本文關(guān)鍵詞：聚凝胺增強(qiáng)Ror2重組腺病毒感染K562細(xì)胞效應(yīng)的研究

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【摘要】：目的探索應(yīng)用聚凝胺(polybrene)試劑增強(qiáng)Ror2重組腺病毒對K562細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的技術(shù)。方法在K562細(xì)胞中分別加入0~12μl Ror2重組腺病毒,摸索最佳重組腺病毒用量;同時(shí)加入0~5μg/ml polybrene和最佳重組腺病毒用量,培養(yǎng)1~3d后,在熒光顯微鏡下計(jì)數(shù),對比加入polybrene前后被感染的細(xì)胞數(shù)。臺盼藍(lán)染色觀察重組腺病毒引起K562細(xì)胞死亡的情況。采用RT-PCR和Western blotting檢測Ror2基因的表達(dá)情況。結(jié)果 Polybrene濃度為3μg/ml和重組腺病毒8μl時(shí),感染效果最佳,對細(xì)胞生長影響較小,實(shí)驗(yàn)組感染效果是對照組的17倍;加入polybrene后,外源性Ror2m RNA和蛋白表達(dá)水平均明顯增高。結(jié)論 Polybrene能顯著增強(qiáng)重組腺病毒感染K562細(xì)胞的作用,并能高效表達(dá)外源性Ror2基因,該法簡便、價(jià)廉、有效,是血液疾病分子生物學(xué)研究的一個(gè)良好策略。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院臨床血液學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 聚凝胺 腺病毒科 K細(xì)胞 基因 ror
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81370624)~~
【分類號】：R373
【正文快照】： 入效率高,被廣泛采用。生物學(xué)方法通常采用病毒作為基因載體,如反轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒和腺病毒載體。慢病毒和反轉(zhuǎn)錄病毒導(dǎo)入的基因可整合到細(xì)胞的基因組序列中,所以有潛在致病風(fēng)險(xiǎn),且導(dǎo)入細(xì)胞的拷貝數(shù)不高,基因表達(dá)變化不明顯,且不易感染終末期或增殖慢的細(xì)胞,制備也相對煩瑣。

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 龍亞銀;低離子聚凝胺法與鹽水法交叉配血效能的比較[J];廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年04期

2 黃會杰;葛巖;羅國蘭;徐方平;許潔;陳潔;張科平;劉艷輝;;難轉(zhuǎn)染懸浮細(xì)胞OCI-LY8慢病毒過表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建[J];廣東醫(yī)學(xué);2014年09期

3 任倩;劉英;周紅梅;葛林;;慢病毒載體感染人口腔黏膜成纖維細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白的研究[J];臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志;2013年01期

4 肖恒;王海霞;陶];劉鑫;鐘梁;黃世峰;馮文莉;;CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA融合肽在K562細(xì)胞中的定位及其與BCR-ABL蛋白的相互作用[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2013年11期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李擁軍;;低離子聚凝胺技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J];中外醫(yī)療;2014年06期

2 文良雪;劉鑫;李會;黃寧姝;黃崢蘭;馮文莉;;ABL SH3-T79Y突變體聯(lián)合伊馬替尼對慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞增殖的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2015年08期

3 劉張玲;胡晶;黃崢蘭;李會;劉毅;馮文莉;;AKT抑制劑對慢粒急變期K562細(xì)胞中Wnt/β-catenin信號通路的影響及其效應(yīng)觀察[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2015年09期

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 Ayda Bennour;Ikram Tabka;Yosra Ben Youssef;Zahra Kmeira;Abderrahim Khelif;Ali Saad;Halima Sennana;;A novel t(3;12)(q21;p13) translocation in a patient with accelerated chronic myeloid leukemia after imatinib and nilotinib therapy[J];Cancer Biology & Medicine;2013年01期

2 劉坤;低離子聚凝胺交叉配血中的應(yīng)用[J];河北醫(yī)學(xué);2000年03期

3 楊柳;江千里;孟凡義;宋蘭林;林榕;徐曉蘭;周淑蕓;;熒光定量PCR對伊馬替尼治療后慢性粒細(xì)胞白血病bcr/abl融合基因變化的檢測效果研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2007年05期

4 江浩;陳珊珊;黃曉軍;秦亞溱;賴悅云;秦效英;江濱;;伊馬替尼血漿谷質(zhì)量濃度與慢性粒細(xì)胞白血病慢性期療效相關(guān)性研究[J];中國實(shí)用內(nèi)科雜志;2012年02期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 譚祺媛;邵淑麗;陳琳;武廣慧;張偉偉;;絲裂霉素誘導(dǎo)人白血病K562細(xì)胞凋亡的研究[J];高師理科學(xué)刊;2012年03期

2 何曉;齊浩;周錫坤;陳文芳;;高效液相色譜法測定K562細(xì)胞對順鉑的攝取[J];西安文理學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2009年02期

3 劉宇峰,徐力致,程霓,王勇,凌立君,傅健;螺旋藻藻藍(lán)蛋白對人血癌細(xì)胞K562生長的影響(英文)[J];南京大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2000年05期

4 宋海星,馬文麗,宋艷斌,張寶,鄭文嶺;cyclin E基因siRNA抑制K562細(xì)胞生長的研究[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年04期

5 趙春貴,楊斌盛,白海靜,劉文,張偉;K562細(xì)胞對稀土轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)合及內(nèi)吞作用[J];科學(xué)通報(bào);2002年19期

6 高淼;黃崢蘭;曹唯希;李千音;李會;馮文莉;;FKBP-RAP-FRB系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)BCR-ABL入核對K562細(xì)胞的增殖抑制效應(yīng)[J];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2014年04期

7 姚駿,夏天驪,吳旭峰,高靜,趙曉寧,胡正榮,張祖暄;低強(qiáng)度He-Ne激光照射對K562細(xì)胞的抑制作用[J];中國激光醫(yī)學(xué)雜志;2001年02期

8 朱雪姣;李育敏;谷景義;郭敏;費(fèi)嘉;;靶向抑制miRNA-21提高白血病K562細(xì)胞對阿糖胞苷的敏感性[J];生命科學(xué)研究;2011年04期

9 宋艷斌,馬文麗,馮春瓊,石嶸,毛向明,張寶,鄭文嶺;消減雜交技術(shù)結(jié)合限制性顯示技術(shù)制備K562細(xì)胞特異基因探針[J];生命科學(xué)研究;2005年03期

10 郭鮮花;涂序珉;左雅慧;王放;王小莉;王仲文;;~(60)Co γ射線照射K562細(xì)胞后培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移介導(dǎo)的旁效應(yīng)研究[J];輻射防護(hù);2009年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 張小平;孫潤廣;;超聲提取白術(shù)多糖對K562細(xì)胞增長抑制的研究[A];2013中國西部聲學(xué)學(xué)術(shù)交流會論文集（上）[C];2013年

2 徐冬;任秀寶;李慧;張維紅;趙燕儀;付曉達(dá);;抗ABL酪氨酸激酶區(qū)胞內(nèi)抗體促進(jìn)K562細(xì)胞凋亡[A];第四屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

3 秦東;王季石;;STI571與慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞及K562細(xì)胞中的血紅素加氧酶-1的基因表達(dá)關(guān)系的研究[A];貴州省2008年血液學(xué)年會論文匯編[C];2008年

4 姚偉娟;陳凱;謝利德;孫大公;文宗曜;;K562細(xì)胞轉(zhuǎn)p16基因前后流變學(xué)特性的改變[A];全國第九屆生物力學(xué)和流變學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2001年

5 馬玲娣;蔣麗佳;王朵勤;唐敏;范靜;夏蕾;;苦參堿抑制人慢粒K562細(xì)胞生長和誘導(dǎo)凋亡作用研究[A];2009年首屆全國中西醫(yī)腫瘤博士及中青年醫(yī)師論壇論文集[C];2009年

6 扈瑞平;賈永峰;薛昕;敖長金;杜玲;張三潤;苑紅;;蒙古韭多糖對人白血病K562細(xì)胞增值的影響[A];科技創(chuàng)新與經(jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)調(diào)整——第七屆內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學(xué)學(xué)術(shù)年會優(yōu)秀論文集[C];2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 徐錚;兩種骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對K562細(xì)胞生長調(diào)控的不同作用及機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

2 吳枝娟;慢病毒介導(dǎo)bcr/abl基因長期沉默對K562細(xì)胞生物學(xué)特性與姜黃素抗腫瘤作用影響及其相關(guān)機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉玲玲;慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞適配子的篩選、鑒定與結(jié)構(gòu)分析[D];蘭州大學(xué);2009年

2 曹喻靈;山茱萸總皂苷對白血病K562細(xì)胞凋亡的影響[D];南華大學(xué);2013年

3 高愛霞;花青素誘導(dǎo)K562、NCI-H460細(xì)胞凋亡及抑制裸鼠移植瘤生長的研究[D];蘇州大學(xué);2008年

4 秦穎;人IL-15在K562細(xì)胞中的表達(dá)研究[D];吉林大學(xué);2014年

5 王宏斌;野生型p53基因?qū)Π籽562細(xì)胞中心體的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

6 劉文;辛伐他汀經(jīng)死亡受體途徑誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡及其機(jī)制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

7 田文君;抑癌基因p53對白血病K562細(xì)胞中心體異常的抑制作用及其機(jī)制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2009年

8 魯敏;白藜蘆醇聯(lián)合阿糖胞苷對K562細(xì)胞的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2006年

9 謝泗停;黃芩苷對白血病細(xì)胞株K562增殖、凋亡的影響及機(jī)制探討[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

10 鄭海濤;苦參堿對人白血病K562細(xì)胞表觀遺傳因素影響的機(jī)制研究[D];汕頭大學(xué);2008年

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