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大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣后縫隙連接形態(tài)學(xué)檢測

發(fā)布時(shí)間:2024-04-22 03:06
  目的: 成功建立大鼠SAH后CVS模型,利用印度墨汁染色腦血管澆鑄實(shí)驗(yàn)法測定和對比腦基底動(dòng)脈直徑的改變。應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微鏡、電鏡等技術(shù)觀察大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血腦血管痙攣前后腦基底動(dòng)脈各層中Cx43和Cx40表達(dá)的改變及其縫隙連接超微結(jié)構(gòu)特征,進(jìn)一步探討大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣發(fā)生機(jī)制及其縫隙連接在其中可能發(fā)揮的作用。 方法: 1、選以成年SD大鼠(南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)部提供)作為模型動(dòng)物,采用經(jīng)枕大池二次注血建立蛛網(wǎng)膜下腔出血腦血管痙攣模型實(shí)驗(yàn)方法。 2、CVS模型檢測:采用腦血管澆鑄法測定正常組和SAH5d組大鼠基底動(dòng)脈直徑來證實(shí)腦血管痙攣(CVS)的存在。 3、本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微鏡觀測縫隙連接蛋白Cx43和Cx40在腦基底動(dòng)脈管壁各層分布情況,應(yīng)用程序圖象對將其所得數(shù)字化圖像進(jìn)行計(jì)算機(jī)中進(jìn)行處理分析。對縫隙連接蛋白Cx40和Cx43像素密度和其熒光斑面積的大小的進(jìn)行準(zhǔn)確測定,并將應(yīng)用所獲得的圖像素密度和熒光斑面積大小來代表Cx40和Cx43的數(shù)量,從而達(dá)到對其進(jìn)行準(zhǔn)確定量分析目的。 4、應(yīng)用掃描電鏡和超薄切片研究方法觀察大鼠SAH后腦血管痙攣前后縫隙連接(GJ...

【文章頁數(shù)】:46 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮略語
第1章 前言
第2章 主要試劑與儀器
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.1 購置試劑
        2.2.2 主要配置試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)思路
    3.2 實(shí)驗(yàn)分組
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 大鼠兩次蛛網(wǎng)膜下腔出血 CVS 模型的建立
        3.3.2 大鼠基底動(dòng)脈直徑的測量
        3.3.3 腦基底動(dòng)脈組織冰凍切片及免疫熒光染色
        3.3.4 常規(guī)電鏡觀測腦基底動(dòng)脈血管組織標(biāo)本的取材和固定
        3.3.5 電鏡觀察
        3.3.6 圖像分析
        3.3.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 大鼠 SAH 后 CVS 模型成功建立:
    4.2 墨汁染色后測量基底動(dòng)脈直徑變化:
    4.3 Cx43 和 Cx40 表達(dá)情況
    4.4 縫隙連接的電鏡觀察
第5章 討論
    5.1 蛛網(wǎng)膜下腔出血導(dǎo)致腦血管痙攣研究的一般情況
    5.2 縫隙連接(GJ)結(jié)構(gòu)及其功能
    5.3 大鼠經(jīng)枕大池二次 SAH 后 CVS 動(dòng)物模型
    5.4 腦基底動(dòng)脈直徑的測量
    5.5 縫隙連接蛋白 Cx43 和 Cx40 在腦血管上分布情況
    5.6 電鏡下腦基底動(dòng)脈及縫隙連接的超微結(jié)構(gòu)改變及意義
    5.7 展望
第6章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號:3961834

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