本文關(guān)鍵詞：不同佐劑對(duì)重組MUC1-MBP融合蛋白誘導(dǎo)的免疫活性的影響

  更多相關(guān)文章： 重組MUC1-MBP融合蛋白 佐劑 免疫活性 Th1/Th2 腫瘤疫苗

【摘要】：MUC1粘蛋白是腫瘤相關(guān)抗原，由于正常組織和腫瘤組織表達(dá)的差異使其成為抗腫瘤治療的理想靶點(diǎn)。近年本研究組研究發(fā)現(xiàn)大腸桿菌麥芽糖結(jié)合蛋白（maltose binding protein, MBP）能夠提高融合蛋白的免疫原性，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答。本課題組將人MUC1基因插入MBP基因下游，成功制備出重組MUC1-MBP融合蛋白，用于抗腫瘤疫苗的開(kāi)發(fā)，并取得一定療效。但由于MUC1-MBP融合蛋白單獨(dú)免疫，產(chǎn)生的免疫應(yīng)答并不強(qiáng)烈，因此我們需要尋找合適佐劑與之配伍，以便誘導(dǎo)出安全、持久、有效的免疫應(yīng)答，尤其是有利于抗腫瘤作用的Th1型免疫應(yīng)答。 本研究通過(guò)誘導(dǎo)表達(dá)、超聲破碎、柱層析等方法制備出純度較高的MUC1-MBP融合蛋白，分別與卡介苗（BCG）、卡介苗多糖核酸（BCG-PSN）、胸腺肽（Tα1）等聯(lián)合免疫小鼠，觀察免疫活性變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，，只有BCG與MUC1-MBP融合蛋白聯(lián)合后，脾指數(shù)、MUC1特異性淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)、IFN-γ水平、IgG2a/IgG1等指標(biāo)均明顯升高，說(shuō)明顯著誘導(dǎo)產(chǎn)生Th1型應(yīng)答。而其他配伍藥物均不能明顯誘導(dǎo)Th1型應(yīng)答。本研究進(jìn)一步優(yōu)化BCG的免疫劑量和免疫次數(shù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MUC1-MBP融合蛋白配伍BCG50mg/kg·次，免疫2次所產(chǎn)生的血清IgG2a/IgG1值最高，Th1免疫應(yīng)答傾向最明顯。從小鼠體重變化來(lái)看，免疫BCG劑量過(guò)大時(shí)副作用增加。提示適量的BCG配伍MUC1-MBP融合蛋白疫苗免疫才能夠誘導(dǎo)出最強(qiáng)烈的Th1型免疫應(yīng)答。 本研究初步篩選MUC1-MBP融合蛋白的配伍佐劑，并建立最佳免疫方案，為MUC1-MBP融合蛋白抗腫瘤疫苗的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：重組MUC1-MBP融合蛋白 佐劑 免疫活性 Th1/Th2 腫瘤疫苗
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R392
【目錄】：

• 提要4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-15
• 第1章 文獻(xiàn)綜述15-25
• 1.1 MUC1 的生物學(xué)特性16-17
• 1.2 MUC1 與腫瘤17-18
• 1.3 以 MUC1 為靶點(diǎn)的免疫治療的研究進(jìn)展18-22
• 1.4 腫瘤疫苗佐劑的研究進(jìn)展22-23
• 1.5 MBP 免疫功能的研究進(jìn)展23
• 1.6 研究?jī)?nèi)容23-25
• 第2章 MUC1-MBP 融合蛋白和 MUC1 多肽的制備及鑒定25-33
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料25-26
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法26-30
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-33
• 第3章 不同佐劑對(duì) MUC1-MBP 融合蛋白誘導(dǎo)的免疫活性的影響33-44
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料33-34
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法34-38
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果38-44
• 第4章 MUC1-MBP 融合蛋白與BCG 聯(lián)合免疫方案的優(yōu)化44-49
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料44-45
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法45-46
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果46-49
• 第5章 討論49-54
• 5.1 MUC1-MBP 融合蛋白配伍佐劑的選擇49-50
• 5.2 不同佐劑聯(lián)合 MUC1-MBP 融合蛋白對(duì)免疫活性的影響50-52
• 5.3 MUC1-MBP 融合蛋白疫苗與 BCG 聯(lián)合免疫方案的優(yōu)化52-54
• 結(jié)論54-55
• 參考文獻(xiàn)55-65
• 攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研成果65-66
• 致謝66

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 劉揚(yáng)東;胸腺素α_1在腫瘤治療中的應(yīng)用進(jìn)展[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2001年02期

2 趙小霞;馬吉春;方芳;周靜;宋獻(xiàn)美;柳忠輝;臺(tái)桂香;;大腸桿菌麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)誘導(dǎo)小鼠Th1細(xì)胞的活化作用[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2009年06期

本文編號(hào)：1105817