本文關(guān)鍵詞：m icroRNA-449b對(duì)高遷移率族蛋白B1介導(dǎo)樹突狀細(xì)胞功能的影響

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【摘要】：目的:探討mi R-449b在高遷移率族蛋白B1(HMGB1)刺激樹突狀細(xì)胞(DC)中的變化及其對(duì)DC免疫功能的影響。方法:分別以10、100、1 000 ng/ml劑量的HMGB1刺激小鼠脾臟來源的CD11c+DC,于48后檢測DC表面分子CD80、CD86、MHC-II及細(xì)胞內(nèi)mi R-449b改變;流式細(xì)胞儀分析不同劑量HMGB1刺激對(duì)DC凋亡的影響。DC轉(zhuǎn)染mi R-449b模擬物(mi R-449b)、抑制物(In-mi R-449b)及相應(yīng)對(duì)照(mi R-NC、In-mi RNC)后,HMGB1(100 ng/ml)刺激48 h收取細(xì)胞,檢測DC表面分子、凋亡改變以及與T細(xì)胞混合培養(yǎng)后T細(xì)胞增殖、分化功能的變化。結(jié)果:HMGB1刺激DC后,其表面分子隨著劑量的增加表達(dá)上調(diào),其中以100 ng/ml組上調(diào)最為明顯,而大劑量(1 000 ng/ml)時(shí)表達(dá)有所下調(diào);mi R-449b在48 h 100及1 000 ng/ml HMBG1組表達(dá)明顯上調(diào)(P0.05);隨著HMGB1劑量的增加,DC在48 h凋亡逐漸增加(P0.05)。轉(zhuǎn)染mi R-449b可上調(diào)其在細(xì)胞內(nèi)表達(dá),而抑制物可抑制其表達(dá);上調(diào)mi R-449b后HMGB1(100 ng/ml)刺激48 h DC表面分子CD86表達(dá)顯著上調(diào)(P0.05)、凋亡增加(P0.01)、對(duì)T細(xì)胞的共刺激增殖效應(yīng)減弱、混合性淋巴細(xì)胞反應(yīng)中IL-4水平增多(P0.01)、IFN-γ水平下降(P0.05)。結(jié)論:mi R-449b可負(fù)性調(diào)控HMGB1介導(dǎo)DC免疫功能及促進(jìn)其凋亡,進(jìn)而在機(jī)體免疫反應(yīng)障礙過程中發(fā)揮調(diào)控作用。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院急診醫(yī)學(xué)科;解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院全軍創(chuàng)傷修復(fù)與組織再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室暨皮膚損傷修復(fù)與組織再生北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： miR-b 樹突狀細(xì)胞 高遷移率族蛋白 B 免疫功能
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81130035,81372054,81501664) 國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2012CB518102)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 程(上海)股份有限公司;SYBR Green熒光定量試劑盒購自美國AB公司;CCK8檢測試劑盒購自美國Sigma公司;小鼠IFN-γ、IL-4 ELISA試劑盒購自依科賽生物科技(太倉)有限公司。1.2 HMGB1對(duì)DC表面分子表達(dá)、DC凋亡及mi RNA-449b表達(dá)的影響1.2.1小鼠脾臟來源CD11c+DC的提取頸椎脫臼法處

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