目的：應用化學合成的siRNA在體外抑制人腦膜瘤細胞HER2基因的表達，探討化學合成的siRNA介導的RNAi在腦膜瘤基因治療的可行性。 方法：從新鮮無菌腦膜瘤組織中提取出原代細胞進行培養(yǎng)，并人工純化、傳代。選取免疫細胞化學法鑒定為HER2蛋白表達陽性的腦膜瘤細胞，設計并合成針對HER2基因的小分子干擾RNA，選用陽離子脂質體Lipofectamine2000作為轉染試劑,同時設立空白組、空載體組、非特異性siRNA組、及HER2siRNA組；應用脂質體轉染法將siRNA導入純化的腦膜瘤細胞內，48小時后免疫細胞化學法檢測轉染后各組腦膜瘤細胞中HER2、Ki-67蛋白的表達。 結果：經EMA、Vimetin、HER2免疫細胞化學檢測，HER2陽性表達的腦膜瘤細胞原代培養(yǎng)取得成功，經過轉染后免疫細胞化學檢測顯示HER2siRNA組較空白組、空載體組、非特異性siRNA組的HER2、Ki-67蛋白表達明顯下降(P<0.01)；而空白組、空載體組、非特異性siRNA組的HER2、Ki-67蛋白表達無明顯變化(P>0.05)，采用Spearman等級相關分析,提示腦膜瘤細胞中HER...

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞簡表
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 腦膜瘤標本
        2.1.2 主要的試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 腦膜瘤細胞原代培養(yǎng)
        2.2.2 腦膜瘤細胞的傳代培養(yǎng)
        2.2.3 腦膜瘤培養(yǎng)細胞的形態(tài)學觀察
        2.2.4 腦膜瘤細胞的鑒定
        2.2.5 腦膜瘤培養(yǎng)細胞轉染
        2.2.6 Elivision^TM免疫細胞化學法檢查轉染后腦膜瘤細胞中 HER2、Ki-67蛋白的表達
        2.2.7 統(tǒng)計學分析
第3章 結果
    3.1 腦膜瘤病理組織學檢查：
    3.2 腦膜瘤原代培養(yǎng)細胞免疫組化鑒定
    3.3 腦膜瘤培養(yǎng)細胞形態(tài)學觀察
    3.4 HER2 蛋白在轉染后各組腦膜瘤細胞中的表達
    3.5 Ki-67 在轉染后各組腦膜瘤細胞中的表達
    3.6 HER2 及 Ki-67 在腦膜瘤細胞中表達的相關性
第4章 討論
第5章 結論
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號：3976844