發(fā)布時間：2017-10-25 03:38

  本文關(guān)鍵詞：聚乙烯亞胺-蛋白納米復(fù)合體轉(zhuǎn)染蛋白進入骨髓間充質(zhì)干細胞的應(yīng)用研究

  更多相關(guān)文章： 聚乙烯亞胺 骨髓間充質(zhì)干細胞 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染

【摘要】：目的:探索納米材料聚乙烯亞胺(PEI)攜載不同分子量的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染進人骨髓間充質(zhì)干細胞(h BMSCs)的作用及優(yōu)化其最佳配比條件。方法:利用物理化學(xué)作用構(gòu)建6組PEI-DNase I(DNA酶I)復(fù)合體,運用激光散射技術(shù)初步摸索其最佳摩爾比,用透射電鏡直觀復(fù)原納米-蛋白復(fù)合體外貌;同時,原代分離培養(yǎng)健康人的骨髓間充質(zhì)干細胞并進行體外擴增,通過構(gòu)建成功的4組PEI-GFP(綠色熒光蛋白)納米蛋白復(fù)合體對h BMSCs進行轉(zhuǎn)染,共聚焦熒光顯微鏡下觀察熒光表達情況,再通過MTT法檢測該復(fù)合體對細胞增殖的毒性影響,并用β-半乳糖苷酶實驗驗證其轉(zhuǎn)入蛋白的活性表現(xiàn)。結(jié)果:當PEI與蛋白質(zhì)的摩爾比為4∶1時,形成的復(fù)合體轉(zhuǎn)染效率最高,β-半乳糖苷酶實驗細胞染色變藍。結(jié)論:PEI能與蛋白質(zhì)形成納米復(fù)合體,并能轉(zhuǎn)染多種蛋白質(zhì)進入人骨髓間充質(zhì)干細胞,所轉(zhuǎn)染的蛋白質(zhì)分子仍具有活性,為細胞重編程技術(shù)提供了新途徑。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué);廣東省人民醫(yī)院/廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 廣東省心血管病研究所;廣東省人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科;
【關(guān)鍵詞】： 聚乙烯亞胺 骨髓間充質(zhì)干細胞 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染
【基金】：國家自然科學(xué)基金重點資助項目(No.81120108003;No.81330007)
【分類號】：R3411
【正文快照】： 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染技術(shù)是一門新興的轉(zhuǎn)染技術(shù),是直接把蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)入活細胞的過程。目標蛋白質(zhì)一般要在載體的幫助下,與載體形成復(fù)合體而被轉(zhuǎn)染進入細胞內(nèi)。蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染進入細胞有非常重要的科研價值和應(yīng)用前景,主要研究有:(1)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用;(2)細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)、細胞周期調(diào)控、細

【共引文獻】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 關(guān)秀文;基因和藥物共傳遞體系的制備與研究[D];長春理工大學(xué);2014年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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2 盧雪梅;黃演婷;金小寶;汪潔;朱家勇;;肝靶向穿膜肽與家蠅天蠶素基因的融合及其分子特征分析[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2012年03期

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【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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4 李經(jīng)忠,王青青,余海,沈芬平,吳萍萍;聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)基因影響因素的測定及其優(yōu)化[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2004年02期

5 徐松琳;金拓;;新型聚乙烯亞胺衍生物體內(nèi)轉(zhuǎn)染活性的研究[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展;2008年12期

6 李非凡;田華雨;陳磊;夏加亮;陳學(xué)思;景遐斌;;六氯環(huán)三磷腈交聯(lián)寡聚乙烯亞胺的制備及基因載體應(yīng)用[J];高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報;2010年09期

7 陳曉愛;鄧宇斌;;納米載體多聚乙烯亞胺介導(dǎo)基因治療的研究進展[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2011年01期

8 楊冬;周啟;樊國棟;;聚乙烯亞胺用作基因轉(zhuǎn)染載體的研究進展[J];中國醫(yī)藥生物技術(shù);2007年04期

9 唐秋莎;張東生;顧寧;叢小明;萬美玲;金立強;;聚乙烯亞胺在錳鋅鐵氧體納米粒子表面定量吸附[J];東南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2007年05期

10 陳，

本文編號：1091931