發(fā)布時(shí)間：2017-10-14 14:24

  本文關(guān)鍵詞：河南豬流感病毒H3N2分離株NP基因表達(dá)及抗原性分析

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【摘要】：目的表達(dá)豬流感病毒(swine influenza virus,SIV)H3N2分離株NP基因,獲得具有良好抗原性的NP蛋白。方法 PCR擴(kuò)增豬流感病毒A/swine/Henan/2/2008(H3N2)NP基因,經(jīng)EcoR I和Xho I雙酶切后插入p ET32a(+)載體,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌Rosset(DE3)菌株;PCR、EcoR I和Xho I雙酶切及DNA測(cè)序鑒定重組質(zhì)粒p ET32a-NP;IPTG誘導(dǎo),表達(dá)、純化NP并免疫家兔制備免疫血清,SDS-PAGE、WB測(cè)其反應(yīng)原性;同時(shí)構(gòu)建pc DNA3.1-NP并轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,免疫熒光檢測(cè)其免疫源性。結(jié)果成功構(gòu)建重組載體p ET32a-NP和pc DNA3.1-NP,SDS-PAGE和WB顯示融合蛋白約80 k D,能與感染SIV的豬血清特異性反應(yīng),并且純化蛋白制備的多克隆血清能識(shí)別293T細(xì)胞中表達(dá)的NP蛋白。結(jié)論正確表達(dá)SIV H3N2 NP蛋白,并有良好的抗原性,為研究豬流感病毒NP診斷抗原和亞單位疫苗奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 河南科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;動(dòng)物疫病和殘留物防控河南省高校工程技術(shù)研究中心;滑縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所;
【關(guān)鍵詞】： 豬流感病毒 NP基因 表達(dá) 抗原性
【基金】：河南省科技計(jì)劃項(xiàng)目基礎(chǔ)與前沿技術(shù)(142300410138)
【分類號(hào)】：R373.13
【正文快照】： 豬流感病毒(swine influenza virus,SIV)不僅引起病豬呼吸困難及其他病毒和細(xì)菌繼發(fā)感染,給養(yǎng)豬業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失,而且嚴(yán)重威脅人類健康[1]。2009年H1N1豬流感病毒引發(fā)的流感疫情[2]再次警示人們控制豬流感即是從源頭上控制人流感。而有效的診斷和預(yù)防是控制豬流感的前提。

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1031578