本文關(guān)鍵詞：青霉素結(jié)合蛋白2a單克隆抗體的研制和初步應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 青霉素結(jié)合蛋白a 單克隆抗體 膠體金免疫層析法

【摘要】：目的研制青霉素結(jié)合蛋白2a(PBP2a)單克隆抗體(Mc Ab),為建立耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)免疫層析檢測方法提供檢測用抗體。方法以基因工程抗原r PBP2a免疫BALb/c小鼠,通過常規(guī)小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體,采用免疫印跡技術(shù)(Western blotting)分析單克隆抗體特異性。選取敏感、特異的單克隆抗體進(jìn)行金標(biāo)記和硝酸纖維膜包被,建立膠體金免疫層析檢測方法。結(jié)果共獲得11株分泌抗r PBP2a的雜交瘤細(xì)胞,其中6株分泌的單克隆抗體能夠與天然PBP2a呈陽性反應(yīng)。用其中2株單克隆抗體建立的PBP2a膠體金免疫層析方法,可在5~20 min內(nèi)完成檢測。結(jié)論獲得了特異性針對PBP2a蛋白的單克隆抗體,并初步建立了檢測PBP2a蛋白的膠體金免疫層析檢測方法,為臨床快速、簡便檢測產(chǎn)生PBP2a的細(xì)菌提供了檢測方法。
【作者單位】： 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室;上海市普陀區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 青霉素結(jié)合蛋白a 單克隆抗體 膠體金免疫層析法
【基金】：上海市普陀區(qū)科技自主創(chuàng)新資助項(xiàng)目(項(xiàng)目編號:普KW11103)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-resist-ant Staphylococcus aureus,MRSA),俗稱“超級病菌”,其mec A基因編碼青霉素結(jié)合蛋白2a(Penicillin-bingding protein 2a,PBP2a)[1]。PBP2a是一種參與細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖合成的酶,由668個(gè)氨基酸殘基組成,相對分子質(zhì)量為76 000,由于

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7 應(yīng)春妹;沈文艷;汪雅萍;葉楊芹;張灝e

本文編號：1122952