本文關(guān)鍵詞：白藜蘆醇誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)元樣細(xì)胞分化及其機(jī)制研究

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【摘要】：目的:研究白藜蘆醇體外誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞(Marrowstroma cells，MSCS)的神經(jīng)元樣細(xì)胞分化及其可能的機(jī)制。 方法：采用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)MSCS；用含白藜蘆醇的無血清DMEM/F12誘導(dǎo)MSCS分化。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，掃描電鏡檢測細(xì)胞表面的初級纖毛，免疫熒光法、免疫印跡法檢測nestin、NSE、MAP-2、GFAP、Ac-Tu、Ptc1、Smo和Gli1的表達(dá)。 結(jié)果：1.白藜蘆醇誘導(dǎo)后細(xì)胞胞體收縮，伸出長突起，類似神經(jīng)元。免疫熒光顯示MSCs及對照組細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)元NSE蛋白，誘導(dǎo)后細(xì)胞NSE、MAP-2蛋白陽性，但誘導(dǎo)前后細(xì)胞始終未表達(dá)膠質(zhì)細(xì)胞GFAP蛋白。免疫印跡顯示MSCs及對照組細(xì)胞輕度表達(dá)nestin、NSE蛋白，隨著誘導(dǎo)時間延長，nestin的表達(dá)漸減弱，NSE和MAP-2的表達(dá)漸增強(qiáng)，但誘導(dǎo)前后細(xì)胞始終未表達(dá)膠質(zhì)細(xì)胞GFAP蛋白。 2.正常培養(yǎng)的MSCs不表達(dá)初級纖毛。經(jīng)過預(yù)誘導(dǎo)或饑餓處理24h后，MSCs表達(dá)初級纖毛、蛋白Ptc1、Smo和Gli1，其中Smo和Gli1位于胞漿，Ptc1位于初級纖毛。白藜蘆醇誘導(dǎo)后，Smo從細(xì)胞漿進(jìn)入初級纖毛，Gli1從細(xì)胞漿進(jìn)入細(xì)胞核，同時，Smo、Gli1蛋白的表達(dá)增加。在正常培養(yǎng)時，，白藜蘆醇不能促使Smo移位以及MSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化。當(dāng)MSCs表達(dá)初級纖毛時，白藜蘆醇以及Smo激動劑SAG可使Smo從胞漿進(jìn)入初級纖毛，同時伴隨MSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞的分化和蛋白Smo、Gli1的表達(dá)增強(qiáng)；加入抑制劑環(huán)杷明后，Smo仍主要表達(dá)于胞漿，蛋白Smo、Gli1的表達(dá)降低，MSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞的分化受抑制。 結(jié)論：1.白藜蘆醇在體外可誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞。 2. MSCs表達(dá)初級纖毛并存在Shh信號，初級纖毛介導(dǎo)Shh信號調(diào)控MSCs的神經(jīng)元樣細(xì)胞分化。
【關(guān)鍵詞】：白藜蘆醇 骨髓基質(zhì)細(xì)胞 神經(jīng)元樣細(xì)胞 Shh信號 初級纖毛
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 符號說明5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 第一部分 白藜蘆醇體外誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞的分化13-24
• 1 材料和方法13-19
• 2 結(jié)果19-22
• 3 討論22-24
• 第二部分 初級纖毛介導(dǎo)的 SHH 信號對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的影響24-32
• 1 材料和方法24-27
• 2 結(jié)果27-29
• 3 討論29-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 附圖36-39
• 文獻(xiàn)綜述39-49
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 致謝49-50
• 學(xué)習(xí)期間發(fā)表的論文50-51

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 任俊偉;楊琴;范層層;陳娜;;白藜蘆醇減輕腦缺血再灌注損傷及其機(jī)制[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2010年24期

2 楊琴;謝鵬;曾志磊;李傲;楊軍;李詠梅;;刺五加注射液體外誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的機(jī)制研究[J];中國中藥雜志;2008年15期

本文編號：1129026