發(fā)布時間：2017-10-25 14:21

  本文關(guān)鍵詞：人類FcRn跨腸粘膜傳遞兔抗體的研究

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【摘要】：免疫乳中不僅含有基本的營養(yǎng)物質(zhì)，而且還含有豐富的免疫球蛋白，尤其是免疫球蛋白G，對于哺乳動物而言，母源IgG能夠跨過胎盤屏障、上皮屏障傳遞給胎兒和嬰幼兒，從而使其獲得抵御各種疾病感染的能力，而這一過程需要新生兒Fc受體（FcRn)的參與。另外，IgG的Fc端能夠和多種先天免疫細胞（如巨噬細胞、單核細胞、嗜中性粒細胞、嗜堿性粒細胞、NK細胞等）上的Fc受體結(jié)合發(fā)揮免疫作用。 由于本實驗室的前期研究已經(jīng)證明家兔的IgG和人類FcRn的親和力最強，甚至超過人類自己的IgG，所以本研究選擇牛IgG作為抗原，對兔子進行免疫，制備兔抗牛多克隆抗體IgG，主要以青年健康志愿者為研究對象，通過口服異源抗體，，利用補體結(jié)合試驗檢測異源抗體能否跨腸黏膜傳遞。另外，實驗還通過流式細胞儀以及紫外熒光顯微鏡對實驗結(jié)果做了進一步的驗證。 補體結(jié)合試驗檢測結(jié)果，血清實驗組比對照組有較為顯著差異（P=0.0150.05)，同時，白細胞實驗組比對照組也有顯著差異（P=0.0270.05)，這些數(shù)據(jù)表明在受試者的血清及白細胞上均存在兔抗牛IgG，即異源抗體能夠跨腸粘膜轉(zhuǎn)運而進入到血液循環(huán)中，并能夠和白細胞上的Fc受體結(jié)合。21天后，為追蹤異源抗體在體內(nèi)存在的半衰期，對受試者的血液再一次進行了分析，結(jié)果表明，血清實驗組較對照組已無顯著差異（P=0.0730.05)，而白細胞實驗組較對照組仍有顯著差異（P=0.0440.05)。也就是說，受試者的血清中已不存在兔抗牛IgG，但在白細胞上仍然檢測到了兔抗牛IgG的存在。為進一步證明該結(jié)論，實驗選擇FITC標(biāo)記的抗原與被檢血液進行孵育反應(yīng)，利用流式細胞儀監(jiān)測分析以及熒光顯微鏡觀察，二者均檢測到了熒光信號的存在，這些都表明異源抗體不僅能夠跨腸粘膜傳遞，而且能夠在機體內(nèi)存留較長時間。這些實驗結(jié)果將為免疫乳以及嬰幼兒奶粉中添加異源IgG能否被吸收提供依據(jù)，也將為異源抗體用于疾病和腫瘤治療提供一條新的途徑。
【關(guān)鍵詞】：牛IgG 兔抗牛IgG FcRn Fc受體 補體結(jié)合試驗 熒光信號
【學(xué)位授予單位】：天津商業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R392
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-8
• 第一章 前言8-20
• 1.1 引言8-12
• 1.1.1 免疫乳的概述及發(fā)展8
• 1.1.2 特異性免疫球蛋白8-10
• 1.1.3 免疫球蛋白 Fc 受體10-12
• 1.2 新生兒免疫球蛋白 Fc 受體(neonatal Fc receptor,FcRn)12-17
• 1.2.1 FcRn 與 IgG 的相互作用14-16
• 1.2.2 IgG 的跨腸粘膜傳遞16-17
• 1.3 FcRn 母嬰和母子之間的免疫傳遞17-19
• 1.4 課題研究的依據(jù)和意義19-20
• 1.4.1 課題選擇的依據(jù)19
• 1.4.2 課題研究的意義19-20
• 第二章 材料與方法20-37
• 2.1 提取單克隆抗體牛 IgG20-22
• 2.1.1 實驗原料20
• 2.1.2 主要實驗試劑20
• 2.1.3 實驗儀器20-21
• 2.1.4 實驗方法21-22
• 2.2 醋酸纖維膜電泳鑒定牛 IgG 純度22-24
• 2.2.1 實驗試劑22
• 2.2.2 實驗器材22
• 2.2.3 實驗方法22-24
• 2.3 制備多克隆抗體兔抗牛 IgG24-25
• 2.3.1 實驗藥品及儀器24
• 2.3.2 實驗動物24
• 2.3.3 免疫方法24-25
• 2.4 雙向免疫擴散法測定抗血清效價25-26
• 2.4.1 實驗原理25
• 2.4.2 實驗儀器和試劑25
• 2.4.3 方法25-26
• 2.5 IgG 的跨腸黏膜傳遞26-37
• 2.5.1 實驗試劑26-27
• 2.5.2 實驗儀器27
• 2.5.3 實驗對象及方案27
• 2.5.4 血液預(yù)處理27-28
• 2.5.5 利用補體結(jié)合試驗研究 IgG 的跨腸黏膜傳遞28-31
• 2.5.6 補體結(jié)合預(yù)實驗31-34
• 2.5.7 補體結(jié)合試驗正式實驗34-35
• 2.5.8 流式細胞儀檢測熒光信號35-36
• 2.5.9 熒光顯微鏡下觀察熒光信號36-37
• 第三章 結(jié)果與分析37-49
• 3.1 免疫球蛋白牛 IgG 醋酸纖維膜電泳37
• 3.2 兔抗牛 IgG 抗血清效價測定37-38
• 3.3 補體結(jié)合試驗結(jié)果38-46
• 3.3.1 溶血素的效價38-39
• 3.3.2 補體的效價39-40
• 3.3.3 正式實驗結(jié)果40-46
• 3.4 流式細胞儀檢測結(jié)果46-48
• 3.5 熒光顯微鏡下觀察熒光信號圖片48-49
• 第四章 結(jié)論49-51
• 4.1 IgG 的跨腸黏膜傳遞49
• 4.2 論文創(chuàng)新點49-50
• 4.3 尚存在的問題及進一步設(shè)想50-51
• 參考文獻51-56
• 發(fā)表論文及參加科研情況56-57
• 致謝57-58

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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本文編號：1094101