本文關(guān)鍵詞：左旋氨氯地平對缺氧離體大鼠基底動脈的舒血管活性及機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：腦缺血是一種臨床常見病,具有高發(fā)病率,高致殘率和高死亡率等特點,已成為威脅我國社會群體健康的多發(fā)疾病。流行病學(xué)研究顯示,我國現(xiàn)存缺血性腦血管病患者約490余萬人,其中約60-75%的存活者存在不同程度的勞動力障礙,給家庭及社會造成了沉重的負擔(dān)。因此,針對腦缺血的發(fā)病機制及其干預(yù)因素進行進一步的研究,將有助于更有效的防治腦缺血。腦缺血后5-羥色胺(5-HT)大量釋放,其強烈的縮血管作用被認(rèn)為是腦缺血后腦血管痙攣、血流障礙的主要原因。尋找一種能夠通過阻斷5-羥色胺引起的大腦動脈收縮、痙攣的藥物,發(fā)揮對腦血管的選擇性擴張,可望有效防止腦缺血所致的腦水腫,縮小腦梗死范圍作用,具有十分重要的意義。左旋氨氯地平是一種長效二氫吡啶類鈣離子拮抗劑,主要作用于細胞膜上的L型鈣通道,阻斷Ca2+-依賴性蛋白激酶途徑,降低細胞漿內(nèi)Ca2+濃度,引起血管舒張。研究發(fā)現(xiàn)左旋氨氯地平能擴張正常和缺血區(qū)的冠狀動脈及冠狀小動脈,使冠狀動脈痙攣病人心肌供氧增加。左旋氨氯地平能否阻斷Ca2+-依賴性蛋白激酶途徑,抑制腦缺血后5-HT引起的大腦動脈痙攣、收縮,發(fā)揮改善腦缺血血供?目前尚無相關(guān)研究。已有實驗證實,無論有無氧氣存在,5-羥色胺均可濃度依賴性地引起大鼠腦動脈的收縮,而缺氧狀態(tài)下,5-羥色胺對腦動脈的收縮作用增強。本實驗通過研究左旋氨氯地平對缺氧離體大鼠基底動脈收縮作用的抑制,以了解其“抗腦血管痙攣”的潛在價值。本研究通過比較不同濃度的左旋氨氯地平對缺氧狀態(tài)下5-HT預(yù)收縮的離體大鼠基底動脈直徑的影響,以了解左旋氨氯地平對正常及缺血區(qū)腦血管的擴張作用。初步觀察左旋氨氯地平對大鼠基底動脈的舒張與鈣通道、內(nèi)皮舒張因子的關(guān)系,獲得左旋氨氯地平的舒張大鼠基底動脈的機制,可望為腦缺血的發(fā)病機制和治療研究提供實驗依據(jù)。目的1、觀察缺氧狀態(tài)下不同濃度的左旋氨氯地平對5-HT預(yù)收縮的離體大鼠基底動脈直徑的影響,以探討左旋氨氯地平對大鼠基底動脈缺氧性舒張的影響；2、通過比較左旋氨氯地平對5-HT預(yù)收縮內(nèi)皮完整/去內(nèi)皮血管的抑制作用,以及比較內(nèi)皮舒張因子抑制劑L-NAME (NO合酶抑制劑)對左旋氨氯地平舒張內(nèi)皮完整血管作用的影響,了解左旋氨氯地平對缺氧狀態(tài)下大基底動脈的舒張作用與鈣通道、內(nèi)皮舒張因子NO的關(guān)系,從而探討左旋氨氯地平的舒張大腦動脈機制。方法1離體大鼠基底動脈標(biāo)本的制備稱重后SD大鼠水合氯醛腹腔麻醉后,鈍性分離出大鼠基底動脈,整理后固定與血管張力系統(tǒng)的傳感器的觸角上,官腔內(nèi)灌流著PSS液。將取材血管分為去血管內(nèi)皮組和內(nèi)皮完整組,去血管內(nèi)皮組采用低離子強度營養(yǎng)液灌注法將取材血管去除內(nèi)皮,實驗期間持續(xù)向浴槽內(nèi)通入混合氣體,依實驗?zāi)康牟煌诔Ｑ鯐r通入95%02+5%C02混合氣體,缺氧時通入95%N2+5%CO2混合氣體。2血管穩(wěn)定性試驗將內(nèi)皮完整血管組(n=6)和去內(nèi)皮血管組(n=6)分別固定于血管張力測定系統(tǒng)上,在浴槽內(nèi)充分灌流PSS液。當(dāng)血管直徑不發(fā)生明顯改變時,記錄此時的直徑大小為0 min時的測定值D0；再將液體全部替換為K+-PSS,血管穩(wěn)定后,記錄此時的直徑大小為測定值Dk1；然后再重新替換為PSS液灌流,記錄血管在無任何外界刺激的情況下灌流30 min和60 min時的直徑測定值(分別為D30、D60)；并且在再在灌流60 min后將液體全部替換為K+-PSS,記錄此時的血管直徑為測定值Dk2。比較常氧狀態(tài)下各個時間點基底動脈的直徑變化,以了解其穩(wěn)定性和持續(xù)時間。3左旋氨氯地平對5-HT所致缺氧基底動脈收縮的抑制作用浴槽內(nèi)持續(xù)通以95%N2+5%C02混合氣,待血管穩(wěn)定后向浴槽內(nèi)加入終濃度為5×10-7 mol/L的5-HT,使血管產(chǎn)生穩(wěn)定收縮狀態(tài),記錄此時血管的直徑為Ti值,然后向浴槽內(nèi)分別灌流濃度為10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L、 10-7mol/L,10-6mol/L、10-5mol/L、10-4,ol/L或10-3mol/L的左旋氨氯地平15 min,觀察不同濃度的左旋氨氯地平(10-8～10-3mol/L)對血管收縮幅度的影響,記錄血管收縮穩(wěn)定時的直徑為To值。以未灌流左旋氨氯地平時5-HT預(yù)收縮血管的幅度為100%,按如下公式分別計算不同濃度左旋氨氯地平對5-HT預(yù)收縮血管作用的抑制百分率(%)：(Ti-To)/Ti×100%。以左旋氨氯地平對數(shù)濃度為橫坐標(biāo)、以抑制百分率為縱坐標(biāo)繪制量效曲線。4左旋氨氯地平的舒血管作用與鈣通道的關(guān)系研究血管活性檢驗、去內(nèi)皮檢驗合格后,浴槽內(nèi)持續(xù)通以95%N2+5%C02混合氣體,待血管穩(wěn)定后向浴槽內(nèi)加入終濃度為5×10-7 mol/L的5-HT,使血管產(chǎn)生穩(wěn)定收縮狀態(tài),記錄此時血管的直徑為Ti值,然后向浴槽內(nèi)分別灌流濃度為10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L,或10-3mol/L的左旋氨氯地平15min,記錄血管收縮穩(wěn)定時的直徑為To值。以未灌流左旋氨氯地平時5-HT預(yù)收縮血管的幅度為100%,按如下公式分別計算不同濃度左旋氨氯地平對5-HT預(yù)收縮血管作用的抑制百分率(%):(Ti-T0)/Ti×100%。5左旋氨氯地平舒血管作用與內(nèi)皮舒張因子NO的關(guān)系研究在血管完成穩(wěn)定性和內(nèi)皮完整性檢測后,浴槽內(nèi)持續(xù)通以常氧狀態(tài)下的95%02+5%CO2混合氣體,待血管穩(wěn)定后向浴槽內(nèi)加入終濃度為5×10-7 mol/L的5-HT,使血管產(chǎn)生穩(wěn)定收縮狀態(tài),記錄此時血管的直徑為T0值。然后向浴槽灌流濃度為10-4 mol/L左旋氨氯地平15 min后,記錄血管收縮穩(wěn)定時的直徑為T1值；之后向浴槽內(nèi)灌流濃度為10-4mol/L L-NAME液,孵育30 min分鐘后,記錄血管收縮穩(wěn)定時的直徑為T2值。以未灌流左旋氨氯地平時5-HT預(yù)收縮血管的幅度為100%,按如下公式分別計算L-NAME灌流前后對左旋氨氯地平舒張血管作用的抑制百分率(%):(T0-T1)/T0×100%和(T0-T2)/T0×100%。為了解缺氧條件下左旋氨氯地平對5-HT所致的血管收縮的抑制作用與內(nèi)皮舒張因子的關(guān)系,在浴槽內(nèi)改通入95%N2+5%CO2混合氣體,并重復(fù)上述試驗。6統(tǒng)計方法采用SPSS13.0進行結(jié)果分析。左旋氨氯地平的舒張作用以5×10-7mol/L5-HT誘發(fā)的收縮幅度作為100%,分別計算出各種條件下不同濃度左旋氨氯地平對5-HT收縮血管作用的抑制百分率,所有結(jié)果均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,用兩樣本t檢驗進行顯著性差異檢驗,以P0.05作為判斷差別有統(tǒng)計學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果1、離體基底動脈的穩(wěn)定性實驗結(jié)果：為了解實驗血管在離體條件下的穩(wěn)定性和持續(xù)時間,我們測定了內(nèi)皮完整和去內(nèi)皮血管在PSS持續(xù)灌流后不同時間點的血管直徑。兩組血管在持續(xù)以常氧PSS灌流30min、60min時血管直徑變化與灌流前(D0)無明顯差異(P0.05)。兩組血管分別間隔1h先后兩次給予高K+-PSS液后,血管直徑的收縮幅度相對于血管初期(D0)的血管直徑有顯著收縮(P0.05),但二者之間無顯著性差別(P0.05)。說明在離體條件下,大鼠基底動脈直徑較為穩(wěn)定,不產(chǎn)生明顯變化,且反應(yīng)活性保持良好,至少可維持60min。2、左旋氨氯地平對5-HT所致缺氧離體大鼠基底動脈收縮的抑制作用本實驗研究左旋氨氯地平對缺氧離體大鼠基底動脈收縮作用的抑制,以了解其“抗腦血管痙攣”的潛在價值。以未灌流左旋氨氯地平時5×10-75-HT收縮血管的幅度為100%,計算不同濃度(10-10～10-3 mol/L)左旋氨氯地平對5-HT收縮血管作用的抑制百分率分別為：0.0436±0.0116%、0.0530±0.0134%、0.0696±0.0103%、0.1265±0.0284%、0.2362±0.0275%、0.4084±0.0260%、0.5185±0.0238%、0.5358±0.0160%。實驗表明,左旋氨氯地平對缺氧條件下5-HT預(yù)收縮的血管有明顯的抑制作用,且呈明顯的濃度依賴性。3、左旋氨氯地平舒血管作用與鈣通道的關(guān)系以未灌流左旋氨氯地平時5×10-7 mol/L 5-HT收縮血管的幅度為100%,不同濃度(10-8～10-3mol/L)左旋氨氯地平對5-HT收縮去內(nèi)皮血管作用的抑制百分率分別為(%)：0.0607±0.0084、0.0852±0.0138、0.1676±0.0247、0.3285±0.0250、0.4161±0.284、0.4219±0.260。實驗表明,左旋氨氯地平對缺氧條件下5-HT預(yù)收縮的內(nèi)皮完整血管的抑制作用顯著大于左旋氨氯地平對5-HT預(yù)收縮的去內(nèi)皮血管的抑制作用(P0.05),提示左旋氨氯地平可能通過阻滯受體操控型鈣離子通道而發(fā)揮舒血管活性。4、左旋氨氯地平舒血管作用與內(nèi)皮舒張因子NO的關(guān)系以5-HT收縮血管的幅度為100%,未孵育L-NAME前10-4mol/L左旋氨氯地平對5-HT預(yù)收縮血管的抑制率為0.9626±0.0224%；孵育L-NAME后左旋氨氯地平對5-HT預(yù)收縮血管的抑制率為0.7358±0.0149%；在缺氧狀態(tài)下在孵育L-NAME前后10-4mol/L左旋氨氯地平對5-HT預(yù)收縮血管的抑制率分別為0.9485±0.0129%和0.8979±0.0150%。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理,無論常氧或缺氧狀態(tài)下,L-NAME均可顯著降低左旋氨氯地平舒張血管的作用(P,0.05)。提示左旋氨氯地平對腦血管的舒張作用除了受體操控型鈣離子通道外,可能還與內(nèi)皮的舒張因子有關(guān)。結(jié)論腦缺血后5-羥色胺引起的血管收縮,可被鈣通道拮抗劑左旋氨氯地平拮抗,提示可能與通過阻滯受體操控型鈣離子通道、內(nèi)皮舒張因子NO的釋放有關(guān)。這提醒了我們,左旋氨氯地平不僅作為傳統(tǒng)高血壓藥物在臨床廣泛應(yīng)用,其還可能作為與5-羥色胺升高有關(guān)的腦血管疾病治療藥物的潛在價值。
【關(guān)鍵詞】：左旋氨氯地平 缺氧 基底動脈 血管舒張 離子通道
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R743.3
【目錄】：

• 摘要3-8
• ABSTRACT8-16
• 前言16-19
• 1.1 實驗材料和儀器19-22
• 1.2 實驗方法22-26
• 1.3 結(jié)果26-31
• 1.4 討論31-34
• 1.5 結(jié)論34-35
• 全文總結(jié)35-38
• 綜述38-50
• 參考文獻50-56
• 中英文縮略詞表56-57
• 致謝57-58

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 周建民;劉振勝;;馬來酸左旋氨氯地平治療輕、中度原發(fā)性高血壓臨床觀察[J];河北醫(yī)藥;2008年08期

2 李海濱;肖文良;姜志安;張曉光;蘇瑞英;趙淑健;;左旋氨氯地平對血壓正常冠心病患者內(nèi)皮功能及頸動脈內(nèi)膜中層厚度的影響[J];臨床薈萃;2007年11期

3 郭瑞芬;張海燕;白志剛;牛麗婷;閆榮玲;;苯磺酸左旋氨氯地平對高血壓晨峰患者頸動脈IMT的影響及降壓療效[J];山東醫(yī)藥;2008年45期

4 陳雪松;內(nèi)皮源性舒血管物質(zhì)與血管舒張[J];上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2002年03期

  本文關(guān)鍵詞：左旋氨氯地平對缺氧離體大鼠基底動脈的舒血管活性及機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：392585