本文關(guān)鍵詞：雞胚細胞培養(yǎng)狂犬病病毒工藝的優(yōu)化

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【摘要】：目的優(yōu)化雞胚細胞(chick embryo cells,CECs)培養(yǎng)狂犬病病毒(rabies virus,RV)的工藝。方法以M199為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,向其分別加入人血白蛋白、胎牛血清及HEPES緩沖液,并均加入碳酸氫鈉,配制培養(yǎng)基M1、M2和M3。將馴化獲得的CTNCEC25株按1∶5 000的比例接種于CECs懸液中,在不同培養(yǎng)條件下,通過單因素試驗初步確定培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)溫度、接種MOI及培養(yǎng)時間4大工藝參數(shù)范圍,再以正交試驗確定上述條件的最佳組合。結(jié)果單因素試驗初步確定的工藝參數(shù):采用M2或M3,培養(yǎng)溫度為33~36℃,MOI=0.01~0.001 FFU/細胞,培養(yǎng)時間為72~120 h,可獲得較高的病毒滴度(7.0 lg FFU/ml以上)。正交試驗確定的最佳工藝條件:采用M3,培養(yǎng)溫度為33℃,MOI=0.01 FFU/細胞,培養(yǎng)時間為120 h,該工藝參數(shù)獲得病毒滴度可達7.5 lg FFU/ml。結(jié)論本實驗優(yōu)化了CECs培養(yǎng)RV的工藝,CTNCEC25株的病毒滴度由約6.0 lg FFU/ml提高至7.0 lg FFU/ml以上,為疫苗生產(chǎn)獲得理想抗原量奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 深圳市衛(wèi)光生物制品股份有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 雞胚細胞 狂犬病病毒 工藝優(yōu)化 病毒滴度
【分類號】：R373
【正文快照】： 狂犬病是由狂犬病病毒(rabies virus,RV)引起的病毒性傳染病,致死率幾乎100%,尚無有效治療方法,疫苗接種免疫是預(yù)防狂犬病的唯一有效途徑。目前,人二倍體細胞狂犬病疫苗(human diploid cellrabies vaccine,HDCV)被認(rèn)為是國際狂犬病疫苗的金標(biāo)準(zhǔn),但高昂的價格限制了其在發(fā)展中

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本文編號：1074740