發(fā)布時(shí)間：2017-05-26 07:05

  本文關(guān)鍵詞：AMPK-mTOR信號(hào)通路對(duì)自噬的影響在小鼠局灶性腦缺血損傷中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察小鼠永久性局灶性腦缺血損傷后大腦缺血半球皮層內(nèi)單磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated potein kinase,AMPK)、哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)表達(dá)的時(shí)向變化及對(duì)自噬相關(guān)蛋白LC3和Beclin-1表達(dá)的影響。探討抑制AMPK活性在小鼠缺血性腦損傷的作用和機(jī)制。方法:選取健康成年雄性Balb/c小鼠,隨機(jī)分為假手術(shù)組、溶媒對(duì)照組和藥物干預(yù)組。溶媒對(duì)照組和藥物干預(yù)組采用線栓法制作永久性大腦中動(dòng)脈閉塞(permanent middle cerebral artery occlusion,p MCAO)模型,藥物干預(yù)組于缺血時(shí)立即腹腔注射AMPK抑制劑Compound C(20mg/kg),溶媒對(duì)照組和假手術(shù)組于同時(shí)間注射等劑量溶媒(生理鹽水+DMSO)。各組小鼠于術(shù)后3h、6h、12h和24h時(shí)間點(diǎn)取患側(cè)皮層,采用Western blot法和免疫組化法檢測(cè)AMPK、m TOR、p-AMPK、p-m TOR、LC3、Beclin-1的表達(dá)情況。以行為學(xué)癥狀、腦水腫、腦梗死體積和尼氏小體數(shù)量評(píng)價(jià)抑制AMPK活性對(duì)小鼠缺血性腦損傷的影響。結(jié)果:Western blot及免疫組化結(jié)果顯示,假手術(shù)組小鼠大腦半球皮層內(nèi)p-AMPK的表達(dá)水平較低,溶媒組小鼠p MCAO后,大腦缺血半球皮層內(nèi)p-AMPK的表達(dá)在短期內(nèi)迅速增加,3h為峰值,6h表達(dá)下降,但表達(dá)水平仍高,與假手術(shù)組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01),12h和24h持續(xù)降低;p-AMPK與LC3、Beclin-1表達(dá)趨勢(shì)一致,與p-m TOR表達(dá)趨勢(shì)相反。用Compound C處理后,Compound C組較溶媒組小鼠大腦缺血半球皮層內(nèi)p-AMPK表達(dá)水平明顯降低,同時(shí)LC3、Beclin-1表達(dá)降低,p-m TOR表達(dá)升高(p0.05);小鼠腦缺血各時(shí)間點(diǎn)尼氏小體數(shù)量缺失減輕。腦缺血24h后,藥物干預(yù)組較溶媒對(duì)照組神經(jīng)功能評(píng)分改善,腦水腫減輕,腦梗死體積顯著減小(p0.05)。結(jié)論:1、小鼠缺血性腦損傷后皮層組織自噬激活。2、小鼠缺血性腦損傷后皮層組織AMPK-m TOR信號(hào)通路激活,兩種信號(hào)分子呈相互拮抗的時(shí)向關(guān)系。3、抑制AMPK活性能夠抑制自噬。4、抑制AMPK活性對(duì)小鼠缺血性腦損傷具有保護(hù)作用,其機(jī)制可能與激活m TOR信號(hào)通路并抑制神經(jīng)元自噬性死亡有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：腦缺血 AMPK mTOR 自噬
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R743.3
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 第1章 引言10-13
• 第2章 小鼠永久性局灶性腦缺血損傷后AMPK-mTOR-自噬的激活情況13-29
• 2.1 材料和方法13-21
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料13-16
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法16-20
• 2.1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析20-21
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-27
• 2.2.1 pMCAO小鼠大腦缺血半球皮層AMPK和mTOR水平的時(shí)向變化21-23
• 2.2.2 pMCAO小鼠大腦缺血半球皮層自噬標(biāo)志蛋白LC3和Beclin-1 水平的變化23-25
• 2.2.3 免疫組化法顯示pMCAO小鼠大腦缺血半球皮層AMPK-mTOR-自噬的激活情況25-27
• 2.3 小結(jié)27-29
• 第3章 探討抑制AMPK活性在小鼠局灶性腦缺血損傷中的影響及作用機(jī)制29-36
• 3.1 材料和方法29-32
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料29
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法29-32
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析32
• 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-35
• 3.2.1 抑制AMPK活性對(duì)pMCAO小鼠神經(jīng)癥狀的影響32-33
• 3.2.2 抑制AMPK活性對(duì)pMCAO小鼠腦水腫的影響33
• 3.2.3 抑制AMPK活性對(duì)pMCAO小鼠腦梗死體積的影響33-34
• 3.2.4 抑制AMPK活性對(duì)pMCAO小鼠皮層尼氏小體數(shù)量的影響34-35
• 3.3 小結(jié)35-36
• 第4章 討論36-42
• 4.1 腦缺血后AMPK和mTOR活性的時(shí)向改變和因果關(guān)系36-38
• 4.2 AMPK和mTOR在自噬中的相反調(diào)節(jié)：38-39
• 4.3 抑制AMPK在缺血性腦損傷中的作用及機(jī)制：39-40
• 4.4 總結(jié)40-42
• 第5章 結(jié)論與展望42-43
• 5.1 結(jié)論42
• 5.2 展望42-43
• 致謝43-44
• 參考文獻(xiàn)44-47
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果47-48
• 綜述48-55
• 參考文獻(xiàn)53-55

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李娟娟;凌文華;;AMPK與肥胖[J];國(guó)際內(nèi)科學(xué)雜志;2007年11期

2 劉文倩;艾華;;AMPK與肥胖和減肥關(guān)系研究進(jìn)展[J];中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志;2008年06期

3 蔡明春,黃慶愿,高鈺琪;AMPK與能量代謝[J];重慶醫(yī)學(xué);2005年01期

4 葛斌;謝梅林;顧振綸;周文軒;郭次儀;;AMPK作為治療2型糖尿病新靶點(diǎn)的研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2008年05期

5 徐靜;劉毅;完強(qiáng);賈振華;王榮;;高糖環(huán)境對(duì)大鼠腎小球系膜細(xì)胞AMPK表達(dá)及活性的影響[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年05期

6 宮克城;丁樹(shù)哲;;AMPK與2型糖尿病的關(guān)系及其在運(yùn)動(dòng)介導(dǎo)下的研究[J];遼寧體育科技;2009年03期

7 羅招凡;李芳萍;丁鶴林;程樺;;AMPKα2基因克隆及其野生型和突變型真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年28期

8 丁曉潔;王佑民;王麗萍;;高脂飲食對(duì)大鼠肝臟組織AMPK表達(dá)及其活性的影響[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2009年06期

9 程媛;王佑民;丁曉潔;;肥胖大鼠骨骼肌AMPK表達(dá)及其與糖脂代謝的關(guān)系[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2010年02期

10 黃德強(qiáng);羅凌玉;王麗麗;羅時(shí)文;呂農(nóng)華;羅志軍;;AMPK在胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的作用[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2011年11期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 ;Co-commitment and Interplay between Akt and AMPK in the Regulation of Endothelial NO Synthase Phosphorylation by Reactive Oxygen Species[A];第九屆全國(guó)心血管藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

2 Paul M Vanhoutte;;SIRT1 and AMPK:the Seesaw Effect in Regulating Endothelial Sene-scence[A];第八屆海峽兩岸心血管科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2011年

3 李瑾;朱海波;;新結(jié)構(gòu)類(lèi)型調(diào)血脂化合物與靶蛋白AMPK分子間相互作用初步解析[A];全國(guó)第十二屆生化與分子藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

4 宋海燕;李強(qiáng);孫玉倩;張巾超;鄔艷慧;;AMPK結(jié)合蛋白的篩選及其與2型糖尿病的關(guān)系研究[A];2008內(nèi)分泌代謝性疾病系列研討會(huì)暨中青年英文論壇論文匯編[C];2008年

5 ;AMPK mediated an apoptotic response to combined effect of hypoxia stress and ER stress[A];2012全國(guó)發(fā)育生物學(xué)大會(huì)摘要集[C];2012年

6 ZHANG Jian-wei;MA Xiao-wei;DENG Rui-fen;DING Shan;GU Nan;GUO Xiao-hui;;Genetic variability in AMPKαl gene may have synergetic effect with smoking on risk of coronary artery disease in chinese type 2 diabetics[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)第十六次全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

7 姚遠(yuǎn);周京軍;裴建明;;AMPK介導(dǎo)無(wú)鈣預(yù)處理心肌保護(hù)作用[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)青年生理學(xué)工作者學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2011年

8 季樂(lè)樂(lè);Haifeng Zhang;Feng Gao;;A novel mechanism of preconditioning:Attenuating reperfusion injury through enhanced myocardial glucose uptake via insulin-stimulated Akt and AMPK activation[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第十屆全國(guó)青年生理學(xué)工作者學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2013年

9 WU Qiao;;The orphan nuclear receptor Nur77 regulates AMPK activity through LKB1 subcellular localization in glucose metabolism[A];細(xì)胞—生命的基礎(chǔ)——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)2013年全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)·武漢論文摘要集[C];2013年

10 Jia-Wei Wu;;Conserved elements in allosteric regulation of AMPK[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——專(zhuān)題報(bào)告二[C];2014年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 黃敏;精力充沛基因決定?[N];新華每日電訊;2011年

2 實(shí)習(xí)生 程鳳;不愛(ài)鍛煉可能與基因缺失有關(guān)[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳雷;AMP激活的蛋白質(zhì)激酶（AMPK）調(diào)控機(jī)制的研究[D];清華大學(xué);2010年

2 張秀娟;TSH調(diào)節(jié)肝臟HMG-CoA還原酶磷酸化修飾的研究[D];山東大學(xué);2014年

3 趙順玉;消積飲聯(lián)合CIK通過(guò)AMPKα/Sp1/EZH2/DNMT1相關(guān)通路抗肺癌生長(zhǎng)的作用機(jī)制[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2015年

4 王紅亮;AMPK-α在鹵蟲(chóng)胚胎發(fā)育過(guò)程中對(duì)細(xì)胞有絲分裂調(diào)控的研究[D];浙江大學(xué);2015年

5 周錫紅;三甲基甘氨酸通過(guò)AMPK途徑影響脂肪沉積的研究[D];浙江大學(xué);2015年

6 劉效磊;AMPK/mTOR介導(dǎo)有氧運(yùn)動(dòng)提高骨骼肌胰島素敏感性的機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

7 劉書(shū)東;AICAR誘導(dǎo)激活的AMPK在肝臟抑制TSH/SREBP-2/HMGCR通路[D];山東大學(xué);2015年

8 杜宇;AMPK調(diào)控組蛋白糖基化修飾的機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2015年

9 李知行;電針對(duì)胰島素抵抗模型大鼠肝臟AMPK、ACC的干預(yù)機(jī)制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年

10 尉娜;AMPK通過(guò)mTOR促進(jìn)腦缺氧條件下血管內(nèi)皮細(xì)胞作用的研究[D];鄭州大學(xué);2016年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 柯志強(qiáng);AMPK信號(hào)通路在白藜蘆醇改善高糖誘導(dǎo)乳鼠心肌細(xì)胞損傷中的作用[D];湖北科技學(xué)院;2015年

2 肖瑤;AMPK對(duì)低氧誘導(dǎo)血管生成作用的研究[D];湖北科技學(xué)院;2015年

3 王玉兵;HIF-1α、AMPK、E-cadherin在前列腺癌組織中的表達(dá)及意義[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 魏蘇玉;乙醇對(duì)H4-ⅡE細(xì)胞脂質(zhì)代謝及AMPK表達(dá)的影響[D];延邊大學(xué);2015年

5 陳婷;肌肉特異敲除AMPKα2對(duì)小鼠脂代謝的影響[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

6 張二東;銅離子及模擬太空環(huán)境通過(guò)ROS/AMPK信號(hào)誘導(dǎo)人B淋巴母細(xì)胞凋亡[D];蘭州大學(xué);2015年

7 徐英秀;硫化氫通過(guò)AMPK激活調(diào)控腦缺血后小膠質(zhì)細(xì)胞的極化狀態(tài)[D];蘇州大學(xué);2015年

8 黃艷;AMPK和SIRT-1參與定時(shí)高脂飲食對(duì)小鼠肝臟生物鐘基因的影響研究[D];蘇州大學(xué);2015年

9 楊霞;AMPK參與線粒體通路介導(dǎo)的氟致H9c2心肌細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

10 閆旭紅;胰島素對(duì)1型糖尿病大鼠睪丸脂聯(lián)素及其受體、AMPK、AKT和eNOS表達(dá)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：AMPK-mTOR信號(hào)通路對(duì)自噬的影響在小鼠局灶性腦缺血損傷中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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