本文關(guān)鍵詞：不同飽和度的單純甘油酯對動脈粥樣硬化模型的平滑肌細胞功能的影響

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【摘要】：心血管疾病是目前威脅全世界人類健康的一類重大疾病,動脈粥樣硬化(AS)是心血管疾病中常見的最重要的一種,在動脈粥樣硬化的發(fā)生機制中,炎癥反應(yīng)起著重要作用。氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導內(nèi)皮細胞功能紊亂和平滑肌細胞(SMC)增生,促進炎癥反應(yīng)被認為是參與動脈粥樣硬化發(fā)生的重要危險因素。動脈粥樣硬化的形成和脂肪酸的攝入量與種類有很大的關(guān)系。諸多研究表明甘油三酯與心血管疾病的發(fā)生發(fā)展息息相關(guān),特別是動脈粥樣硬化。 本研究采用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導人臍靜脈平滑肌細胞(HUVSMC)建立動脈粥樣硬化細胞模型,探討三硬脂酸甘油酯、三油酸甘油酯和三亞油酸甘油酯對被誘導細胞功能的影響。用MTT法測定平滑肌細胞的增殖,采用劃線傷口愈合法測定平滑肌細胞遷移能力,通過繪制細胞生長曲線,觀察不同飽和度的單純甘油酯對ox-LDL誘導平滑肌細胞增殖與遷移的影響。用Western Blotting法測定不同甘油三酯對平滑肌細胞中PCNA、SM-α-actin、MCP-1蛋白表達的影響和熒光定量PCR測定甘油三酯對平滑肌細胞中的PCNA、SM-α-actin、MCP-1基因的表達的影響,探討酰化位置不同的甘油三酯對動脈粥樣硬化的影響機制。主要研究結(jié)果如下： 1.三硬脂酸甘油酯對經(jīng)過ox-LDL誘導增殖的SMC有促進增殖作用,促進率隨時間的增加而增加,并與甘油三酯濃度成正相關(guān)；三油酸甘油酯和三亞油酸甘油酯對經(jīng)過ox-LDL誘導增殖的SMCs有抑制增殖作用,抑制率隨時間的延長而增加,抑制率在濃度為50-500μmol/L范圍內(nèi)與藥物濃度均呈正相關(guān)。 2.三硬脂酸甘油酯使SMC中SFA含量顯著增多,MUFA和PUFA含量顯著減少,n-3和n-6脂肪酸含量相應(yīng)減少。三油酸甘油酯使SMC中SFA含量稍有升高,MUFA含量顯著增高,PUFA含量減少,n-3和n-6脂肪酸含量無顯著性變化。三亞油酸甘油酯使SMC中SFA含量顯著減少,MUFA含量無明顯變化,PUFA含量顯著增高,n-3和n-6脂肪酸含量增高。 3.三硬脂酸甘油酯對經(jīng)過ox-LDL誘導的平滑肌細胞遷移有著促進作用,三油酸甘油酯和三亞油酸甘油酯對經(jīng)過ox-LDL誘導的平滑肌細胞遷移有抑制作用,三亞油酸甘油酯抑制作用稍弱于三油酸甘油酯。 4.三種單純甘油酯作用于ox-LDL誘導的SMCs,使與細胞增殖、細胞周期等有關(guān)的蛋白表達發(fā)生變化。與ox-LDL組相比,三硬脂酸甘油酯使PCNAMCP-1兩種蛋白表達上調(diào),其mRNA表達也上調(diào),而SM-a-actin的蛋白和mRNA表達下降。而三油酸甘油酯或三亞油酸甘油酯,使PCNA、MCP-1兩種蛋白表達下調(diào),其mRNA表達也下調(diào),但是SM-a-actin蛋白和基因表達都上調(diào)。 實驗結(jié)果表明,三硬脂酸甘油酯對ox-LDL誘導平滑肌細胞的增殖與遷移有著明顯的促進作用,誘導作用呈現(xiàn)時間和劑量的依賴關(guān)系,對動脈粥樣硬化進程有一定的促進作用。而三油酸甘油酯和三亞油酸甘油酯可以抑制ox-LDL誘導增殖的平滑肌細胞增殖,減少細胞遷移距離,對動脈粥樣硬化進程有一定抑制作用。
【關(guān)鍵詞】：三硬脂酸甘油酯 三油酸甘油酯 三亞油酸甘油酯 人臍靜脈平滑肌細胞 氧化型低密度脂蛋白
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R541.4;R-332
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-7
• 縮略飼7-11
• 第1章 引言11-27
• 1.1 概述11
• 1.2 AS發(fā)病機制11-18
• 1.2.1 AS發(fā)病機制11-13
• 1.2.2 甘油三酯含量與AS13-14
• 1.2.3 脂肪酸飽和度與AS14-16
• 1.2.4 SN與AS16-17
• 1.2.5 ox-DL與AS17-18
• 1.3 甘油三酯18-20
• 1.3.1 三硬脂酸甘油酯18-19
• 1.3.2 三油酸甘油酯19
• 1.3.3 三亞油酸甘油酯19-20
• 1.4 相關(guān)蛋白20-25
• 1.4.1 PCNA20-23
• 1.4.2 MCP-123-24
• 1.4.3 SM-α-actin24-25
• 1.5 課題來源及研究目的25-27
• 1.5.1 課題來源25
• 1.5.2 研究目的25-26
• 1.5.3 研究內(nèi)容26-27
• 第2章 AS模型建立與甘油三酯對HUVSMC增殖的影響27-38
• 2.1 前言27
• 2.2 試劑與實驗設(shè)備27-28
• 2.2.1 試驗材料27-28
• 2.2.2 設(shè)備28
• 2.3 實驗方法28-31
• 2.3.1 細胞培養(yǎng)28-29
• 2.3.2 ox-LDL添加濃度的確定29-30
• 2.3.3 甘油三酯對細胞增殖影響30-31
• 2.3.4 細胞生長曲線的繪制31
• 2.3.5 統(tǒng)計學分析31
• 2.4 實驗結(jié)果31-36
• 2.4.1 不同濃度ox-LDL與細胞生長關(guān)系31-32
• 2.4.2 甘油三酯對HUVSMC生長的影響32-34
• 2.4.3 甘油三酯對ox-LDL誘導的平滑肌細胞增殖的作用34-35
• 2.4.4細胞生長曲線35-36
• 2.5 討論36-37
• 2.5.1 動脈粥樣硬化模型的建立36
• 2.5.2 ox-LDL對SMC增殖的影響36
• 2.5.3 不同甘油三酯對模型中SMC增殖的影響36-37
• 2.6 小結(jié)37-38
• 第3章 甘油三酯對HUVSMC脂肪酸組成和遷移的影響38-46
• 3.1 前言38-39
• 3.2 試劑與實驗設(shè)備39-40
• 3.2.1 試驗材料39
• 3.2.2 設(shè)備39-40
• 3.3 實驗方法40-41
• 3.3.1 不同甘油三酯對SMC脂肪酸組成的影響40-41
• 3.3.2 不同甘油三酯對平滑肌遷移影響41
• 3.4 結(jié)果41-44
• 3.4.1 不同甘油三酯對SMC脂肪酸組成的影響41-43
• 3.4.2 不同甘油三酯對SMC遷移的影響43-44
• 3.5 討論44-45
• 3.5.1 甘油三酯對SMC脂肪酸組成的影響44-45
• 3.5.2 甘油三酯對SMC遷移的影響45
• 3.6 小結(jié)45-46
• 第4章 甘油三酯對SMC增殖與遷移相關(guān)蛋白及基因的影響46-58
• 4.1 前言46-47
• 4.2 試劑與實驗設(shè)備47-48
• 4.2.1 試驗材料47
• 4.2.2 設(shè)備47-48
• 4.3 實驗方法48-53
• 4.3.1 Western Blotting測定相關(guān)蛋白48-50
• 4.3.2 RT-PCR測定相關(guān)基因50-53
• 4.4 實驗結(jié)果53-56
• 4.4.1 Western Blotting測定甘油三酯對SMC增殖與遷移蛋白的影響53
• 4.4.2 RT-PCR測定甘油三酯對SMC增殖與遷移相關(guān)基因的影響53-56
• 4.5 討論56-57
• 4.5.1 不同甘油三酯對PCNA蛋白表達的影響56
• 4.5.2 不同甘油三酯對MCP-1蛋白表達的影響56-57
• 4.5.3 不同甘油三酯對SM-α-actin蛋白以及基因表達的影響57
• 4.6 小結(jié)57-58
• 第5章 結(jié)論與展望58-60
• 5.1 結(jié)論58-59
• 5.1.1 甘油三脂對SMC增殖與遷移影響58
• 5.1.2 甘油三酯對SMC脂肪酸組成的影響58
• 5.1.3 甘油三酯對周期、遷移及形態(tài)相關(guān)蛋白及基因的影響58-59
• 5.2 進一步工作方向59-60
• 致謝60-61
• 參考文獻61-68
• 攻讀學位期間的研究成果68

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：1066284