第一部分：化療前后不同時(shí)期膠質(zhì)瘤組織中ATM的表達(dá)變化和意義 目的：探索化療前后不同時(shí)期膠質(zhì)瘤組織中ATM表達(dá)及變化規(guī)律，為確定分子靶向干預(yù)的最佳時(shí)機(jī)提供依據(jù)。 方法：利用人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞裸鼠皮下異位移植制作膠質(zhì)瘤模型，通過(guò)順鉑對(duì)荷瘤裸鼠進(jìn)行化療(5mg／kg／d連續(xù)腹腔注射4—5天)，建立膠質(zhì)瘤化療和化療后進(jìn)展模型。利用功能分類(lèi)基因芯片系統(tǒng)檢測(cè)化療前后不同時(shí)期膠質(zhì)瘤組織中ATM的表達(dá)情況,并利用實(shí)時(shí)定量RT-PCR和免疫組織化學(xué)進(jìn)行驗(yàn)證。 結(jié)果：結(jié)果發(fā)現(xiàn)ATM在化療前后不同時(shí)期表達(dá)出現(xiàn)明顯變化，其中在化療結(jié)束時(shí)表達(dá)顯著增強(qiáng)，在化療后腫瘤消退至最小時(shí)ATM表達(dá)又明顯降低，然而在膠質(zhì)瘤進(jìn)展時(shí)其表達(dá)再次明顯增強(qiáng)，定量RT-PCR和免疫組化結(jié)果與此相一致。 結(jié)論：化療前后不同時(shí)期膠質(zhì)瘤組織中ATM的表達(dá)呈動(dòng)態(tài)變化，化療結(jié)束時(shí)和腫瘤進(jìn)展期表達(dá)明顯上調(diào)。 第二部分：ATM基因慢病毒RNAi載體的構(gòu)建 目的：構(gòu)建ATM基因RNAi慢病毒載體，并檢測(cè)其體外抑制U251和U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞中ATM的表達(dá)效率，為后續(xù)進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。 方法：設(shè)計(jì)篩選ATM基因RNAi有效靶...

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖2.基因芯片檢測(cè)ATM在化療不同時(shí)期表達(dá)變化

TM相對(duì)表達(dá)明顯比化療前表達(dá)上調(diào)(27.96±14.78VS=0.00)，腫瘤靜止時(shí)比化療結(jié)束時(shí)表達(dá)下調(diào)（4.40±3.41，P展時(shí)表達(dá)再次上調(diào)（30.15±7.02,P=0.00）。但是，化療結(jié)ATM相對(duì)表達(dá)無(wú)顯著差異(27.96±14.78VS30.15±7.....

圖3.2.RT-PCR檢測(cè)化療不同時(shí)期A(yíng)TM表達(dá)

）；P=0.00(化療結(jié)束組VS腫瘤靜止組）；P=0.00(化療結(jié)束組VS腫止組VS腫瘤進(jìn)展組）圖3.1.實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)ATM擴(kuò)增曲線(xiàn)

圖3.1.實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)ATM擴(kuò)增曲線(xiàn)

定量RT-PCR檢測(cè)結(jié)果和基因芯片結(jié)果相一致，化療不同s）分別為：1.00±0.00（對(duì)照組），4.98±0.58（化療腫瘤靜止組），8.04±0.34(腫瘤進(jìn)展組)。各組間兩兩比3、圖3.1-圖3.3）表3.RT-PCR檢測(cè)化療不同時(shí)期A(yíng)TM相對(duì)表達(dá)（x....

圖4.化療不同時(shí)期A(yíng)TM表達(dá)免疫組織化學(xué)檢測(cè)（原始放大倍數(shù)400×，A對(duì)照組，B化療結(jié)束組，C腫瘤靜止組，D腫瘤進(jìn)展組）

圖3.3.GAPDH和ATM擴(kuò)增產(chǎn)物熔解曲線(xiàn)溶解度曲線(xiàn)2.4.化療不同時(shí)期A(yíng)TM表達(dá)免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果和基因芯片、RT-PCR檢測(cè)結(jié)果相一致，在化療結(jié)束時(shí)明顯比對(duì)照組表達(dá)增強(qiáng)，腫瘤靜止時(shí)表達(dá)減弱，在腫瘤進(jìn)展時(shí)表達(dá)再次上調(diào)。（見(jiàn)圖4）

本文編號(hào)：4025220