MEF2D在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和遷移的影響
本文關(guān)鍵詞:MEF2D在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和遷移的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:膠質(zhì)瘤是常見的顱內(nèi)原發(fā)性腫瘤,其形成與自身內(nèi)環(huán)境和基因變異存在一定的關(guān)系,是多種致癌基因或抑癌基因參與的一個(gè)多因素協(xié)同累積的過(guò)程。MEF2轉(zhuǎn)錄因子的家族成員可作為不同類型細(xì)胞的存活因子,參與多種基因的調(diào)控,其中MEF2D亞型在細(xì)胞增殖、遷移和侵襲等過(guò)程中起著一定的調(diào)節(jié)作用。研究報(bào)道在腦神經(jīng)系統(tǒng)中,MEF2D對(duì)神經(jīng)元的存活具有重要的調(diào)節(jié)作用,與帕金森的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)。在鼻咽癌和肝癌中,MEF2D可作為致癌基因參與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展,而在橫紋肌肉瘤中,MEF2D表達(dá)量很低或幾乎不表達(dá),在增加MEF2D的表達(dá)量后,其可作為抑癌基因抑制腫瘤的生長(zhǎng)。雖然前人對(duì)MEF2D的研究已經(jīng)涉及到腫瘤和腦神經(jīng)方面,但是尚未有人研究報(bào)道MEF2D在人腦膠質(zhì)瘤中的作用。因此,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)收集臨床膠質(zhì)瘤標(biāo)本,分析MEF2D在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況。利用人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U87MG細(xì)胞,通過(guò)抑制細(xì)胞中MEF2D的表達(dá),初步探討了MEF2D對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖活性和遷移能力的影響。方法:(1)收集臨床膠質(zhì)瘤標(biāo)本,利用免疫組化和蛋白印跡檢測(cè)MEF2D的表達(dá)。(2)免疫熒光檢測(cè)U87MG細(xì)胞系中MEF2D的表達(dá)。MEF2D-sh RNA慢病毒感染U87MG,抑制細(xì)胞中MEF2D的表達(dá)。(3)通過(guò)細(xì)胞增殖和劃痕實(shí)驗(yàn)分析MEF2D對(duì)U87MG細(xì)胞增殖和遷移能力的影響。結(jié)果:(1)免疫組化和蛋白印跡均表明MEF2D在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)量顯著高于低級(jí)別和正常組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)免疫熒光染色證實(shí)U87MG細(xì)胞中存在MEF2D轉(zhuǎn)錄因子,并且MEF2D-sh RNA慢病毒感染U87MG細(xì)胞,成功抑制MEF2D的表達(dá)。(3)U87MG細(xì)胞經(jīng)過(guò)慢病毒(MEF2D-sh RNA)感染后增殖和遷移能力較空白對(duì)照組(U87)和陰性對(duì)照組(NC)明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:(1)肌細(xì)胞轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)因子2D(MEF2D)在人腦膠質(zhì)瘤組織中隨著膠質(zhì)瘤惡性程度的升高,MEF2D的表達(dá)水平升高,與膠質(zhì)瘤病理級(jí)別呈正相關(guān)。提示MEF2D可能參與膠質(zhì)瘤癌基因的發(fā)生與發(fā)展。(2)應(yīng)用MEF2D-sh RNA干擾技術(shù)結(jié)合慢病毒載體感染U87MG細(xì)胞抑制MEF2D的表達(dá),可有效抑制腫瘤細(xì)胞的增殖活性和遷移能力。表明MEF2D可能成為膠質(zhì)瘤基因治療的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】:膠質(zhì)瘤 MEF2D 增殖 遷移
【學(xué)位授予單位】:寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R739.4
【目錄】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-8
- 中英文縮略詞表8-10
- 前言10-14
- 第一部分 MEF2D轉(zhuǎn)錄因子在人腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)14-27
- 材料與方法14-17
- 實(shí)驗(yàn)方法17-21
- 結(jié)果21-23
- 討論23-25
- 結(jié)論25-27
- 第二部分 MEF2D對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和遷移能力的影響27-40
- 材料與方法27-28
- 實(shí)驗(yàn)方法28-34
- 結(jié)果34-38
- 討論38-39
- 結(jié)論39-40
- 參考文獻(xiàn)40-45
- 綜述 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤輔助治療的研究進(jìn)展45-60
- 參考文獻(xiàn)54-60
- 致謝60-61
- 個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果61
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本文編號(hào):387053
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