本文關(guān)鍵詞：大鼠腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的體外優(yōu)化培養(yǎng)及鑒定

  更多相關(guān)文章： 星形膠質(zhì)細(xì)胞 大腦皮質(zhì) 細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠

【摘要】：目的旨在獲得高純度的星形膠質(zhì)細(xì)胞,并對不同培養(yǎng)時期的細(xì)胞進(jìn)行鑒定,為進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。方法常規(guī)分離新生SD大鼠大腦皮質(zhì)并制備單細(xì)胞懸液,采用差速黏附加搖床震蕩法對所獲得的細(xì)胞進(jìn)行純化。倒置相差顯微鏡及HE染色觀察細(xì)胞形態(tài),GFAP免疫熒光對獲得細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果原代培養(yǎng)的皮質(zhì)細(xì)胞從3d開始迅速增殖,9~12d即可鋪滿瓶底,此時細(xì)胞呈明顯的分層生長,星形膠質(zhì)細(xì)胞位于底層,形態(tài)多樣,陽性率為(67.2±7.1)%;經(jīng)過1次傳代后,GFAP陽性率有所提升(84.0±6.0)%,但不能完全去除小膠質(zhì)細(xì)胞及少突膠質(zhì)細(xì)胞,細(xì)胞仍呈分層生長;至第3次傳代后,獲得大量幾乎為單一種類的星形膠質(zhì)細(xì)胞,其胞體較大、突起較短粗,一般2~3個,胞核圓形或橢圓形,常偏于一側(cè),GFAP染色呈強(qiáng)陽性,陽性率可達(dá)(97.6±2.4)%。結(jié)論通過差速黏附與搖床震蕩相結(jié)合的方法,獲得了高純度且生長狀態(tài)良好的星形膠質(zhì)細(xì)胞。
【作者單位】： 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部人體解剖與組織胚胎學(xué)系;西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部神經(jīng)生物學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 星形膠質(zhì)細(xì)胞 大腦皮質(zhì) 細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠
【基金】：陜西省自然科學(xué)基金資助項目(No.2012JQ4011,2014JM4096) 中央高校基本科研業(yè)務(wù)費專項資金資助項目(No.xjj2012011)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 星形膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)組織內(nèi)數(shù)量最多、分布最廣的膠質(zhì)細(xì)胞,在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、突觸傳遞、神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等多種正常生理活動以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理機(jī)制中都起著十分重要的作用[1]。目前,用于實驗研究的星形膠質(zhì)細(xì)胞在很大程度上來源于嚙齒類動物腦組織的原代培養(yǎng),其中最常

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 臧衛(wèi)東;張雁儒;李鳴;謝繼輝;郭彰生;張華;高曉群;;大鼠閉合性腦損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)及GAP-43、ET-1 mRNA表達(dá)的變化[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2006年02期

2 馬紅霞;周運恒;范列英;安玉會;;酸性肽對體外培養(yǎng)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖的影響[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年03期

3 周欣;明曉云;康頌建;白波;段耀奎;;差速貼壁技術(shù)對大鼠腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞純化率的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年15期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 霍妍;袁容娣;葉劍;尹小磊;鄒歡;;新生大鼠視神經(jīng)損傷后視覺系統(tǒng)中GAP-43的表達(dá)[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年02期

2 王秀文;張立霞;楊成;潘晶晶;王紅;;電針對體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞機(jī)械性損傷后反應(yīng)性膠質(zhì)化的影響[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2010年04期

3 陳鵬慧;蔡文琴;王麗雁;;大鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞的生后發(fā)育特點及圍生期電生理特性的研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2008年19期

4 李燁;張家驊;吳建云;;大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)和鑒定[J];動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2010年04期

5 范悅;商亞珍;;大鼠大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)方法的建立及鑒定[J];承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2013年02期

6 韓星;石磊;嚴(yán)華成;曾曉暉;張營;關(guān)慧;趙樹進(jìn);;全反式維甲酸對淀粉樣蛋白42誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的抑制作用及其機(jī)制[J];廣東醫(yī)學(xué);2014年17期

7 Tian-Zi WANG;Ai SUN;Na WANG;Zhong-Kai CUI;Song-Lin CHEN;Zhen-Xia SHA;;Establishment and characterization of an astroglial cell line derived from the brain of half-smooth tongue sole(Cynoglossus semilaevis)[J];動物學(xué)研究;2015年05期

8 郭大志;劉懌君;潘樹義;何成;段樹民;;光刺激體外培養(yǎng)的NG2細(xì)胞對海馬神經(jīng)元內(nèi)Ca~(2+)活性和電活動的影響[J];轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)雜志;2015年04期

9 ;Inhibitory effects of HS014 on glutamate release in astrocytes chronically treated with morphine[J];Neural Regeneration Research;2010年19期

10 闕海萍;趙沉浮;劉勇;劉少君;;一種分離培養(yǎng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞的改進(jìn)方法[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2013年04期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 韓冬;RNAi抑制Cx43基因表達(dá)對星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧/再復(fù)氧后凋亡的影響[D];吉林大學(xué);2009年

2 向欣;Plexin A3介導(dǎo)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞遷移的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 譚軍;星形膠質(zhì)細(xì)胞條件培養(yǎng)液對缺氧/復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用及其機(jī)制探討[D];鄭州大學(xué);2013年

4 熊曼;亞低溫治療新生兒缺氧缺血性腦損傷的機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

5 薛晨晨;14-3-3ε蛋白在脊髓損傷星形膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)研究[D];華中科技大學(xué);2014年

6 謝紅燕;糖氧剝奪/復(fù)氧復(fù)糖下大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞Cx43的變化及其機(jī)制[D];吉林大學(xué);2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蘇國軍;人腦星形細(xì)胞瘤細(xì)胞體外化療藥物敏感性實驗研究[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2010年

2 林娜;櫛孔扇貝（Chlamys farreri）精巢細(xì)胞體外培養(yǎng)的初步研究[D];中國海洋大學(xué);2011年

3 王偉;星形膠質(zhì)細(xì)胞在幼鼠腦外傷血管新生中作用機(jī)制的初步體外研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

4 陳慶才;丙戊茶堿體外對星形膠質(zhì)細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響[D];蘇州大學(xué);2008年

5 劉春英;aFGF對慶大霉素所致的海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷保護(hù)作用的體外實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年

6 滕騰;星形膠質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)與神經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化生物學(xué)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

7 龐磊;高糖對高鉀刺激引起大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞外液谷氨酸含量的影響[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2012年

8 張成;雄激素調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細(xì)胞免疫的機(jī)制研究[D];西南大學(xué);2012年

9 何潔華;大腦皮層Ast培養(yǎng)及CNTF對Ast的激活作用[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2014年

10 祁曉君;丙戊酸鈉在大鼠視神經(jīng)損傷再生中的作用研究及對BDNF、GAP-43表達(dá)的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 梁衛(wèi)蘭，單巍松，吳希如;大鼠（小鼠）大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)方法[J];北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1994年04期

2 溫進(jìn)坤，張晨暉，姚阿卿，魏素珍，周愛儒，湯健;內(nèi)皮素基因的克隆與表達(dá)調(diào)控研究[J];北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1994年S1期

3 吳玉梅,許漢鵬,王春婷,李靜雯,鞠躬;芍藥甙對體外培養(yǎng)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞活性的作用[J];解剖學(xué)報;2002年04期

4 莫永炎,姜勇,陳瑗;腦星形膠質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)功能研究進(jìn)展[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2002年01期

5 王凱;;星形膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)功能修復(fù)[J];中國臨床康復(fù);2006年41期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姚君茹,潘三強(qiáng),呂來清;星形膠質(zhì)細(xì)胞的可塑性[J];解剖學(xué)研究;2002年01期

2 陳yN招,徐如祥,徐宗俊,楊志林,姜曉丹;星形膠質(zhì)細(xì)胞可以誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞系緊密連接的形成[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2003年05期

3 陳青;劉傳勇;;星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化機(jī)制及功能研究[J];泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2006年01期

4 郭進(jìn);何建平;安書成;;星形膠質(zhì)細(xì)胞釋放谷氨酸的途徑及其調(diào)控機(jī)制[J];陜西師范大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)報;2006年03期

5 陳玉敏;陳濤平;;星形膠質(zhì)細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2008年28期

6 李麗華;張余;黃金龍;李梅;夏虹;侯麗;;脫細(xì)胞異種骨對星形膠質(zhì)細(xì)胞的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2014年10期

7 楊志軍,魏玲;星形膠質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)功能研究進(jìn)展[J];中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志;2003年05期

8 徐偉;徐鈐;;星形膠質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)功能[J];生命的化學(xué);2010年01期

9 胡沙;;星形膠質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)功能研究進(jìn)展[J];淮南職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報;2010年01期

10 ;研究人員發(fā)現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞可調(diào)節(jié)呼吸強(qiáng)度[J];中國科技信息;2010年17期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曾俊;李康生;;柯薩奇病毒感染星形膠質(zhì)細(xì)胞及細(xì)胞因子變化研究[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點研討會論文集[C];2010年

2 鮑歡;徐曉云;顧曉波;徐霞紅;胡暉;;缺氧后水通道蛋白4在體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)變化的實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

3 曹榮;饒志仁;;低滲刺激后縫隙連接蛋白在培養(yǎng)的大鼠下丘腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元的表達(dá)變化[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第六屆學(xué)術(shù)會議暨學(xué)會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

4 鄧方;馮加純;饒明俐;;大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧/再復(fù)氧損傷中縫隙連接功能變化規(guī)律及機(jī)制[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

5 武明明;孫曉川;殷成;周帥;吳海濤;;載脂蛋白E基因多態(tài)性與星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷后興奮性氨基酸變化的實驗研究[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第六屆全國代表大會論文匯編[C];2011年

6 周曉燕;鄔力祥;劉發(fā)益;曹莉;;大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)方法[A];湖南省生理科學(xué)會新世紀(jì)學(xué)術(shù)年會論文摘要匯編[C];2002年

7 王磊;蔡景霞;;星形膠質(zhì)細(xì)胞膜流動性的鈣調(diào)節(jié)機(jī)制[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第六屆學(xué)術(shù)會議暨學(xué)會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

8 王萍;王偉;;大鼠腦缺血再灌注后星形膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞周期變化研究[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第六屆學(xué)術(shù)會議暨學(xué)會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

9 鄧方;馮加純;饒明俐;;大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧/再復(fù)氧損傷中縫隙連接功能變化的規(guī)律及機(jī)制[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

10 孫圣剛;周敬華;;凝血酶對大鼠原代星形膠質(zhì)細(xì)胞水孔蛋白-4表達(dá)的影響[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 記者 胡德榮;星形膠質(zhì)細(xì)胞由“天使”變“魔鬼”原因找到[N];健康報;2012年

2 記者 劉海英;星形膠質(zhì)細(xì)胞可調(diào)節(jié)呼吸強(qiáng)度[N];科技日報;2010年

3 劉霞;腦內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞在實驗室培育成功[N];科技日報;2011年

4 汪敏華;大腦星形膠質(zhì)細(xì)胞有兩種新功能[N];解放日報;2003年

5 吳一福;黃芪可調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細(xì)胞“時間模式”[N];中國醫(yī)藥報;2005年

6 南方日報記者 曹斯　實習(xí)生 趙莞 張寧 通訊員 鄒瑩 張淼;用ATP對抗不快樂[N];南方日報;2013年

7 記者 班瑋;德國腦細(xì)胞再生研究取得新進(jìn)展[N];人民日報;2010年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高蓓;視上核星形膠質(zhì)細(xì)胞對急性腹腔高滲刺激引起的神經(jīng)元反應(yīng)的調(diào)節(jié)及其機(jī)制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

2 李學(xué)忠;星形膠質(zhì)細(xì)胞在脂多糖誘導(dǎo)的多巴胺神經(jīng)元損傷中的作用[D];蘇州大學(xué);2008年

3 曹旭;1，5-二咖啡�？鼘幩犷A(yù)處理對星形膠質(zhì)細(xì)胞腦缺血模型的保護(hù)作用及機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2010年

4 黃曉佳;5-脂氧酶和半胱氨酰白三烯受體在大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧缺糖損傷中的作用[D];浙江大學(xué);2007年

5 王萍;星形膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2006年

6 柳秀平;蛋白磷酸酯酶-2A對星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移的促進(jìn)作用及其機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2012年

7 徐光錦;大鼠海馬腦片星形膠質(zhì)細(xì)胞線性膜電導(dǎo)及細(xì)胞間電偶聯(lián)特性的研究[D];華中科技大學(xué);2009年

8 李昕華;缺血預(yù)處理星形膠質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2008年

9 張皓云;星形膠質(zhì)細(xì)胞在帕金森病神經(jīng)元鐵代謝紊亂中的調(diào)節(jié)作用研究[D];青島大學(xué);2013年

10 張娟;皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞因子不對稱分布的研究[D];汕頭大學(xué);2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曾俊;柯薩奇病毒感染星形膠質(zhì)細(xì)胞及細(xì)胞因子變化研究[D];汕頭大學(xué);2010年

2 胡佳;星形膠質(zhì)細(xì)胞參與脂多糖致大鼠感染性腦水腫的作用機(jī)制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

3 韋穎;黨參成分對星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧缺糖/再給氧損傷的保護(hù)作用[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2005年

4 楊曉霞;星形膠質(zhì)細(xì)胞微絲表達(dá)與細(xì)胞縫隙連接的關(guān)系及其在癲癇發(fā)病中的意義[D];四川大學(xué);2005年

5 李會莉;老齡大鼠脊髓背角神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞在病理性痛信息加工處理中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

6 彭會明;抗CD81抗體對星形膠質(zhì)細(xì)胞的增殖抑制作用[D];華中科技大學(xué);2006年

7 秦愛萍;自噬/溶酶體途徑在缺血缺氧性星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷中的激活及在其細(xì)胞死亡中的作用[D];蘇州大學(xué);2008年

8 周欣;缺氧誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞源性血管內(nèi)皮生長因子對共培養(yǎng)的腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的影響[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2007年

9 孫縵利;星形膠質(zhì)細(xì)胞在桶狀皮層功能及可塑性中的作用[D];浙江大學(xué);2011年

10 袁彬;轉(zhuǎn)化生長因子-β1對大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)締組織生長因子表達(dá)的影響[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2007年

，

本文編號：1128475