本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對防治失神經(jīng)肌肉萎縮的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：本實驗將成年大鼠的骨髓細(xì)胞采用密度梯度離心法結(jié)合貼壁篩選法分離出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)進(jìn)行培養(yǎng)、傳代,并選取BMSCsCD44及CD45抗原表型來鑒定獲得干細(xì)胞,然后注入大鼠失神經(jīng)肌肉模型的神經(jīng)斷端,觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對失神經(jīng)支配骨骼肌萎縮的防治作用,并為臨床治療提供新的理論依據(jù)。方法：1取SD大鼠1只,無菌條件下取股骨和脛骨的骨髓細(xì)胞,將骨髓細(xì)胞用percoll分離液(比重1.077)分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的單個核細(xì)胞,然后將單細(xì)胞懸液接種于含15%小牛血清DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)、純化和擴(kuò)增。描畫出MSCs生長曲線,通過免疫組化法檢測干細(xì)胞CD44、CD45表面標(biāo)志物。2選取健康SD大鼠36只,切斷左側(cè)后肢坐骨神經(jīng)制備神經(jīng)缺損模型,隨機分為觀察組和對照組,觀察組肌肉注射1.5×105個/ml的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞懸液0.2 ml,對照組注入同等劑量低糖DMEM培養(yǎng)液,分別于2、4、6周后對2組大鼠進(jìn)行大體觀察、檢測肌濕重、肌纖維橫截面積、坐骨神經(jīng)指數(shù)(SFI),免疫組織化學(xué)法檢測肌肉組織Bcl-2、Bax的表達(dá)變化。結(jié)果：利用密度梯度離心結(jié)合貼壁篩選法能有效分離純化BMSCs,培養(yǎng)出的細(xì)胞均具有典型的干細(xì)胞形態(tài)特征,傳代后細(xì)胞增殖速度較快。BMSCs標(biāo)志物CD44呈陽性表達(dá),造血干細(xì)胞標(biāo)志物CD45陰性表達(dá)。造模后2、4、6周,觀察組大鼠腓腸肌濕重、腓腸肌纖維橫截面積均顯著高于對照組,SFI則顯著高于對照組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后2、4、6周,觀察組肌肉組織中Bcl-2陽性細(xì)胞表達(dá)強度均高于對照組,Bax陽性細(xì)胞表達(dá)強度均低于對照組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：1.用密度梯度離心結(jié)合貼壁培養(yǎng)法能有效分離出純度較高的BMSCs,并具有良好的增殖速度,體外培養(yǎng)的后的BMSCs可進(jìn)行體內(nèi)移植,并在局部損傷微環(huán)境中發(fā)揮作用。2. BMSCs可提高失神經(jīng)后骨骼肌濕重和肌纖維橫截面積,并上調(diào)Bcl-2的表達(dá),抑制Bax的表達(dá),從而減少肌細(xì)胞凋亡,延緩失神經(jīng)支配骨骼肌萎縮,對失神經(jīng)骨骼肌具有保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 失神經(jīng) 肌肉萎縮
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R746.4
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-10
• 1 材料與方法10-18
• 2 結(jié)果18-20
• 3 討論20-25
• 4 結(jié)論25-26
• 附圖26-32
• 參考文獻(xiàn)32-36
• 綜述：組織工程的失神經(jīng)肌萎縮的研究進(jìn)展36-53
• 參考文獻(xiàn)47-53
• 中英文縮略詞表53-54
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況54-55
• 致謝55-56
• 個人簡歷56

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：384780