx2a、Stx2b、stx2c、stx2d、stx2g)。128株分離株lpfAO157/OI-141、 lpfAO157/OI-154、lpfAO113、katP、toxB基因均為陰性,caeA、iha、efal、saa、paa、 cnf1、cnf2、astA、subA、exhA、espP陽性菌株數(shù)分別為2、87、2、66、13、13、24.44.66.36。PFGE將其中123株分離株分為67種不同的PFGE帶型,菌株呈現(xiàn)出高度多態(tài)性。本研究首次對我國牦牛中STEC流行情況進(jìn)行了調(diào)查,證實(shí)了牦牛也是STEC的重要宿主;通過對菌株特征的分析,闡明了牦牛作為STEC傳染源在引起人類感染等公共衛(wèi)生方面的意義。 為進(jìn)一步了解我國STEC分離株的致病性和進(jìn)化關(guān)系,我們對不同來源的111株STEC分離株進(jìn)行了多位點(diǎn)序列分型分析(MLST)。結(jié)果顯示我國不同來源的STEC分離株均呈高度多態(tài)性,同一宿主來源的菌株具有相對較近的親緣關(guān)系。通過與HUSEC及高致病性和流行血清型(026、O103、O111、O121、O145、 O157) STEC菌株MLST型別進(jìn)行遺傳進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn),我國存在與高致病性和流行株相同或相近ST型別的菌株,結(jié)合菌株血清型和毒力基因特征,表明我國動物宿主攜帶的STEC中存在一定致病潛力的菌株。因此,我國應(yīng)加強(qiáng)對不同動物宿主和食品中STEC菌株的檢測和監(jiān)測,發(fā)展有效的STEC菌株甄別分子標(biāo)識,及時(shí)識別可能的新發(fā)致病株或流行株引起人類感染暴發(fā)的風(fēng)險(xiǎn),提高對突發(fā)疫情的應(yīng)對和處置能力。
【學(xué)位授予單位】:中國疾病預(yù)防控制中心
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R378
【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號:1148198
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