本文關(guān)鍵詞：聯(lián)合骨形成蛋白-2與成骨細(xì)胞誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨分化的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： rhBMP-2 成骨細(xì)胞 骨髓基質(zhì)細(xì)胞 聯(lián)合 骨性分化

【摘要】：目的： 探討并評(píng)估骨髓基質(zhì)細(xì)胞（BMSCs）在骨形成蛋白-2（rhBMP-2）和成骨細(xì)胞（osteoblasts）分別單獨(dú)誘導(dǎo)及聯(lián)合誘導(dǎo)作用下，其骨向分化能力的差別，為組織工程中骨髓基質(zhì)細(xì)胞的成骨分化誘導(dǎo)提供新的思路。 方法： 1、運(yùn)用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)4w齡SD大鼠的骨髓基質(zhì)細(xì)胞（BMSCs），通過(guò)分離、培養(yǎng)、純化BMSCs，得到純化的P3代細(xì)胞待用。 2、BMSCs的鑒定：通過(guò)逐日的形態(tài)學(xué)觀察并記錄，采用倒置相差顯微鏡及透射電子顯微鏡觀察，鑒定是否是骨髓基質(zhì)細(xì)胞； 3、通過(guò)改進(jìn)酶消化法結(jié)合反復(fù)貼壁法培養(yǎng)1d齡SD乳鼠的成骨細(xì)胞。 4、形態(tài)學(xué)觀察結(jié)合ALP染色檢測(cè)手段對(duì)成骨細(xì)胞進(jìn)行鑒定。 5、實(shí)驗(yàn)分四組：rhBMP-2誘導(dǎo)組、成骨細(xì)胞誘導(dǎo)組、rhBMP-2+成骨細(xì)胞誘導(dǎo)組、單純培養(yǎng)液組。將分別于第3、6、9d所取的細(xì)胞培養(yǎng)液上清液收集在一起，測(cè)定各組第3、6、9d的ALP的含量并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1、運(yùn)用貼壁生長(zhǎng)法的成功培養(yǎng)出BMSCs，形態(tài)學(xué)觀察具有BMSCs的典型形態(tài)學(xué)特征。 2、通過(guò)改進(jìn)酶消化法結(jié)合反復(fù)貼壁法成功培養(yǎng)出成骨細(xì)胞，形態(tài)學(xué)觀察具有成骨細(xì)胞的典型形態(tài)學(xué)特征，，堿性磷酸酶檢測(cè)顯示為陽(yáng)性。 3、rhBMP-2誘導(dǎo)組、成骨細(xì)胞誘導(dǎo)組、rhBMP-2+成骨細(xì)胞誘導(dǎo)組均檢測(cè)出成骨細(xì)胞生成，單純培養(yǎng)液組未觀察到成骨細(xì)胞的生成。其中，rhBMP-2+成骨細(xì)胞誘導(dǎo)組培養(yǎng)上清液ALP含量明顯較另兩組大，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論： 結(jié)論： 1、rhBMP-2、成骨細(xì)胞、rhBMP-2聯(lián)合成骨細(xì)胞均能提供成骨微環(huán)境，并在體外誘導(dǎo)BMSCs向成骨細(xì)胞分化。 2、rhBMP-2聯(lián)合成骨細(xì)胞對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的成骨向分化具有更優(yōu)的誘導(dǎo)能力。關(guān)鍵詞：rhBMP-2；成骨細(xì)胞；骨髓基質(zhì)細(xì)胞；聯(lián)合；骨性分化
【關(guān)鍵詞】：rhBMP-2 成骨細(xì)胞 骨髓基質(zhì)細(xì)胞 聯(lián)合 骨性分化
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 主要縮略語(yǔ)中英文對(duì)照6-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-17
• 1.骨組織工程種子細(xì)胞的研究概況11-12
• 2.BMSCS 向成骨細(xì)胞定向分化的研究現(xiàn)狀12-16
• 3.本課題研究思路的提出16
• 4.具體研究?jī)?nèi)容16-17
• 實(shí)驗(yàn)的主要儀器及試劑17-20
• 實(shí)驗(yàn)一 骨髓基質(zhì)細(xì)胞（BMSCS）培養(yǎng)及鑒定20-25
• 1. 研究目的20
• 2. 實(shí)驗(yàn)材料20
• 3. 實(shí)驗(yàn)方法20-21
• 4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-23
• 5. 討論23-24
• 6. 結(jié)論24-25
• 實(shí)驗(yàn)二 成骨細(xì)胞分離培養(yǎng)及鑒定25-31
• 1. 研究目的25
• 2. 實(shí)驗(yàn)材料25-26
• 3. 實(shí)驗(yàn)方法26-27
• 4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-29
• 5. 討論29-30
• 6. 結(jié)論30-31
• 實(shí)驗(yàn)三 RHBMP-2、成骨細(xì)胞誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨分化及檢測(cè)31-36
• 1. 研究目的31
• 2. 實(shí)驗(yàn)材料31
• 3. 實(shí)驗(yàn)方法31-32
• 4. 結(jié)果32-33
• 5. 討論33-35
• 6. 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 附錄39-40
• 致謝40-41
• 綜述41-46
• 參考文獻(xiàn)46

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 滕勇,胡蘊(yùn)玉,安書(shū)杰,戴先文,趙黎,白建萍,李旭升,呂榮;成人骨髓基質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及定向誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年16期

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9 張曉東,楊維東,顧曉明,錢(qián)奇春,趙麗君;骨髓基質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化成骨細(xì)胞修復(fù)骨缺損:成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子和骨形成蛋白-2的作用[J];現(xiàn)代康復(fù);2001年20期

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本文編號(hào)：1111605