應(yīng)用變性高效液相色譜法對(duì)蜱傳立克次體的鑒定和分型
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【摘要】:目的建立PCR-DHPLC檢測(cè)法,對(duì)5種蜱傳人類(lèi)致病性立克次體進(jìn)行準(zhǔn)確、快速的分型檢測(cè)。方法針對(duì)蜱傳5種致病性立克次體的Osp A為靶基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增,本研究所用目的片段為合成片段,連接于18-T載體,選用1對(duì)特異性通用引物擴(kuò)增此片段。擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度分別為513 bp、533 bp、533 bp、533 bp、533 bp。應(yīng)用42株菌株進(jìn)行特異性實(shí)驗(yàn),建立PCR-DHPLC反應(yīng)體系,并將此方法應(yīng)用到實(shí)際樣本檢測(cè)。結(jié)果應(yīng)用PCR-DHPLC技術(shù)可很好的區(qū)分5種致病菌,在核酸水平上達(dá)0.01 pg/μl。實(shí)際樣本的峰型與標(biāo)準(zhǔn)峰型有較好對(duì)應(yīng)性。結(jié)論 PCR-DHPLC法在實(shí)際樣本檢測(cè)中具有靈敏性和特異性。
【作者單位】: 吉林出入境檢驗(yàn)檢疫局;吉林大學(xué);
【關(guān)鍵詞】: 南非立克次體 西伯利亞立克次體 立氏立克次體 康氏立克次體 黑龍江立克次體 變性高效液相色譜
【基金】:吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(201105024)
【分類(lèi)號(hào)】:R376
【正文快照】: 立克次氏體(Rickettsia)為革蘭陰性菌,主要在細(xì)胞內(nèi)繁殖,是一類(lèi)專(zhuān)性寄生于真核細(xì)胞內(nèi)介于細(xì)菌與病毒之間而接近于細(xì)菌的一類(lèi)原核生物,主要寄生于節(jié)肢動(dòng)物,通過(guò)蜱媒傳播引起人畜共患疾病,引起斑疹傷寒、戰(zhàn)壕熱等疾病,在世界范圍分布。由于立克次體病的多樣性和復(fù)雜性,呈現(xiàn)了臨
【相似文獻(xiàn)】
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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
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,本文編號(hào):1020758
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