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應(yīng)用變性高效液相色譜法對(duì)蜱傳立克次體的鑒定和分型

發(fā)布時(shí)間:2017-10-12 20:28

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【摘要】:目的建立PCR-DHPLC檢測(cè)法,對(duì)5種蜱傳人類(lèi)致病性立克次體進(jìn)行準(zhǔn)確、快速的分型檢測(cè)。方法針對(duì)蜱傳5種致病性立克次體的Osp A為靶基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增,本研究所用目的片段為合成片段,連接于18-T載體,選用1對(duì)特異性通用引物擴(kuò)增此片段。擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度分別為513 bp、533 bp、533 bp、533 bp、533 bp。應(yīng)用42株菌株進(jìn)行特異性實(shí)驗(yàn),建立PCR-DHPLC反應(yīng)體系,并將此方法應(yīng)用到實(shí)際樣本檢測(cè)。結(jié)果應(yīng)用PCR-DHPLC技術(shù)可很好的區(qū)分5種致病菌,在核酸水平上達(dá)0.01 pg/μl。實(shí)際樣本的峰型與標(biāo)準(zhǔn)峰型有較好對(duì)應(yīng)性。結(jié)論 PCR-DHPLC法在實(shí)際樣本檢測(cè)中具有靈敏性和特異性。
【作者單位】: 吉林出入境檢驗(yàn)檢疫局;吉林大學(xué);
【關(guān)鍵詞】南非立克次體 西伯利亞立克次體 立氏立克次體 康氏立克次體 黑龍江立克次體 變性高效液相色譜
【基金】:吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(201105024)
【分類(lèi)號(hào)】:R376
【正文快照】: 立克次氏體(Rickettsia)為革蘭陰性菌,主要在細(xì)胞內(nèi)繁殖,是一類(lèi)專(zhuān)性寄生于真核細(xì)胞內(nèi)介于細(xì)菌與病毒之間而接近于細(xì)菌的一類(lèi)原核生物,主要寄生于節(jié)肢動(dòng)物,通過(guò)蜱媒傳播引起人畜共患疾病,引起斑疹傷寒、戰(zhàn)壕熱等疾病,在世界范圍分布。由于立克次體病的多樣性和復(fù)雜性,呈現(xiàn)了臨

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 焦艷梅,溫博海,牛東升,高寧,余躍飛,陳梅玲,邱玲;立氏立克次體外膜蛋白B基因片段的克隆與表達(dá)[J];中國(guó)人獸共患病雜志;2004年10期

2 Walker;王家睦;;立氏立克次體及康氏立克次體的抗原[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1984年03期

3 吳德平;王穎;王錫樂(lè);陳梅玲;溫博海;;立氏立克次體蛋白抗原基因的表達(dá)和重組蛋白抗原的免疫印跡分析[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2009年10期

4 陳敏,范明遠(yuǎn);斑點(diǎn)熱群立克次體外膜主蛋白的研究進(jìn)展[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1997年01期

5 吳德平;焦留宏;王加林;楊文娟;陳金拳;王猛;王穎;;立氏立克次體外膜蛋白H基因片段的克隆表達(dá)與免疫原性分析[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2011年06期

6 張永國(guó),陳香蕊,于強(qiáng),程聰,陳萬(wàn)榮;黑龍江立克次體McAb抗立氏立克次體感染豚鼠的研究[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;1997年05期

7 崔紅,陳霞萍,陳梅玲,郭兆彪,王津,翟俊輝,楊瑞馥;16SrDNA生物芯片微陣列方法檢測(cè)立克次體的初步研究[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2003年03期

8 俞樹(shù)榮;;立克次體分類(lèi)研究的進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1998年06期

9 ;[J];;年期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 牛東升;立氏立克次體外膜蛋白B基因的應(yīng)用研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年

2 龔文平;立氏立克次體主要表面蛋白鑒定及其免疫保護(hù)性研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 吳德平;立氏立克次體主要抗原的免疫原性研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2010年

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本文編號(hào):1020758

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