本文關(guān)鍵詞：長鏈基因間非編碼RNA-p21對乏氧腫瘤細胞放射敏感性的影響和機制研究

  更多相關(guān)文章： LincRNA-p21 乏氧 周期凋亡 放射敏感性 自噬

【摘要】：目的:本研究通過建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染敲低長鏈基因間非編碼RNA-p21(lincRNA-p21)的細胞株,探討敲低lincRNA-p21對乏氧腫瘤細胞放射敏感性的影響及其機制。方法:實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測人肝癌細胞SMMC7721和腦膠質(zhì)瘤細胞U251MG經(jīng)不同劑量X射線照射和乏氧(1%O2)培養(yǎng)不同時間后lincRNA-p21的表達。構(gòu)建含lincRNA-p21 shRNA慢病毒載體,經(jīng)慢病毒轉(zhuǎn)染建立穩(wěn)定敲低lincRNA-p21的SMMC7721和U251MG細胞株。MTT實驗檢測細胞增殖,流式細胞術(shù)檢測乏氧和常氧腫瘤細胞周期和凋亡,劃痕實驗檢測細胞遷移,克隆形成實驗檢測腫瘤細胞放射敏感性,MDC染色法和Western blot檢測細胞自噬。結(jié)果:SMMC7721和U251MG細胞在2、4和6 Gy X射線照射后,lincRNA-p21表達隨照射劑量增加逐漸升高。乏氧(1%O2)培養(yǎng)24和48 h,lincRNA-p21表達隨培養(yǎng)時間遞增。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染lincRNA-p21 shRNA有效下調(diào)乏氧腫瘤細胞中l(wèi)incRNA-p21表達。乏氧(1%O2)培養(yǎng)48 h,敲低lincRNA-p21細胞SMMC7721和U251MG發(fā)生G2/M期阻滯,細胞凋亡明顯增加,抑制細胞增殖和遷移。相比較而言,常氧條件下敲低lincRNA-p21對人肝癌細胞和膠質(zhì)瘤細胞增殖、周期、凋亡和遷移沒有明顯改變。敲低lincRNA-p21使乏氧腫瘤細胞中HIF-1α經(jīng)泛素-蛋白酶體途徑降解,GLUT1蛋白含量減少,并通過調(diào)控HIF-1/Akt/mTOR/P70通路抑制細胞自噬,提高乏氧腫瘤細胞放射敏感性,放射增敏比(SER)約為1.23、1.31。而常氧條件下敲低lincRNA-p21不改變腫瘤細胞放射敏感性。過表達HIF-1α增加了敲低lincRNA-p21乏氧腫瘤細胞自噬水平,降低了細胞放射敏感性。結(jié)論:輻射損傷及乏氧均可提高SMMC7721和U251MG細胞中l(wèi)incRNA-p21表達。敲低lincRNA-p21抑制增殖和遷移,提高了乏氧腫瘤細胞放射敏感性,可能與其誘導(dǎo)乏氧腫瘤細胞周期阻滯和凋亡,引發(fā)HIF-1α蛋白降解,調(diào)控HIF-1/Akt/mTOR/P70通路抑制細胞自噬有關(guān),可以作為放療增敏靶點進一步研究。
【關(guān)鍵詞】：LincRNA-p21 乏氧 周期凋亡 放射敏感性 自噬
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R730.55;R735.7;R739.41
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 引言9-15
• 參考文獻12-15
• 第一部分 LincRNA-p21輻射與乏氧誘導(dǎo)表達特性及其穩(wěn)定敲低細胞系的建立15-28
• 材料和方法15-19
• 結(jié)果19-23
• 討論23-26
• 參考文獻26-28
• 第二部分 敲低長鏈基因間非編碼RNA-p21乏氧腫瘤細胞表型變化的研究28-43
• 材料與方法28-30
• 結(jié)果30-36
• 討論36-40
• 參考文獻40-43
• 第三部分 敲低長鏈基因間非編碼RNA-p21對乏氧腫瘤細胞放射敏感性的影響及其機制研究43-62
• 材料和方法43-47
• 結(jié)果47-57
• 討論57-60
• 參考文獻60-62
• 結(jié)論62-63
• 綜述 LincRNA-p21研究進展63-74
• 參考文獻70-74
• 中英文對照縮略語詞表74-75
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文75-76
• 致謝76-77

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 章靜波;;乏氧腫瘤細胞[J];天津醫(yī)藥腫瘤學(xué)附刊;1981年02期

2 李德華;在實體瘤治療中乏氧腫瘤細胞殺傷劑的研究進展[J];癌癥;1990年03期

3 盛元相 ,寧路江;乏氧腫瘤細胞放射治療的意義[J];國外醫(yī)學(xué)(放射醫(yī)學(xué)核醫(yī)學(xué)分冊);1992年05期

4 左曉春;李德華;;抗癌藥物對乏氧腫瘤細胞選擇性殺傷作用及其機理研究進展[J];中國腫瘤臨床;1992年03期

5 于安倫,于金明;熱療的臨床應(yīng)用進展[J];國外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊);1996年04期

6 黃曉,周玉艷,歐建文,陳朝明;隔藥餅灸對乏氧腫瘤細胞及腫瘤放療免疫系統(tǒng)的影響[J];針刺研究;2000年01期

7 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉軍葉;郭鷂;郭國禎;;腺病毒載體介導(dǎo)的腫瘤乏氧靶向性基因治療[A];科技、工程與經(jīng)濟社會協(xié)調(diào)發(fā)展——中國科協(xié)第五屆青年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2004年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 沈月明;長鏈基因間非編碼RNA-p21對乏氧腫瘤細胞放射敏感性的影響和機制研究[D];蘇州大學(xué);2016年

，

本文編號：567776