發(fā)布時間：2017-11-05 05:05

  本文關(guān)鍵詞：人PD-L1基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的構(gòu)建及其對活化的Jurkat細(xì)胞增殖和凋亡的影響

  更多相關(guān)文章： PD-L 基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株 Jurkat細(xì)胞

【摘要】：目的:構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)人PD-L1分子的基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株,觀察其對活化的Jurkat細(xì)胞增殖和凋亡的影響。方法:將編碼人PD-L1分子的全長c DNA重組入反轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體p EGZ-Term-R,將重組載體p EGZ-Term-R/PD-L1和輔助病毒載體用脂質(zhì)體法共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,包裝具有感染能力的完整病毒;收集含有完整重組反轉(zhuǎn)錄病毒的293T細(xì)胞培養(yǎng)上清,感染L929細(xì)胞,篩選并獲得G418抗性的基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測表達(dá)PDL1的基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞,命名為L929/PD-L1。采用PHA活化T細(xì)胞系來源的細(xì)胞株Jurkat,并將其與絲裂霉素預(yù)處理的L929/PD-L1細(xì)胞共培養(yǎng),用細(xì)胞計數(shù)法觀察L929/PD-L1細(xì)胞株對活化的Jurkat細(xì)胞增殖能力的影響,并檢測其凋亡情況。結(jié)果:成功獲得了穩(wěn)定表達(dá)人PD-L1基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞株L929/PD-L1。PHA可誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞活化并表達(dá)PD-1分子;L929/PD-L1與PHA刺激后的Jurkat細(xì)胞共培養(yǎng),可抑制Jurkat細(xì)胞增殖,促進(jìn)其凋亡。結(jié)論:成功構(gòu)建了穩(wěn)定表達(dá)人PD-L1的細(xì)胞株,PD-L1分子抑制活化的Jurkat細(xì)胞增殖,促進(jìn)其凋亡。
【作者單位】： 蘇州大學(xué)基礎(chǔ)與生物科學(xué)學(xué)院免疫學(xué)系;南京醫(yī)科大學(xué)附屬蘇州醫(yī)院消化系疾病與營養(yǎng)研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(31370887,81373149,31200661) 江蘇省自然科學(xué)基金資助項目(BK2012621) 蘇州市科技發(fā)展計劃項目(SYS201363)
【分類號】：R392
【正文快照】： 蘇蘇州215008)PD-L1分子是共刺激分子B7家族成員,人PD-L1基因位于9號染色體,編碼由290個氨基酸組成的Ⅰ型跨膜蛋白。PD-L1分子廣泛表達(dá)于激化T細(xì)胞、B細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、肝細(xì)胞和胰島細(xì)胞等,也表達(dá)于諸多腫瘤細(xì)胞,如肺癌、肝癌、乳腺癌、鱗狀細(xì)胞癌及

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Xinguo JIANG;;乳腺癌的免疫調(diào)節(jié)治療(英文)[J];Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology);2014年01期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 韓麗娟;PD-Ls及其受體PD-1在結(jié)外NK/T細(xì)胞淋巴瘤中的表達(dá)及免疫調(diào)節(jié)功能[D];鄭州大學(xué);2014年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫杰;劉玉華;陳永井;郭靜雅;陳昌友;胡玲玲;陳明心;杜陽陽;徐耀瑜;邱玉華;;人CXCR3基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的構(gòu)建、鑒定及初步功能研究[J];中國免疫學(xué)雜志;2010年05期

2 郭靜雅;陳昌友;王志強(qiáng);張彥軍;黃賽男;朱華亭;邱玉華;;人CXCR3B基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的構(gòu)建、鑒定及生物學(xué)功能研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年12期

3 孫杰;劉玉華;陳永井;郭靜雅;陳昌友;胡玲玲;陳明心;邱玉華;;小鼠CXCR3基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的構(gòu)建、鑒定及生物學(xué)功能研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年07期

4 陳禮文;高超;沈雙;仲維學(xué);朱一蓓;張學(xué)光;;人CD83基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的構(gòu)建及其功能初步研究[J];免疫學(xué)雜志;2011年06期

5 袁樺;葛彥;楊鵬;蔣林華;殷麗麗;張弛;孫雪薇;居頌文;居頌光;;人CD244基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的構(gòu)建[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年04期

6 田辛辛;葛彥;袁樺;蔡文治;楊鵬;蔣林華;殷麗麗;張弛;孫雪薇;居頌文;居頌光;;人CD48基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的構(gòu)建[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年04期

7 黃子逸;王雪峰;齊Z，

本文編號：1142704