本文關(guān)鍵詞：狂犬病病毒CTN-181減毒株在豚鼠頜下腺的繁殖動(dòng)態(tài)及其低毒力克隆株的篩選研究

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【摘要】：目的了解狂犬病病毒減毒株CTN-181在豚鼠頜下腺的繁殖動(dòng)態(tài)并獲得毒力更低的病毒純化克隆株。方法將CTN-181經(jīng)剛離乳豚鼠頸部皮下注射,分別于1、2、3和4d取頜下腺分離狂犬病病毒,測(cè)定各天次頜下腺內(nèi)的病毒滴度。用滴度高的病毒液進(jìn)行下一次豚鼠頜下腺傳代,連續(xù)傳3代。將第3代頜下腺傳代的病毒液在BHK21細(xì)胞上進(jìn)行空斑試驗(yàn),挑選單個(gè)病毒克隆,以3周齡小鼠腦內(nèi)接種測(cè)病毒毒力。篩選對(duì)小鼠不致病的克隆株進(jìn)一步測(cè)定其對(duì)乳鼠的腦內(nèi)毒力,并以乳鼠腦內(nèi)傳代和豚鼠頜下腺傳代檢測(cè)其遺傳穩(wěn)定性。結(jié)果 CTN-181在豚鼠頜下腺能短暫輕度繁殖,通過頜下腺傳代后病毒毒力明顯有回升。獲得19個(gè)病毒克隆,不同克隆病毒的毒力不同,為0~3.16lg LD50;3株腦內(nèi)無致病力的克隆株對(duì)乳鼠的毒力亦有減弱;乳鼠腦內(nèi)和頜下腺回傳后毒力無回升返祖,即傳代后的病毒對(duì)小鼠均無致病力。結(jié)論CTN-181母株對(duì)3周齡小鼠仍存在低水平毒力,經(jīng)豚鼠頜下腺傳代后毒力十分不穩(wěn)定。篩選到的3株克隆病毒較其母株的毒力更低,遺傳穩(wěn)定性更高,更適合作為狂犬病獸用口服疫苗候選株。
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院(衛(wèi)生部生物技術(shù)產(chǎn)品檢定方法及其標(biāo)準(zhǔn)化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室);四川省食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)院;
【關(guān)鍵詞】： 狂犬病病毒減毒株 頜下腺傳代 空斑純化
【分類號(hào)】：R373.33
【正文快照】： 20世紀(jì)70年代以來,狂犬病減毒活疫苗的研究以及在野生動(dòng)物口服免疫的預(yù)防應(yīng)用上取得了令人矚目的成績,在西歐、中歐、加拿大和美國大部分地區(qū)應(yīng)用減毒活疫苗通過誘餌投放的方式口服免疫野生動(dòng)物,已成功消除當(dāng)?shù)氐暮袢〔⑦_(dá)到減少和控制人間狂犬病的效果[1-4]。同時(shí),世界衛(wèi)

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