本文關鍵詞：替莫唑胺對人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞Livin、ABCG2的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：本研究旨在檢測抗凋亡基因Livin在人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞中的表達；觀察化療藥物替莫唑胺作用于人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞時的體外抗瘤效應；以膠質(zhì)瘤細胞及其干細胞為模型來研究腫瘤的耐藥程度,迄今為止,鮮見關于膠質(zhì)瘤細胞及其干細胞Livin基因抗凋亡誘導與化療耐藥的關系及其機制方面的系統(tǒng)研究報告。目的：分析化療藥物替莫唑胺干預入腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞模型,檢測藥物對細胞生存率、細胞周期變化和Livin mRNA、耐藥基因ABCG2 mRNA表達量的影響,進而從膠質(zhì)瘤細胞及干細胞理論角度揭示腫瘤耐藥的根源,豐富和發(fā)展腫瘤細胞及其干細胞理論基礎,為膠質(zhì)瘤的治療提供新的思路和方法。為攻克膠質(zhì)瘤的化療耐藥難關奠定堅實的理論和實驗基礎。方法：培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞,采用免疫磁珠法從培養(yǎng)的人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞系中分選CD133+膠質(zhì)瘤干細胞,對得到的干細胞進行培養(yǎng)及CD133+鑒定。構(gòu)建人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞模型,采用不同藥物濃度(0 μmol/l、50μmol/l、 100 μmol/l、200 μmol/l、400 μmol/l)的替莫唑胺在不同時間點(24 h、48 h、72h)干預人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞模型,對干預前后的人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞模型,采用細胞劃痕技術(shù)檢測細胞遷移能力變化、CCK-8法檢測細胞增殖趨勢變化、流式細胞儀檢測細胞周期變化、RT-PCR技術(shù)Livin、ABCG2 mRNA表達量表達規(guī)律。結(jié)果：1.相同干預時間,不同濃度的替莫唑胺干預人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞,遷移速度隨藥物濃度增加而降低(P0.05)；人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞在相同濃度的替莫唑胺干預下,遷移速度隨藥物干預時間的延長而降低(P0.05)。2.隨替莫唑胺濃度的升高和干預時間的延長,人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞的密度降低,細胞出現(xiàn)皺縮,增殖受到明顯抑制,并見散在的細胞碎片；人腦膠質(zhì)瘤TJ905干細胞出現(xiàn)裂解、萎縮。3.在相同藥物濃度干預時間的條件下,隨著培養(yǎng)液中替莫唑胺濃度的增加,TJ905細胞及其干細胞的存活率逐漸降低(P0.05)；在相同藥物濃度的條件下,人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞存活率隨替莫唑胺干預時間的延長而降低(P0.05)。人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞的存活率均低于TJ905干細胞。4.替莫唑胺干預人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞,使細胞周期停滯在G0-G1期、G2-M期；相同干預時間條件下,隨著替莫唑胺濃度增加細胞周期在G0-G1期、G2-M期所占比例越多(P0.05)；相同藥物濃度條件下,隨著干預時間的延長細胞周期在G0-G1期、G2-M期占比例越多(P0.05)；G0-G1期所占比例均高于G2-M期。5.替莫唑胺干預人腦膠質(zhì)瘤TJ905干細胞,使細胞周期停滯在G2-M期、S期,相同干預時間條件下,隨著替莫唑胺濃度增加細胞周期在G2-M期、S期所占比例越多(P0.05)；相同藥物濃度條件下,隨著干預時間的延長細胞周期在G2-M期、S期期所占比例越多(P0.05)；S期所占比例均明顯高于G2-M期。6.相同干預時間,不同濃度的替莫唑胺干預人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞,隨著藥物濃度的升高,Livin mRNA表達逐漸下降(P0.05),ABCG2 mRNA表達逐漸增高(P0.05)；相同濃度的替莫唑胺干預人腦膠質(zhì)瘤人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞,隨著干預時間的延長,Livin mRNA表達逐漸下降,ABCG2 mRNA表達逐漸升高。人腦膠質(zhì)瘤TJ90干細胞中Livin mRNA表達量低于其同源細胞,而ABCG2 mRNA表達量高于其同源細胞(P0.05)；且在不同藥物濃度的與時間的干預下人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞中Livin mRNA下降率明顯高于其干細胞、ABCG2 mRNA上升率明顯低于其干細胞。結(jié)論：替莫唑胺能有效抑制人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞中Livin mRNA的表達,誘導ABCG2 mRNA表達增高,促使人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞細胞周期停滯,促進細胞凋亡,抑制人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞增殖。人腦膠質(zhì)瘤TJ905干細胞比其同源細胞對替莫唑胺的耐藥性強；解釋了人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞的抗藥機制。
【關鍵詞】：膠質(zhì)瘤 TJ905干細胞 替莫唑胺 Livin ABCG2
【學位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-13
• 第一部分 人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞系中腦腫瘤干細胞的培養(yǎng)、分離與鑒定13-27
• 1 材料與方法13-20
• 1.1 材料13
• 1.2 主要儀器和試劑13-15
• 1.3 研究方法15-20
• 2 結(jié)果20-24
• 2.1 人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞形態(tài)變化20-23
• 2.2 人腦膠質(zhì)瘤TJ905干細胞及其誘導分化細胞免疫熒光染色鑒定23-24
• 3 討論24-27
• 第二部分 替莫唑胺對人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞增殖特性和細胞遷移能力的影響27-43
• 1 材料與方法27-34
• 1.1 研究對象27
• 1.2 主要儀器和試劑27-29
• 1.3 研究方法29-34
• 2 結(jié)果34-41
• 2.1 TMZ對人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞的形態(tài)學改變34-36
• 2.2 TMZ對人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞的生長抑制作用36-41
• 3 討論41-43
• 第三部分 替莫唑胺對人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞Livin、ABCG2的影響43-60
• 1 材料與方法43-50
• 1.1 材料43
• 1.2 主要儀器和試劑43-46
• 1.3 研究方法46-50
• 2 結(jié)果50-56
• 2.1 人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞細胞周期變化測定50-55
• 2.2 人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞Livin及ABCG2 mRNA表達量測定55-56
• 3 討論56-60
• 全文結(jié)論60-62
• 附圖62-63
• 參考文獻63-70
• 綜述：膠質(zhì)瘤干細胞研究進展70-80
• 參考文獻76-80
• 附錄80-82
• 攻讀學位期間發(fā)表論文情況82-83
• 致謝83-84
• 基金84-85
• 個人簡歷85

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 王志剛;姜彬;孟慶虎;郝曉光;丁璇;李紀森;;人腦膠質(zhì)瘤干細胞的分離和腦瘤浸潤動物模型的建立[J];山東大學學報(醫(yī)學版);2012年05期

2 Toshiyuki Ishiwata;Yoko Matsuda;Zenya Naito;;Nestin in gastrointestinal and other cancers: Effects on cells and tumor angiogenesis[J];World Journal of Gastroenterology;2011年04期

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  本文關鍵詞：替莫唑胺對人腦膠質(zhì)瘤TJ905細胞及其干細胞Livin、ABCG2的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：419046