骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)條件的改良及其定向分化
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【摘要】:目的探討建立大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)快速、有效的體外分離純化方法。方法全骨髓離心貼壁法分離大鼠BMSCs;分別采用同種異體血清培養(yǎng)基(同種異體血清組)、胎牛血清培養(yǎng)基(胎牛血清組)、無血清培養(yǎng)基(無血清組)培養(yǎng)BMSCs,傳代后換用胎牛血清培養(yǎng);12、24、48、72 h和5 d首次換液;繪制P3代BMSCs生長曲線;免疫熒光鑒定BMSCs CD44和vimentin的表達(dá);誘導(dǎo)BMSCs的骨向、內(nèi)皮向分化;茜素紅檢測鈣結(jié)節(jié)表達(dá);免疫熒光鑒定血管內(nèi)皮樣細(xì)胞CD31和v WF的表達(dá)。結(jié)果 (1)同種異體血清組及胎牛血清組細(xì)胞形態(tài)均一,生長速率相似。(2)P3代BMSCs生長曲線顯示:同種異體血清組與胎牛血清組倍增速率相似,均快于無血清組。(3)P3代BMSCs免疫熒光染色顯示:同種異體血清組與胎牛血清組CD44、vimentin表達(dá)均高于無血清組。(4)成骨誘導(dǎo)14 d后,茜素紅染色可見大量橘紅色鈣化結(jié)節(jié)形成。(5)內(nèi)皮誘導(dǎo)14 d后,內(nèi)皮樣細(xì)胞表面標(biāo)志物CD31、v WF陽性。結(jié)論改良培養(yǎng)條件后所獲得的骨髓細(xì)胞具有間充質(zhì)干細(xì)胞的表型和功能特點。
【作者單位】: 廣州醫(yī)學(xué)院荔灣醫(yī)院口腔科;廣州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔種植科;廣州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔牙體牙髓科;廣州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔修復(fù)科;
【關(guān)鍵詞】: 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 全骨髓貼壁 倍增時間 定向分化
【基金】:2013年度廣東省企業(yè)技術(shù)研發(fā)與升級改造專項資金項目計劃(第一批)(編號:2013B021800278) 廣州市荔灣區(qū)科技計劃項目(編號:2014126055)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs)是一群來源于骨髓組織中的非造血干細(xì)胞,在特定的條件下,具有多向分化潛能[1-3],但其在骨髓中含量極低,僅占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%~0.010%[4],需在體外進行分離培養(yǎng)和擴增后才能用于研究及應(yīng)用。2012年10月至201
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本文編號:1063411
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