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中國動物源性產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌的分離及菌株特征分析

發(fā)布時(shí)間:2017-11-06 08:43

  本文關(guān)鍵詞:中國動物源性產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌的分離及菌株特征分析


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【摘要】:產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一類重要的食源性病原菌,可引起水樣腹瀉、出血性腸炎(hemorrhagic colitis, HC)、溶血性尿毒綜合征(hemolytic uremic syndrome, HUS)等病死率高的疾病。牛等反芻動物是STEC的主要儲存宿主。目前報(bào)道470多種血清型STEC可引起人類疾病,其中以0157:H7血清型為主。 雖然STECO157:H7分離鑒定方法已經(jīng)成熟,但目前尚無有效的針對所有非O157STEC菌株的分離培養(yǎng)方法。本研究在綜合國外研究的基礎(chǔ)上,建立了套STEC菌株分離鑒定方法。利用該方法,對我國不同宿主包括牦牛、豬、肉牛、旱獺及腹瀉患者中STEC流行情況進(jìn)行了調(diào)查,發(fā)現(xiàn)其非O157STEC菌株分離率分別為11.68%、6.18%、4.00%、2.47%及0.34%,表明非O157STEC在我國多種宿主動物及腹瀉患者中存在。 本研究首次重點(diǎn)對青藏高原特殊地理環(huán)境下,青海玉樹牦牛中STEC的流行情況及菌株特征進(jìn)行了詳盡分析。通過stx雙重實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測,對728份采集于2012年6月-8月的牦牛糞便進(jìn)行了檢測,其中138份標(biāo)本stx基因陽性(陽性率18.96%),從其中的85份標(biāo)本中分離出128株STEC菌株(細(xì)菌分離培養(yǎng)陽性率11.68%)。我們對128株STEC分離株進(jìn)行了血清分型、志賀毒素基因型及其亞型分析、致病相關(guān)毒力基因及黏附相關(guān)基因檢測、PFGE分型分析。128株牦牛STEC分離株分為15種不同的O血清群和36種不同的O:H血清型,主要血清型為O8:H16、O2:H45、O117:H21、O78:H8、O8:H、Ont:H8。128株STEC中,stxl陽性的有53株,均為stxla亞型,95株stx2陽性菌株分為5個(gè)不同的stx2亞型(stx2a、Stx2b、stx2c、stx2d、stx2g)。128株分離株lpfAO157/OI-141、 lpfAO157/OI-154、lpfAO113、katP、toxB基因均為陰性,caeA、iha、efal、saa、paa、 cnf1、cnf2、astA、subA、exhA、espP陽性菌株數(shù)分別為2、87、2、66、13、13、24.44.66.36。PFGE將其中123株分離株分為67種不同的PFGE帶型,菌株呈現(xiàn)出高度多態(tài)性。本研究首次對我國牦牛中STEC流行情況進(jìn)行了調(diào)查,證實(shí)了牦牛也是STEC的重要宿主;通過對菌株特征的分析,闡明了牦牛作為STEC傳染源在引起人類感染等公共衛(wèi)生方面的意義。 為進(jìn)一步了解我國STEC分離株的致病性和進(jìn)化關(guān)系,我們對不同來源的111株STEC分離株進(jìn)行了多位點(diǎn)序列分型分析(MLST)。結(jié)果顯示我國不同來源的STEC分離株均呈高度多態(tài)性,同一宿主來源的菌株具有相對較近的親緣關(guān)系。通過與HUSEC及高致病性和流行血清型(026、O103、O111、O121、O145、 O157) STEC菌株MLST型別進(jìn)行遺傳進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn),我國存在與高致病性和流行株相同或相近ST型別的菌株,結(jié)合菌株血清型和毒力基因特征,表明我國動物宿主攜帶的STEC中存在一定致病潛力的菌株。因此,我國應(yīng)加強(qiáng)對不同動物宿主和食品中STEC菌株的檢測和監(jiān)測,發(fā)展有效的STEC菌株甄別分子標(biāo)識,及時(shí)識別可能的新發(fā)致病株或流行株引起人類感染暴發(fā)的風(fēng)險(xiǎn),提高對突發(fā)疫情的應(yīng)對和處置能力。
【學(xué)位授予單位】:中國疾病預(yù)防控制中心
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R378

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 崔希;熊齊榮;熊勇華;山珊;賴衛(wèi)華;;免疫磁分離結(jié)合膠體金免疫層析法快速檢測大腸桿菌O157∶H7[J];分析化學(xué);2013年12期

2 謝紅意;周方滿;韓東升;葉鴻雁;馬玲敏;陳曉;李愛芳;陳瑜;;寧波地區(qū)急性腹瀉患者副溶血弧菌表型及分子特征研究[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2013年10期

3 孫暉;劉學(xué)通;趙愛蘭;金東;熊衍文;盧珊;;腸集聚性大腸埃希菌分離株脈沖場凝膠電泳分析[J];疾病監(jiān)測;2013年10期

4 陳愛亮;;食源性病原微生物快速檢測技術(shù)應(yīng)用現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢[J];食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào);2014年01期

5 韓燃;房華麗;郭峰;廖鵬運(yùn);李銳;李文平;;EHEC的新型粘附因子研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年02期

6 李嘉文;鄭冬冬;王宏勛;劉志國;余曉麗;周幗萍;李睿;;腸出血性大腸桿菌O157∶H7變種Q蛋白對志賀毒素表達(dá)的影響[J];食品科學(xué);2014年15期

7 趙顯晨;羅永彬;黃芬;井申榮;曾韋錕;楊祖順;;紅嘴鷗中腸致病性大腸埃希菌快速檢測及其系統(tǒng)進(jìn)化分析[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2014年01期

8 孫暉;白向?qū)?趙愛蘭;孟瓊;熊衍文;盧珊;;牦牛攜帶的產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌分離株的多位點(diǎn)序列分型研究[J];中國人獸共患病學(xué)報(bào);2013年12期

9 白莉;王偉;胡豫杰;吳青;赫英英;徐進(jìn);韓春卉;李鳳琴;;免疫磁珠富集聯(lián)合熒光定量PCR快速檢測牛肉餡中產(chǎn)志賀毒素大腸埃希菌O26∶H11[J];中國食品衛(wèi)生雜志;2014年01期

10 盧勉飛;蔡芷荷;陳霖熙;邱國建;吳清平;楊寧;;大腸桿菌O157顯色培養(yǎng)基檢測效果的評價(jià)[J];微生物學(xué)通報(bào);2014年07期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 申進(jìn)玲;非O157產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌和單增李斯特菌的分子分型及毒力分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

2 孟瓊;中國產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌(STEC)O157:H7的單核苷酸多態(tài)性(SNP)分型研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2014年

3 許彥梅;腸出血性大腸桿菌O157:H7 EDL933基因組島OI-172的功能研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2013年

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本文編號:1148198

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