本文關(guān)鍵詞：左旋氨氯地平對(duì)缺氧離體大鼠基底動(dòng)脈的舒血管活性及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：腦缺血是一種臨床常見(jiàn)病,具有高發(fā)病率,高致殘率和高死亡率等特點(diǎn),已成為威脅我國(guó)社會(huì)群體健康的多發(fā)疾病。流行病學(xué)研究顯示,我國(guó)現(xiàn)存缺血性腦血管病患者約490余萬(wàn)人,其中約60-75%的存活者存在不同程度的勞動(dòng)力障礙,給家庭及社會(huì)造成了沉重的負(fù)擔(dān)。因此,針對(duì)腦缺血的發(fā)病機(jī)制及其干預(yù)因素進(jìn)行進(jìn)一步的研究,將有助于更有效的防治腦缺血。腦缺血后5-羥色胺(5-HT)大量釋放,其強(qiáng)烈的縮血管作用被認(rèn)為是腦缺血后腦血管痙攣、血流障礙的主要原因。尋找一種能夠通過(guò)阻斷5-羥色胺引起的大腦動(dòng)脈收縮、痙攣的藥物,發(fā)揮對(duì)腦血管的選擇性擴(kuò)張,可望有效防止腦缺血所致的腦水腫,縮小腦梗死范圍作用,具有十分重要的意義。左旋氨氯地平是一種長(zhǎng)效二氫吡啶類(lèi)鈣離子拮抗劑,主要作用于細(xì)胞膜上的L型鈣通道,阻斷Ca2+-依賴(lài)性蛋白激酶途徑,降低細(xì)胞漿內(nèi)Ca2+濃度,引起血管舒張。研究發(fā)現(xiàn)左旋氨氯地平能擴(kuò)張正常和缺血區(qū)的冠狀動(dòng)脈及冠狀小動(dòng)脈,使冠狀動(dòng)脈痙攣病人心肌供氧增加。左旋氨氯地平能否阻斷Ca2+-依賴(lài)性蛋白激酶途徑,抑制腦缺血后5-HT引起的大腦動(dòng)脈痙攣、收縮,發(fā)揮改善腦缺血血供?目前尚無(wú)相關(guān)研究。已有實(shí)驗(yàn)證實(shí),無(wú)論有無(wú)氧氣存在,5-羥色胺均可濃度依賴(lài)性地引起大鼠腦動(dòng)脈的收縮,而缺氧狀態(tài)下,5-羥色胺對(duì)腦動(dòng)脈的收縮作用增強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究左旋氨氯地平對(duì)缺氧離體大鼠基底動(dòng)脈收縮作用的抑制,以了解其“抗腦血管痙攣”的潛在價(jià)值。本研究通過(guò)比較不同濃度的左旋氨氯地平對(duì)缺氧狀態(tài)下5-HT預(yù)收縮的離體大鼠基底動(dòng)脈直徑的影響,以了解左旋氨氯地平對(duì)正常及缺血區(qū)腦血管的擴(kuò)張作用。初步觀(guān)察左旋氨氯地平對(duì)大鼠基底動(dòng)脈的舒張與鈣通道、內(nèi)皮舒張因子的關(guān)系,獲得左旋氨氯地平的舒張大鼠基底動(dòng)脈的機(jī)制,可望為腦缺血的發(fā)病機(jī)制和治療研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。目的1、觀(guān)察缺氧狀態(tài)下不同濃度的左旋氨氯地平對(duì)5-HT預(yù)收縮的離體大鼠基底動(dòng)脈直徑的影響,以探討左旋氨氯地平對(duì)大鼠基底動(dòng)脈缺氧性舒張的影響；2、通過(guò)比較左旋氨氯地平對(duì)5-HT預(yù)收縮內(nèi)皮完整/去內(nèi)皮血管的抑制作用,以及比較內(nèi)皮舒張因子抑制劑L-NAME (NO合酶抑制劑)對(duì)左旋氨氯地平舒張內(nèi)皮完整血管作用的影響,了解左旋氨氯地平對(duì)缺氧狀態(tài)下大基底動(dòng)脈的舒張作用與鈣通道、內(nèi)皮舒張因子NO的關(guān)系,從而探討左旋氨氯地平的舒張大腦動(dòng)脈機(jī)制。方法1離體大鼠基底動(dòng)脈標(biāo)本的制備稱(chēng)重后SD大鼠水合氯醛腹腔麻醉后,鈍性分離出大鼠基底動(dòng)脈,整理后固定與血管張力系統(tǒng)的傳感器的觸角上,官腔內(nèi)灌流著PSS液。將取材血管分為去血管內(nèi)皮組和內(nèi)皮完整組,去血管內(nèi)皮組采用低離子強(qiáng)度營(yíng)養(yǎng)液灌注法將取材血管去除內(nèi)皮,實(shí)驗(yàn)期間持續(xù)向浴槽內(nèi)通入混合氣體,依實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌诔Ｑ鯐r(shí)通入95%02+5%C02混合氣體,缺氧時(shí)通入95%N2+5%CO2混合氣體。2血管穩(wěn)定性試驗(yàn)將內(nèi)皮完整血管組(n=6)和去內(nèi)皮血管組(n=6)分別固定于血管張力測(cè)定系統(tǒng)上,在浴槽內(nèi)充分灌流PSS液。當(dāng)血管直徑不發(fā)生明顯改變時(shí),記錄此時(shí)的直徑大小為0 min時(shí)的測(cè)定值D0；再將液體全部替換為K+-PSS,血管穩(wěn)定后,記錄此時(shí)的直徑大小為測(cè)定值Dk1；然后再重新替換為PSS液灌流,記錄血管在無(wú)任何外界刺激的情況下灌流30 min和60 min時(shí)的直徑測(cè)定值(分別為D30、D60)；并且在再在灌流60 min后將液體全部替換為K+-PSS,記錄此時(shí)的血管直徑為測(cè)定值Dk2。比較常氧狀態(tài)下各個(gè)時(shí)間點(diǎn)基底動(dòng)脈的直徑變化,以了解其穩(wěn)定性和持續(xù)時(shí)間。3左旋氨氯地平對(duì)5-HT所致缺氧基底動(dòng)脈收縮的抑制作用浴槽內(nèi)持續(xù)通以95%N2+5%C02混合氣,待血管穩(wěn)定后向浴槽內(nèi)加入終濃度為5×10-7 mol/L的5-HT,使血管產(chǎn)生穩(wěn)定收縮狀態(tài),記錄此時(shí)血管的直徑為T(mén)i值,然后向浴槽內(nèi)分別灌流濃度為10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L、 10-7mol/L,10-6mol/L、10-5mol/L、10-4,ol/L或10-3mol/L的左旋氨氯地平15 min,觀(guān)察不同濃度的左旋氨氯地平(10-8～10-3mol/L)對(duì)血管收縮幅度的影響,記錄血管收縮穩(wěn)定時(shí)的直徑為T(mén)o值。以未灌流左旋氨氯地平時(shí)5-HT預(yù)收縮血管的幅度為100%,按如下公式分別計(jì)算不同濃度左旋氨氯地平對(duì)5-HT預(yù)收縮血管作用的抑制百分率(%)：(Ti-To)/Ti×100%。以左旋氨氯地平對(duì)數(shù)濃度為橫坐標(biāo)、以抑制百分率為縱坐標(biāo)繪制量效曲線(xiàn)。4左旋氨氯地平的舒血管作用與鈣通道的關(guān)系研究血管活性檢驗(yàn)、去內(nèi)皮檢驗(yàn)合格后,浴槽內(nèi)持續(xù)通以95%N2+5%C02混合氣體,待血管穩(wěn)定后向浴槽內(nèi)加入終濃度為5×10-7 mol/L的5-HT,使血管產(chǎn)生穩(wěn)定收縮狀態(tài),記錄此時(shí)血管的直徑為T(mén)i值,然后向浴槽內(nèi)分別灌流濃度為10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L,或10-3mol/L的左旋氨氯地平15min,記錄血管收縮穩(wěn)定時(shí)的直徑為T(mén)o值。以未灌流左旋氨氯地平時(shí)5-HT預(yù)收縮血管的幅度為100%,按如下公式分別計(jì)算不同濃度左旋氨氯地平對(duì)5-HT預(yù)收縮血管作用的抑制百分率(%):(Ti-T0)/Ti×100%。5左旋氨氯地平舒血管作用與內(nèi)皮舒張因子NO的關(guān)系研究在血管完成穩(wěn)定性和內(nèi)皮完整性檢測(cè)后,浴槽內(nèi)持續(xù)通以常氧狀態(tài)下的95%02+5%CO2混合氣體,待血管穩(wěn)定后向浴槽內(nèi)加入終濃度為5×10-7 mol/L的5-HT,使血管產(chǎn)生穩(wěn)定收縮狀態(tài),記錄此時(shí)血管的直徑為T(mén)0值。然后向浴槽灌流濃度為10-4 mol/L左旋氨氯地平15 min后,記錄血管收縮穩(wěn)定時(shí)的直徑為T(mén)1值；之后向浴槽內(nèi)灌流濃度為10-4mol/L L-NAME液,孵育30 min分鐘后,記錄血管收縮穩(wěn)定時(shí)的直徑為T(mén)2值。以未灌流左旋氨氯地平時(shí)5-HT預(yù)收縮血管的幅度為100%,按如下公式分別計(jì)算L-NAME灌流前后對(duì)左旋氨氯地平舒張血管作用的抑制百分率(%):(T0-T1)/T0×100%和(T0-T2)/T0×100%。為了解缺氧條件下左旋氨氯地平對(duì)5-HT所致的血管收縮的抑制作用與內(nèi)皮舒張因子的關(guān)系,在浴槽內(nèi)改通入95%N2+5%CO2混合氣體,并重復(fù)上述試驗(yàn)。6統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS13.0進(jìn)行結(jié)果分析。左旋氨氯地平的舒張作用以5×10-7mol/L5-HT誘發(fā)的收縮幅度作為100%,分別計(jì)算出各種條件下不同濃度左旋氨氯地平對(duì)5-HT收縮血管作用的抑制百分率,所有結(jié)果均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,用兩樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性差異檢驗(yàn),以P0.05作為判斷差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果1、離體基底動(dòng)脈的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果：為了解實(shí)驗(yàn)血管在離體條件下的穩(wěn)定性和持續(xù)時(shí)間,我們測(cè)定了內(nèi)皮完整和去內(nèi)皮血管在PSS持續(xù)灌流后不同時(shí)間點(diǎn)的血管直徑。兩組血管在持續(xù)以常氧PSS灌流30min、60min時(shí)血管直徑變化與灌流前(D0)無(wú)明顯差異(P0.05)。兩組血管分別間隔1h先后兩次給予高K+-PSS液后,血管直徑的收縮幅度相對(duì)于血管初期(D0)的血管直徑有顯著收縮(P0.05),但二者之間無(wú)顯著性差別(P0.05)。說(shuō)明在離體條件下,大鼠基底動(dòng)脈直徑較為穩(wěn)定,不產(chǎn)生明顯變化,且反應(yīng)活性保持良好,至少可維持60min。2、左旋氨氯地平對(duì)5-HT所致缺氧離體大鼠基底動(dòng)脈收縮的抑制作用本實(shí)驗(yàn)研究左旋氨氯地平對(duì)缺氧離體大鼠基底動(dòng)脈收縮作用的抑制,以了解其“抗腦血管痙攣”的潛在價(jià)值。以未灌流左旋氨氯地平時(shí)5×10-75-HT收縮血管的幅度為100%,計(jì)算不同濃度(10-10～10-3 mol/L)左旋氨氯地平對(duì)5-HT收縮血管作用的抑制百分率分別為：0.0436±0.0116%、0.0530±0.0134%、0.0696±0.0103%、0.1265±0.0284%、0.2362±0.0275%、0.4084±0.0260%、0.5185±0.0238%、0.5358±0.0160%。實(shí)驗(yàn)表明,左旋氨氯地平對(duì)缺氧條件下5-HT預(yù)收縮的血管有明顯的抑制作用,且呈明顯的濃度依賴(lài)性。3、左旋氨氯地平舒血管作用與鈣通道的關(guān)系以未灌流左旋氨氯地平時(shí)5×10-7 mol/L 5-HT收縮血管的幅度為100%,不同濃度(10-8～10-3mol/L)左旋氨氯地平對(duì)5-HT收縮去內(nèi)皮血管作用的抑制百分率分別為(%)：0.0607±0.0084、0.0852±0.0138、0.1676±0.0247、0.3285±0.0250、0.4161±0.284、0.4219±0.260。實(shí)驗(yàn)表明,左旋氨氯地平對(duì)缺氧條件下5-HT預(yù)收縮的內(nèi)皮完整血管的抑制作用顯著大于左旋氨氯地平對(duì)5-HT預(yù)收縮的去內(nèi)皮血管的抑制作用(P0.05),提示左旋氨氯地平可能通過(guò)阻滯受體操控型鈣離子通道而發(fā)揮舒血管活性。4、左旋氨氯地平舒血管作用與內(nèi)皮舒張因子NO的關(guān)系以5-HT收縮血管的幅度為100%,未孵育L-NAME前10-4mol/L左旋氨氯地平對(duì)5-HT預(yù)收縮血管的抑制率為0.9626±0.0224%；孵育L-NAME后左旋氨氯地平對(duì)5-HT預(yù)收縮血管的抑制率為0.7358±0.0149%；在缺氧狀態(tài)下在孵育L-NAME前后10-4mol/L左旋氨氯地平對(duì)5-HT預(yù)收縮血管的抑制率分別為0.9485±0.0129%和0.8979±0.0150%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,無(wú)論常氧或缺氧狀態(tài)下,L-NAME均可顯著降低左旋氨氯地平舒張血管的作用(P,0.05)。提示左旋氨氯地平對(duì)腦血管的舒張作用除了受體操控型鈣離子通道外,可能還與內(nèi)皮的舒張因子有關(guān)。結(jié)論腦缺血后5-羥色胺引起的血管收縮,可被鈣通道拮抗劑左旋氨氯地平拮抗,提示可能與通過(guò)阻滯受體操控型鈣離子通道、內(nèi)皮舒張因子NO的釋放有關(guān)。這提醒了我們,左旋氨氯地平不僅作為傳統(tǒng)高血壓藥物在臨床廣泛應(yīng)用,其還可能作為與5-羥色胺升高有關(guān)的腦血管疾病治療藥物的潛在價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】：左旋氨氯地平 缺氧 基底動(dòng)脈 血管舒張 離子通道
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R743.3
【目錄】：

• 摘要3-8
• ABSTRACT8-16
• 前言16-19
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器19-22
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法22-26
• 1.3 結(jié)果26-31
• 1.4 討論31-34
• 1.5 結(jié)論34-35
• 全文總結(jié)35-38
• 綜述38-50
• 參考文獻(xiàn)50-56
• 中英文縮略詞表56-57
• 致謝57-58

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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  本文關(guān)鍵詞：左旋氨氯地平對(duì)缺氧離體大鼠基底動(dòng)脈的舒血管活性及機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：392585