本文關(guān)鍵詞：人脂肪來(lái)源干細(xì)胞成軟骨分化過(guò)程中成軟骨相關(guān)微小RNA表達(dá)的初步研究

  更多相關(guān)文章： 微小RNA 人脂肪來(lái)源干細(xì)胞 成軟骨分化 基因芯片 靶基因

【摘要】：目的探討微小RNA(micro RNA,mi RNA)在人脂肪來(lái)源干細(xì)胞(human adipose-derived stem cells,h ADSCs)誘導(dǎo)成軟骨分化過(guò)程中的表達(dá)規(guī)律及其影響軟骨分化的可能機(jī)制。方法取行抽脂術(shù)或其他腹部手術(shù)患者自愿捐贈(zèng)的脂肪組織,分離、培養(yǎng)h ADSCs并鑒定。取第3代細(xì)胞成軟骨分化,倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),于誘導(dǎo)21 d行阿爾新藍(lán)染色觀察軟骨形成情況,誘導(dǎo)0、7、14、21 d行ELISA檢測(cè)成軟骨相關(guān)蛋白Ⅱ型膠原蛋白(collagen typeⅡ,Col2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)、Col10a1以及硫酸軟骨素表達(dá)。采用基因芯片技術(shù)篩選h ADSCs成軟骨誘導(dǎo)前及誘導(dǎo)后21 d差異性表達(dá)mi RNA,并預(yù)測(cè)篩選出的mi RNA靶基因。結(jié)果實(shí)驗(yàn)成功培養(yǎng)h ADSCs,經(jīng)成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)后,隨時(shí)間延長(zhǎng)可形成軟骨球;21 d阿爾新藍(lán)染色呈陽(yáng)性;h ADSCs成軟骨誘導(dǎo)后7、14、21 d,Col2a1、Aggrecan、Col10a1及硫酸軟骨素表達(dá)水平均較成軟骨誘導(dǎo)前h ADSCs顯著增高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)�；蛐酒夹g(shù)共篩選出11個(gè)差異性表達(dá)mi RNA,其中7個(gè)mi RNA表達(dá)上調(diào),4個(gè)mi RNA表達(dá)下調(diào)。篩選出的成軟骨相關(guān)mi RNAs預(yù)測(cè)靶基因可能參與了干細(xì)胞成軟骨分化、增殖、凋亡、細(xì)胞周期調(diào)控,以及介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)級(jí)聯(lián)反應(yīng)和自我更新等。結(jié)論實(shí)驗(yàn)篩選出11個(gè)成軟骨分化差異性表達(dá)超過(guò)2倍的mi RNAs,并對(duì)其靶基因進(jìn)行預(yù)測(cè),加深了對(duì)h ADSCs成軟骨分化機(jī)制的理解,為定向控制h ADSCs成軟骨分化及篩選組織工程改良種子細(xì)胞提供了理論依據(jù)。
【作者單位】： 中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院關(guān)節(jié)外科;
【關(guān)鍵詞】： 微小RNA 人脂肪來(lái)源干細(xì)胞 成軟骨分化 基因芯片 靶基因
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81171709;81301558;81371941;81201388) 教育部高等學(xué)校博士點(diǎn)基金新教師類資助項(xiàng)目(20130171120074) 廣東省自然科學(xué)基金博士啟動(dòng)項(xiàng)目(S2013040016269)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： Department of Joint Surgery,First Ai liated Hospital of Sun Yat-sen University,Guangzhou Guangdong,510080,P.R.China.軟骨組織工程研究中,種子細(xì)胞的選擇是關(guān)鍵。自體軟骨細(xì)胞具有供區(qū)有限、體外培養(yǎng)傳代去分化,以及隨年齡增長(zhǎng)細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量下降等缺陷。而脂肪組織具

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 陸斌;李建武;楊艷;郭義;;膝骨關(guān)節(jié)炎患者血漿中IL-17、IL-22的表達(dá)水平及其臨床意義[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年03期

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4 郭艷萍;陶常波;張愛(ài)君;李雪陽(yáng);沈才齊;李政道;金培生;;成人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的定向成骨誘導(dǎo)[J];中國(guó)組織工程研究;2014年19期

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

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【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王浩;陳森;馬雨洪;姚惟琦;;微小RNA-23a調(diào)控大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[J];武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年04期

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4 蘇雪蓮;包廣潔;康宏;劉琳;孔楠楠;;山羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向纖維軟骨分化的形態(tài)學(xué)改變[J];中國(guó)組織工程研究;2014年06期

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8 芮云峰;郭永剛;林禹丞;馬良_g;成心錕;陳輝;王宸;;BMP-2誘導(dǎo)人跟腱來(lái)源肌腱干細(xì)胞成軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)修復(fù)重建外科雜志;2013年12期

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10 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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3 房維;肖殷;龍星;;軟骨缺損模型體內(nèi)軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[A];第九次全國(guó)顳下頜關(guān)節(jié)病學(xué)及(牙合)學(xué)研討會(huì)論文匯編[C];2012年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 翟志臣;Ⅰ型膠原形態(tài)對(duì)細(xì)胞軟骨分化的影響及其機(jī)理研究[D];華南理工大學(xué);2014年

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6 王大偉;1、GEP蛋白在骨骼肌分化過(guò)程中的功能研究 2、ADAMTS-12抑制軟骨分化的功能研究[D];山東大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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3 甘鳳英;生長(zhǎng)因子聯(lián)合誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2006年

4 歐陽(yáng)柳;縫隙連接在人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨分化過(guò)程中的作用[D];華中科技大學(xué);2010年

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本文編號(hào)：1126002