本文關鍵詞：骨髓間充質干細胞培養(yǎng)條件的改良及其定向分化

  更多相關文章： 骨髓間充質干細胞 全骨髓貼壁 倍增時間 定向分化

【摘要】：目的探討建立大鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs)快速、有效的體外分離純化方法。方法全骨髓離心貼壁法分離大鼠BMSCs;分別采用同種異體血清培養(yǎng)基(同種異體血清組)、胎牛血清培養(yǎng)基(胎牛血清組)、無血清培養(yǎng)基(無血清組)培養(yǎng)BMSCs,傳代后換用胎牛血清培養(yǎng);12、24、48、72 h和5 d首次換液;繪制P3代BMSCs生長曲線;免疫熒光鑒定BMSCs CD44和vimentin的表達;誘導BMSCs的骨向、內皮向分化;茜素紅檢測鈣結節(jié)表達;免疫熒光鑒定血管內皮樣細胞CD31和v WF的表達。結果 (1)同種異體血清組及胎牛血清組細胞形態(tài)均一,生長速率相似。(2)P3代BMSCs生長曲線顯示:同種異體血清組與胎牛血清組倍增速率相似,均快于無血清組。(3)P3代BMSCs免疫熒光染色顯示:同種異體血清組與胎牛血清組CD44、vimentin表達均高于無血清組。(4)成骨誘導14 d后,茜素紅染色可見大量橘紅色鈣化結節(jié)形成。(5)內皮誘導14 d后,內皮樣細胞表面標志物CD31、v WF陽性。結論改良培養(yǎng)條件后所獲得的骨髓細胞具有間充質干細胞的表型和功能特點。
【作者單位】： 廣州醫(yī)學院荔灣醫(yī)院口腔科;廣州醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院口腔種植科;廣州醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院口腔牙體牙髓科;廣州醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院口腔修復科;
【關鍵詞】： 骨髓間充質干細胞 全骨髓貼壁 倍增時間 定向分化
【基金】：2013年度廣東省企業(yè)技術研發(fā)與升級改造專項資金項目計劃(第一批)(編號:2013B021800278) 廣州市荔灣區(qū)科技計劃項目(編號:2014126055)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs)是一群來源于骨髓組織中的非造血干細胞,在特定的條件下,具有多向分化潛能[1-3],但其在骨髓中含量極低,僅占骨髓有核細胞總數的0.001%~0.010%[4],需在體外進行分離培養(yǎng)和擴增后才能用于研究及應用。2012年10月至201

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前5條

1 王tR;吳文;李正;王小娜;;骨髓間充質干細胞向成骨細胞的定向誘導分化[J];廣東醫(yī)學;2011年03期

2 卞鐵榮;陳楓;邢宏運;唐利;;SD大鼠骨髓間充質干細胞與其乳鼠該細胞株的細胞表型鑒定比較[J];廣東醫(yī)學;2013年22期

3 黃博;張月飛;;間充質干細胞在腫瘤微環(huán)境中的作用[J];廣東醫(yī)學;2014年08期

4 賈貴清;張明鳴;楊平;程驚秋;陸燕蓉;伍曉汀;;不同分離及培養(yǎng)方法對大鼠骨髓間充質干細胞生長增殖和生物學特性的影響[J];四川大學學報(醫(yī)學版);2009年04期

5 周新伏;曠文勇;羅自勉;張廣森;符桑;劉利華;唐鐵鋼;李佳元;陳紹芳;;臍帶血清體外培養(yǎng)臨床應用人骨髓間充質干細胞的方法研究[J];臨床血液學雜志;2008年05期

【共引文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 雷曉宇;周新伏;;骨髓間充質干細胞的生物學特性以及在血液系統(tǒng)疾病中的應用[J];臨床醫(yī)學;2011年01期

2 黃望香;曠文勇;李睿娟;;臍帶血血清培養(yǎng)臍帶血間充質干細胞對臍帶血CD34~+細胞的體外擴增作用[J];廣東醫(yī)學;2012年07期

3 陽玉群;莫雪安;農偉東;楊龍秀;孔德燕;張?zhí)i;劉金萍;;全骨髓貼壁改良培養(yǎng)法體外分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質干細胞[J];廣西醫(yī)科大學學報;2013年02期

4 董晨輝;王子明;杜全印;王雨;黃愷;王愛民;;金黃色葡萄球菌腸毒素C_2對兔骨髓間充質干細胞增殖和成骨分化的實驗研究[J];創(chuàng)傷外科雜志;2013年05期

5 李成華;李蓓;金巖;;間充質干細胞——調節(jié)免疫的新寵[J];醫(yī)學爭鳴;2014年01期

6 劉真真;李海洋;鄧彥飛;喬樹葉;朱鵬;楊素芳;石德順;;家畜脂肪干細胞研究進展[J];基因組學與應用生物學;2014年01期

7 袁茵;陳丹亮;陳璇;邵紅偉;黃樹林;;人臍帶間充質干細胞通過激活Notch信號通路促進白血病細胞株Jurkat的體外存活(英文)[J];南方醫(yī)科大學學報;2014年04期

8 唐宇欣;金晗;史冊;朱陽;王丹丹;王賀;林崇韜;孫宏晨;;脂肪干細胞及其向成骨細胞分化的調控機制[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2014年04期

9 于波;趙勁民;蘇偉;李曉峰;許國杰;;不同周齡大鼠骨髓間充質干細胞體外培養(yǎng)的對比研究[J];廣西醫(yī)科大學學報;2014年02期

10 陳林;張坤;董偉;楊珂;艾輝;陳祿華;;臍帶間充質干細胞無血清和含胎牛血清培養(yǎng)體系比較[J];重慶理工大學學報(自然科學);2014年09期

中國重要會議論文全文數據庫 前2條

1 唐華;畢文浩;艾威;李德勝;潘光輝;史俊文;劉薇;黃威;肖東;顧為望;;西藏小型豬骨髓間充質干細胞(BMSCs)分離培養(yǎng)及慢病毒載體介導EGFP標記MSCs[A];第十屆中國實驗動物科學年會論文集[C];2012年

2 屈宗斌;靳嘉昌;唐剛健;肖楊;;自體骨髓干細胞移植治療四肢陳舊性骨折[A];2014年12月《臨床心身疾病》雜志學術研討會綜合刊[C];2014年

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 李曉峰;芒果苷對大鼠骨髓間充質干細胞缺氧損傷的保護機制研究[D];廣西醫(yī)科大學;2011年

2 趙科研;骨髓間充質干細胞移植對大鼠模型肺動脈高壓的治療作用及對ET-1表達影響的實驗研究[D];吉林大學;2011年

3 蔡磊;帶血管蒂的組織工程骨構建及修復骨缺損的動物實驗研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

4 向釗;榮昌豬BMMNCs誘導分化及其BPI表達與抗病性的研究[D];西南大學;2011年

5 房林;骨髓間充質干細胞移植促進皮膚創(chuàng)傷愈合的實驗研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2010年

6 郝彥琴;骨髓間充質干細胞移植對急性肝衰竭大鼠腸源性內毒素血癥的治療作用及機制研究[D];山西醫(yī)科大學;2010年

7 祝蔭;慢病毒載體介導NK4基因修飾骨髓間充質干細胞靶向治療胃癌的實驗研究[D];南昌大學;2010年

8 孫敬和;心肌樣微環(huán)境下黃芪甲苷聯合5-氮胞苷誘導MSCs分化為心肌樣細胞[D];廣州中醫(yī)藥大學;2012年

9 黃恩毅;生長激素在BMP9介導的間充質干細胞向成骨分化中的作用[D];重慶大學;2012年

10 閆策;表面微納米圖案化技術及細胞黏附臨界面積等問題的研究[D];復旦大學;2012年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 徐靜;Wistar大鼠骨髓間充質干細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[D];吉林大學;2011年

2 梅香;一氧化氮合酶干預對大鼠梗死心肌內移植細胞存活性及心功能的影響[D];第二軍醫(yī)大學;2011年

3 李朝中;不同途徑移植骨髓間充質干細胞至心肌梗死大鼠的實驗研究[D];昆明醫(yī)學院;2011年

4 林若飛;骨髓間充質干細胞治療急性放射性腸道損傷的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學;2011年

5 譚亮;SD大鼠脊髓損傷后早期注射BMSCs對小膠質細胞影響的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學;2011年

6 何鳳璞;大鼠骨髓間充質干細胞體外誘導分化為血管平滑肌樣細胞的實驗研究[D];南京醫(yī)科大學;2011年

7 翟旭;大鼠牙髓干細胞與骨髓間充質干細胞分化成骨樣細胞能力對比研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

8 王金華;骨髓間充質干細胞移植治療老年性癡呆大鼠的實驗研究[D];天津醫(yī)科大學;2011年

9 周信;針藥結合誘導骨髓間充質干細胞定向分化為軟骨細胞的實驗研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2011年

10 許寶滿;五種中藥對大鼠骨髓間充質干細胞體外增殖活性影響的實驗研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2011年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 杜俊杰,羅卓荊,胡蘊玉,李志創(chuàng),呂榮;rhBMP-2在體內誘導成骨中I,II型膠原及堿性磷酸酶的表達[J];第四軍醫(yī)大學學報;2001年11期

2 江遜,崔鵬程,陳文弦,趙大慶,張殿忠,張志培;人骨髓間充質干細胞體外培養(yǎng)及生物特性的觀察[J];第四軍醫(yī)大學學報;2003年04期

3 杜連心;魏秋彩;呂雪芳;;兔自體血清與胎牛血清培養(yǎng)兔角膜緣細胞的比較性研究[J];河南醫(yī)學研究;2008年03期

4 周新伏,陳孟倫,羅自勉,曾紀愛;成分臍血輸注在血液腫瘤化療中的應用[J];醫(yī)學臨床研究;2003年06期

5 王寒;趙根尚;周玉陽;高峰;張正升;何攀;李明;;SD大鼠骨髓間充質干細胞分離提純及鑒定[J];中華實用診斷與治療雜志;2012年05期

6 張本斯,王凡,鄧力,頓愛社,董立華,李健,羊惠君;大鼠骨髓間充質干細胞的分離培養(yǎng)及表型和功能特點[J];四川大學學報(醫(yī)學版);2003年04期

7 段瑞平;吳凌;林云鋒;劉磊;湯煒;田衛(wèi)東;;不同成骨誘導作用下骨髓間充質干細胞的基因表達模式[J];四川大學學報(醫(yī)學版);2006年06期

8 姜爾烈,周征,黃勇,劉慶國,楊棟林,王玫,翟文靜,馮四洲,韓明哲;骨髓間充質干細胞的黏附分子表達及其對臍血造血干細胞擴增的支持作用[J];臨床血液學雜志;2005年05期

9 王海蓮;鞠秀麗;李棟;侯懷水;時慶;孫念政;沈柏均;;骨髓間充質干細胞體外誘導和端粒酶活性的研究[J];臨床血液學雜志;2007年06期

10 王淑紅;張雄;張勁娥;黃遠亮;;新型多孔磷酸鈣支架對骨髓間充質干細胞生物學行為的影響[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2012年05期

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 鞏江;王征;倪士峰;吳智宇;吳一飛;趙桂仿;;干細胞培養(yǎng)定向分化的研究進展[J];畜牧與飼料科學;2009年01期

2 趙安莎;;仿生膜上納米脂筏樣生物器件構建及其在細胞分子識別、定向分化中的應用[J];學術動態(tài);2011年04期

3 何丁文;徐艷杰;廖新根;殷明;;自組裝多肽納米纖維支架誘導骨髓間充質干細胞定向分化[J];中國生物工程雜志;2012年02期

4 陳桃;齊暉;李富榮;;轉錄因子對干細胞高效定向分化為β細胞的作用[J];生命科學;2012年02期

5 孫麗莉;心肌干細胞的定向分化和調控[J];國外醫(yī)學(生理、病理科學與臨床分冊);2004年01期

6 高波,柳川,王會信;骨髓間質干細胞定向分化的研究進展[J];生理科學進展;2000年03期

7 方鑫;王芙蓉;姜亞平;;影響神經干細胞定向分化因素的研究進展[J];臨床神經病學雜志;2008年01期

8 許應星;吳巖;肖魯偉;;骨髓間充質干細胞定向分化的經典WNT機制[J];生命科學;2010年04期

9 王啟偉,樸英杰;BMP12誘導恒河猴骨髓間充質干細胞定向分化為腱細胞[J];中國臨床解剖學雜志;2004年03期

10 付元山;王濱;汪洋;劉才棟;沈馨亞;;混合培養(yǎng)對O2A祖細胞定向分化的影響[J];中國臨床神經科學;2005年04期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 華松;武浩;張涌;;骨髓間充質干細胞定向分化的研究進展[A];全國首屆動物生物技術學術研討會論文集[C];2004年

2 葉能勝;馮雪;張榮利;羅國安;王義明;;骨髓間充質干細胞體外定向分化為心肌細胞的蛋白質組學研究[A];中國蛋白質組學第二屆學術大會論文摘要論文集[C];2004年

3 洪天配;;微小RNA在胰島β細胞定向分化中的調控作用及其潛在機制[A];中華醫(yī)學會第十二次全國內分泌學學術會議論文匯編[C];2013年

4 李剛;;兔骨髓間充質干細胞的分離、培養(yǎng)與定向分化[A];寧夏醫(yī)學會第八屆骨科學術會議論文匯編[C];2013年

5 許敏華;歐麗麗;朱丹雁;樓宜嘉;俞永平;;組合庫內六個化合物促胚胎干細胞定向分化為神經細胞活性篩選[A];中國藥學會應用藥理專業(yè)委員會第三屆學術會議、中國藥理學會制藥工業(yè)專業(yè)委員會第十三屆學術會議暨2008生物醫(yī)藥學術論壇論文匯編[C];2008年

6 朱靜;馮川;李莉;鄧兵;張曉萍;;干擾組蛋白乙�；l(fā)MSCs定向分化特定蛋白的異常表達[A];遺傳學進步與人口健康高峰論壇論文集[C];2007年

7 李莉;岳鳳鳴;李航;趙秀軍;蔣彥;高福祿;;人誘導性多能干細胞定向分化為視細胞的實驗研究[A];中國解剖學會2013年年會論文文摘匯編[C];2013年

8 謝松濤;陳璧;陶克;;人臍血來源內皮祖細胞的純化、鑒定與定向分化的初步研究[A];第六屆全國燒傷救治專題研討會論文匯編[C];2009年

9 謝松濤;陳璧;陶克;;人臍血來源內皮細胞的純化、鑒定與定向分化的初步研究[A];第四屆全國燒傷救治專題研討會燒傷感染救治新進展論文匯編[C];2006年

10 孫雪榮;葛堅;段山;宋革;江儒章;段永恒;劉炳乾;;視網膜前體細胞誘導骨髓間充質干細胞定向分化的研究[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

中國重要報紙全文數據庫 前2條

1 白毅;浙大學者發(fā)現干細胞體外定向分化藥物調控關鍵靶點[N];中國醫(yī)藥報;2007年

2 張中橋;西京醫(yī)院一項研究闡明白血病發(fā)病機制[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

中國博士學位論文全文數據庫 前2條

1 王啟偉;恒河猴骨髓間充質干細胞的定向分化及其機制[D];第一軍醫(yī)大學;2004年

2 姜敏;皮膚毛囊神經嵴干細胞的黑素定向分化和衰老機制研究[D];復旦大學;2011年

中國碩士學位論文全文數據庫 前8條

1 傅杰;骨髓間充質干細胞定向分化心臟瓣膜構成細胞的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

2 顏艷靈;人胚骨髓間充質干細胞的增殖、定向分化及轉bFGF基因的研究[D];暨南大學;2004年

3 杜U，

本文編號：1063411