發(fā)布時(shí)間：2017-10-23 17:14

  本文關(guān)鍵詞：抗人肌紅蛋白單克隆抗體的制備及應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 人肌紅蛋白 細(xì)胞融合 單克隆抗體 ELISA雙抗體夾心法

【摘要】：目的制備高效價(jià)、高特異性的抗人肌紅蛋白(MYO)單克隆抗體(m Ab),建立ELISA雙抗體夾心法檢測人血清中MYO。方法用天然的MYO進(jìn)行免疫,用雜交瘤技術(shù)獲得穩(wěn)定分泌抗人MYO m Ab的細(xì)胞株;制備腹水型m Ab,經(jīng)親和純化后進(jìn)行抗體特性鑒定;確定最佳配對組合并建立雙抗體夾心ELISA一步法,對血清樣本進(jìn)行檢測,并與進(jìn)口試劑盒進(jìn)行比較。結(jié)果共篩選出9株能穩(wěn)定分泌m Ab的細(xì)胞株,其中2M1、3M4、5M7、10M4親和純化后效價(jià)達(dá)到(1.0~2.6)×106(A450約為1.0時(shí)的抗體稀釋倍數(shù))�？贵w配對共篩選出3對能進(jìn)行夾心配對的抗體(2M1/HRP-3M4、5M7/HRP-3M4、10M4/HRP-5M7),其中5M7/HRP-3M4這個(gè)配對有較高的靈敏度和較大的線性范圍;利用最佳配對組合5M7/HRP-3M4建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,其線性范圍為(25~1000)ng/m L,優(yōu)于進(jìn)口試劑盒的線性范圍(25~500)ng/m L;樣本檢測結(jié)果顯示,自制試劑盒的陽性檢出率為95%(19/20),陰性檢出率為100%(40/40)。結(jié)論獲得了2株高特異性,高親和力的抗人MYO m Ab,建立了雙抗體夾心ELISA一步法,為ELISA試劑盒的研制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 暨南大學(xué)抗體工程中心廣東省分子免疫與抗體工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣州市疾病與食品安全免疫學(xué)快速檢測企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室暨南大學(xué)分室;
【關(guān)鍵詞】： 人肌紅蛋白 細(xì)胞融合 單克隆抗體 ELISA雙抗體夾心法
【基金】：廣東省戰(zhàn)略新興產(chǎn)業(yè)核心技術(shù)攻關(guān)項(xiàng)目(2012A080800007) 廣東省產(chǎn)學(xué)研項(xiàng)目(2010B090400426)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 楊全利,劉詩琴,談思怡,邵晨晨,黃建芳,向軍儉*(暨南大學(xué)抗體工程中心,廣東省分子免疫與抗體工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州市疾病與食品安全免疫學(xué)快速檢測企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室暨南大學(xué)分室,廣東廣州510632逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄逄

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 劉行超;高云;曾桂芬;聞濤;農(nóng)妍;胡松林;;2種肌紅蛋白檢測試劑的比較[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2014年02期

2 楊超一;張雪峰;李子穎;馮婷婷;;抗肌紅蛋白單克隆抗體的制備與鑒定及其初步應(yīng)用[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2015年02期

3 康可人;吳培鈿;李悅琳;黃綺玲;李高輝;唐時(shí)幸;王繼華;;抗心型脂肪酸結(jié)合蛋白單克隆抗體制備、鑒定和在側(cè)向免疫層析方法中的應(yīng)用[J];中國生物工程雜志;2013年01期

4 顏露;唐勇;向軍儉;翟一凡;楊紅宇;;抗重金屬Cr~(3+)單克隆抗體的制備及其應(yīng)用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年04期

5 駱敏兒;唐勇;向軍儉;張曉麗;付強(qiáng)強(qiáng);王宏;;玉米赤霉烯酮單克隆抗體的制備及膠體金免疫層析法的建立[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2013年07期

6 康可人;吳培鈿;盧艷華;張健;唐時(shí)幸;王繼華;;D-二聚體單克隆抗體制備及其在免疫熒光快速定量檢測中的應(yīng)用[J];中國醫(yī)藥生物技術(shù);2012年03期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃亮亮;吳志強(qiáng);李艷紅;朱召軍;耿俊杰;黃德練;常濤;;魚體重金屬檢測方法的研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年14期

2 侯月娥;姜瑞麗;李旭寧;田書會(huì);;飼料和原料中玉米赤霉烯酮的危害及檢測方法探討[J];當(dāng)代畜牧;2014年03期

3 李妮妮;符基定;陳威丞;芮蕾;溫漢春;朱繼金;;氯吡格雷預(yù)處理對膿毒癥大鼠心肌損傷保護(hù)作用及機(jī)制的研究[J];安徽醫(yī)藥;2014年05期

4 沈漢榮;薛征;鄭銳;;局域表面等離子共振傳感器概述[J];北京生物醫(yī)學(xué)工程;2015年02期

5 馮云紅;;STEMI患者不同類型對應(yīng)心電圖導(dǎo)聯(lián)ST段改變與臨床預(yù)后的相關(guān)性分析[J];河北醫(yī)藥;2013年21期

6 鐘傳軍;陳細(xì)香;;慢性心力衰竭患者血清心肌肌鈣蛋白I與心肌重構(gòu)及心臟功能的相關(guān)性分析[J];河北醫(yī)學(xué);2014年01期

7 陳基耘;何s，

本文編號(hào)：1084488