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EPI-NCSCs和OECs聯(lián)合移植對(duì)大鼠周圍神經(jīng)缺損修復(fù)的炎性/免疫調(diào)節(jié)作用

發(fā)布時(shí)間:2024-05-18 14:08
  周圍神經(jīng)的缺損修復(fù)是神經(jīng)外科一直面臨的難題,常由交通意外、工礦事故、槍支傷等引起,損傷多為挫裂或缺損,手術(shù)吻合困難,常需神經(jīng)移植修復(fù)。周圍神經(jīng)損傷后的修復(fù)效果并不理想,其原因除了與神經(jīng)組織的高度分化、周圍神經(jīng)纖維的再生速度比較緩慢、再生神經(jīng)纖維難以和靶組織形成有效突觸聯(lián)系外,周圍神經(jīng)損傷后的炎性/免疫反應(yīng)可能也有重要影響。周圍神經(jīng)的炎性/免疫調(diào)節(jié)主要包括炎性因子的分泌調(diào)控和炎性細(xì)胞的浸潤。因此,調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞因子分泌的動(dòng)態(tài)平衡和炎性細(xì)胞的活化是控制其炎性/免疫反應(yīng)的關(guān)鍵。組織工程學(xué)的發(fā)展使細(xì)胞移植技術(shù)治療神經(jīng)損傷成為近年研究的熱點(diǎn)。表皮神經(jīng)嵴干細(xì)胞(epidermal neural crest stem cell,EPI-NCSCs)能夠分泌多種神經(jīng)營養(yǎng)因子和血管生成因子等,同時(shí)自身還能分化為周圍神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞;嗅鞘細(xì)胞(olfactory ensheathing cells,OECs)能夠分泌多種神經(jīng)營養(yǎng)因子(NT-3/4/5,BDNF,GDNF,CNTF,NGF等),表達(dá)炎性蛋白(S-100,Nexin,神經(jīng)膠質(zhì)源性連接蛋白等),促進(jìn)血管生成,髓鞘的再生,...

【文章頁數(shù)】:83 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1EPI-NCSCs的原代培養(yǎng)及鑒定Fig.1PrimarycultureandidentificationofEPI-NCSCsA.細(xì)胞培養(yǎng)7d時(shí)在倒置相差顯微鏡下觀察到的細(xì)胞形態(tài)(×40);B.細(xì)胞培養(yǎng)11d時(shí)在倒置相差顯微鏡下觀察到的細(xì)胞形態(tài)(×40);C.細(xì)胞培養(yǎng)11d時(shí)SOX10免疫熒光染色的觀察(×400);D.細(xì)胞培養(yǎng)11d時(shí)Nestin免疫熒光染色的觀察(×400);E.培養(yǎng)11dGFP免疫熒光的觀察(×400);F.C、D和E疊加圖(×400).

圖1EPI-NCSCs的原代培養(yǎng)及鑒定Fig.1PrimarycultureandidentificationofEPI-NCSCsA.細(xì)胞培養(yǎng)7d時(shí)在倒置相差顯微鏡下觀察到的細(xì)胞形態(tài)(×40);B.細(xì)胞培養(yǎng)11d時(shí)在倒置相差顯微鏡下觀察到的細(xì)胞形態(tài)(×40);C.細(xì)胞培養(yǎng)11d時(shí)SOX10免疫熒光染色的觀察(×400);D.細(xì)胞培養(yǎng)11d時(shí)Nestin免疫熒光染色的觀察(×400);E.培養(yǎng)11dGFP免疫熒光的觀察(×400);F.C、D和E疊加圖(×400).

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文OECs的形態(tài)學(xué)觀察、鑒定及細(xì)胞純度的計(jì)算胞培養(yǎng)7d時(shí),細(xì)胞增殖明顯,細(xì)胞形態(tài)主要為雙極形(圖2.A)。培時(shí),細(xì)胞的形態(tài)清楚,胞體較小,細(xì)胞的突起更細(xì)長,細(xì)胞的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)2.B)。進(jìn)行NGFRp75、S-100和Hoechst33342的免疫....


圖2OECs的原代培養(yǎng)及鑒定Fig.2PrimarycultureandidentificationofOECsA.細(xì)胞培養(yǎng)7d時(shí)在倒置相差顯微鏡下觀察到的細(xì)胞形態(tài)(×40);B.細(xì)胞培養(yǎng)10d時(shí)在倒置相差顯微鏡下觀察到的細(xì)胞形態(tài)(×40);C.培養(yǎng)10dNGFRp75免疫熒光染色觀察(×200);D.培養(yǎng)10dS-100免疫熒光染色觀察(×200);E.培養(yǎng)10dHoechst33342免疫熒光染色觀察(×200);F.C、D和E疊加圖(×200).

圖2OECs的原代培養(yǎng)及鑒定Fig.2PrimarycultureandidentificationofOECsA.細(xì)胞培養(yǎng)7d時(shí)在倒置相差顯微鏡下觀察到的細(xì)胞形態(tài)(×40);B.細(xì)胞培養(yǎng)10d時(shí)在倒置相差顯微鏡下觀察到的細(xì)胞形態(tài)(×40);C.培養(yǎng)10dNGFRp75免疫熒光染色觀察(×200);D.培養(yǎng)10dS-100免疫熒光染色觀察(×200);E.培養(yǎng)10dHoechst33342免疫熒光染色觀察(×200);F.C、D和E疊加圖(×200).

第3章EPI-NCSCs和OECs的分離培養(yǎng)與鑒定ogicalobservationofEPI-NCSCsunderinvertedphasecontrastmicroscopeat11days(×40);C.fluorescencesta....


圖3PLGA導(dǎo)管(A)及電鏡下的PLGA膜結(jié)構(gòu)(B).標(biāo)尺為100μm.

圖3PLGA導(dǎo)管(A)及電鏡下的PLGA膜結(jié)構(gòu)(B).標(biāo)尺為100μm.

第4章EPI-NCSCs和OECs聯(lián)合移植對(duì)大鼠缺損坐骨神經(jīng)炎性細(xì)胞因子表達(dá)的研究.2方法2.1PLGA神經(jīng)導(dǎo)管的制備參考Sundback等[114]方法。將PLGA粉末(85:15)溶于三氯甲烷中制備成W/V)的溶液,用自制模具制得長度為15mm,內(nèi)徑為1.....


圖4手術(shù)過程Fig.4Operationprocess

圖4手術(shù)過程Fig.4Operationprocess

圖4手術(shù)過程Fig.4Operationprocess4.2.4Westernblot檢測IL-4、IL-6、IL-13和TNF-α的表達(dá)術(shù)后1、3d以及1、2、3w,每組各取3只大鼠同上法麻醉后,按照原手術(shù)入路,暴露并取出包括PLGA導(dǎo)管....



本文編號(hào):3977039

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