白藜蘆醇誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細胞的神經(jīng)元樣細胞分化及其機制研究
發(fā)布時間:2017-11-01 23:28
本文關(guān)鍵詞:白藜蘆醇誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細胞的神經(jīng)元樣細胞分化及其機制研究
更多相關(guān)文章: 白藜蘆醇 骨髓基質(zhì)細胞 神經(jīng)元樣細胞 Shh信號 初級纖毛
【摘要】:目的:研究白藜蘆醇體外誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細胞(Marrowstroma cells,MSCS)的神經(jīng)元樣細胞分化及其可能的機制。 方法:采用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)MSCS;用含白藜蘆醇的無血清DMEM/F12誘導(dǎo)MSCS分化。倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),掃描電鏡檢測細胞表面的初級纖毛,免疫熒光法、免疫印跡法檢測nestin、NSE、MAP-2、GFAP、Ac-Tu、Ptc1、Smo和Gli1的表達。 結(jié)果:1.白藜蘆醇誘導(dǎo)后細胞胞體收縮,伸出長突起,類似神經(jīng)元。免疫熒光顯示MSCs及對照組細胞表達神經(jīng)元NSE蛋白,誘導(dǎo)后細胞NSE、MAP-2蛋白陽性,但誘導(dǎo)前后細胞始終未表達膠質(zhì)細胞GFAP蛋白。免疫印跡顯示MSCs及對照組細胞輕度表達nestin、NSE蛋白,隨著誘導(dǎo)時間延長,nestin的表達漸減弱,NSE和MAP-2的表達漸增強,但誘導(dǎo)前后細胞始終未表達膠質(zhì)細胞GFAP蛋白。 2.正常培養(yǎng)的MSCs不表達初級纖毛。經(jīng)過預(yù)誘導(dǎo)或饑餓處理24h后,MSCs表達初級纖毛、蛋白Ptc1、Smo和Gli1,其中Smo和Gli1位于胞漿,Ptc1位于初級纖毛。白藜蘆醇誘導(dǎo)后,Smo從細胞漿進入初級纖毛,Gli1從細胞漿進入細胞核,同時,Smo、Gli1蛋白的表達增加。在正常培養(yǎng)時,,白藜蘆醇不能促使Smo移位以及MSCs向神經(jīng)元樣細胞分化。當MSCs表達初級纖毛時,白藜蘆醇以及Smo激動劑SAG可使Smo從胞漿進入初級纖毛,同時伴隨MSCs向神經(jīng)元樣細胞的分化和蛋白Smo、Gli1的表達增強;加入抑制劑環(huán)杷明后,Smo仍主要表達于胞漿,蛋白Smo、Gli1的表達降低,MSCs向神經(jīng)元樣細胞的分化受抑制。 結(jié)論:1.白藜蘆醇在體外可誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細胞分化為神經(jīng)元樣細胞。 2. MSCs表達初級纖毛并存在Shh信號,初級纖毛介導(dǎo)Shh信號調(diào)控MSCs的神經(jīng)元樣細胞分化。
【關(guān)鍵詞】:白藜蘆醇 骨髓基質(zhì)細胞 神經(jīng)元樣細胞 Shh信號 初級纖毛
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R329.2
【目錄】:
- 符號說明5-6
- 摘要6-8
- ABSTRACT8-11
- 前言11-13
- 第一部分 白藜蘆醇體外誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細胞向神經(jīng)元樣細胞的分化13-24
- 1 材料和方法13-19
- 2 結(jié)果19-22
- 3 討論22-24
- 第二部分 初級纖毛介導(dǎo)的 SHH 信號對大鼠骨髓基質(zhì)細胞神經(jīng)元樣細胞分化的影響24-32
- 1 材料和方法24-27
- 2 結(jié)果27-29
- 3 討論29-32
- 結(jié)論32-33
- 參考文獻33-36
- 附圖36-39
- 文獻綜述39-49
- 參考文獻45-49
- 致謝49-50
- 學(xué)習(xí)期間發(fā)表的論文50-51
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 任俊偉;楊琴;范層層;陳娜;;白藜蘆醇減輕腦缺血再灌注損傷及其機制[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2010年24期
2 楊琴;謝鵬;曾志磊;李傲;楊軍;李詠梅;;刺五加注射液體外誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細胞分化為神經(jīng)元樣細胞的機制研究[J];中國中藥雜志;2008年15期
本文編號:1129026
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