發(fā)布時間：2017-10-18 12:13

  本文關鍵詞：狂犬病病毒CTN-181減毒株在豚鼠頜下腺的繁殖動態(tài)及其低毒力克隆株的篩選研究

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【摘要】：目的了解狂犬病病毒減毒株CTN-181在豚鼠頜下腺的繁殖動態(tài)并獲得毒力更低的病毒純化克隆株。方法將CTN-181經(jīng)剛離乳豚鼠頸部皮下注射,分別于1、2、3和4d取頜下腺分離狂犬病病毒,測定各天次頜下腺內(nèi)的病毒滴度。用滴度高的病毒液進行下一次豚鼠頜下腺傳代,連續(xù)傳3代。將第3代頜下腺傳代的病毒液在BHK21細胞上進行空斑試驗,挑選單個病毒克隆,以3周齡小鼠腦內(nèi)接種測病毒毒力。篩選對小鼠不致病的克隆株進一步測定其對乳鼠的腦內(nèi)毒力,并以乳鼠腦內(nèi)傳代和豚鼠頜下腺傳代檢測其遺傳穩(wěn)定性。結(jié)果 CTN-181在豚鼠頜下腺能短暫輕度繁殖,通過頜下腺傳代后病毒毒力明顯有回升。獲得19個病毒克隆,不同克隆病毒的毒力不同,為0~3.16lg LD50;3株腦內(nèi)無致病力的克隆株對乳鼠的毒力亦有減弱;乳鼠腦內(nèi)和頜下腺回傳后毒力無回升返祖,即傳代后的病毒對小鼠均無致病力。結(jié)論CTN-181母株對3周齡小鼠仍存在低水平毒力,經(jīng)豚鼠頜下腺傳代后毒力十分不穩(wěn)定。篩選到的3株克隆病毒較其母株的毒力更低,遺傳穩(wěn)定性更高,更適合作為狂犬病獸用口服疫苗候選株。
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院(衛(wèi)生部生物技術產(chǎn)品檢定方法及其標準化重點實驗室);四川省食品藥品檢驗檢測院;
【關鍵詞】： 狂犬病病毒減毒株 頜下腺傳代 空斑純化
【分類號】：R373.33
【正文快照】： 20世紀70年代以來,狂犬病減毒活疫苗的研究以及在野生動物口服免疫的預防應用上取得了令人矚目的成績,在西歐、中歐、加拿大和美國大部分地區(qū)應用減毒活疫苗通過誘餌投放的方式口服免疫野生動物,已成功消除當?shù)氐暮袢〔⑦_到減少和控制人間狂犬病的效果[1-4]。同時,世界衛(wèi)

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