本文關(guān)鍵詞：低氧引起PC12細(xì)胞保護(hù)性自噬的激活

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【摘要】：目的初步探討低氧對(duì)PC12細(xì)胞自噬功能的影響。方法應(yīng)用低氧培養(yǎng)箱給予實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞1%氧濃度的低氧處理,對(duì)照組置于正常含氧的培養(yǎng)箱中。首先,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞分別低氧處理6、12、24 h,用Western blotting檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3和Beclin1的表達(dá),用RT-PCR檢測(cè)LC3 m RNA的變化,用透射電子顯微鏡(透射電鏡)檢測(cè)自噬小體的變化;其次,給予自噬抑制劑3-MA后,用MTT檢測(cè)細(xì)胞活力,用caspase3活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)caspase-3的活性,用Western blotting方法檢測(cè)cleaved caspase-3的表達(dá)。結(jié)果 1隨著低氧時(shí)間延長,PC12細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3及Beclin1表達(dá)增高,12~24 h最高,隨后下降,LC3 m RNA水平也出現(xiàn)相應(yīng)增高趨勢(shì)。2給予自噬抑制劑3-MA能進(jìn)一步降低低氧處理后細(xì)胞活力,而caspase-3的活性增強(qiáng),其活性形式表達(dá)增高。結(jié)論自噬在PC12細(xì)胞發(fā)生低氧被激活,并且可能通過抑制凋亡發(fā)揮保護(hù)作用。
【作者單位】： 上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院麻醉科;
【基金】：國家教育部博士點(diǎn)基金(20120073110087)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 低氧存在于多種生理病理?xiàng)l件下,如生理?xiàng)l件下處于低氧的腦、腎組織或病理?xiàng)l件下低氧造成的腦卒中、心肌梗死等。低氧可同時(shí)激活多種信號(hào)通路,這些通路共同作用決定細(xì)胞的存活[1,2]。自噬是進(jìn)化保守及精確調(diào)節(jié)的自我穩(wěn)態(tài)維持系統(tǒng),胞質(zhì)內(nèi)的大分子以及受損細(xì)胞器可以借此通過溶酶

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