Cathepsin L在白藜蘆醇誘導(dǎo)的腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期阻滯中的作用
發(fā)布時(shí)間:2017-05-19 08:14
本文關(guān)鍵詞:Cathepsin L在白藜蘆醇誘導(dǎo)的腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期阻滯中的作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:本課題以人腦膠質(zhì)瘤U251和U87細(xì)胞為模型,初步探討cathepsin L在白藜蘆醇(resveratrol)誘導(dǎo)細(xì)胞增殖、凋亡中的作用及其機(jī)制。方法:采用CCK-8法檢測細(xì)胞活性;集落形成以及annexin V/PI雙染流式實(shí)驗(yàn)檢測resveratrol對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251和U87的細(xì)胞毒性作用。Western blot檢測resveratrol對(duì)cathepsin L以及cyclin A、cyclin B1、cyclin D1和凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2/Bax表達(dá)水平的影響,免疫熒光染色檢測cathepsin L的變化。PI單染檢測藥物對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期的影響。用si RNA干擾cathepsin L觀察resveratrol對(duì)細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響。U87細(xì)胞轉(zhuǎn)染p53突變質(zhì)粒后,觀察細(xì)胞對(duì)resveratrol的敏感性變化。結(jié)果:Western blot結(jié)果顯示resveratrol能夠顯著激活cathepsin L,免疫熒光實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證了給藥后膠質(zhì)瘤細(xì)胞cathepsin L的增加。CCK-8、集落形成實(shí)驗(yàn)及流式細(xì)胞術(shù)及western blot結(jié)果提示,resveratrol能夠誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡;U87細(xì)胞對(duì)resveratrol的敏感性比U251細(xì)胞更強(qiáng)。PI單染流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明resveratrol可以引起U251細(xì)胞G1期阻滯,U87細(xì)胞為S期阻滯。Resveratrol可以明顯下調(diào)細(xì)胞周期蛋白的表達(dá)水平,表明resveratrol確實(shí)能夠誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期阻滯。在干擾cathepsin L以后由resveratrol引起的細(xì)胞毒性增強(qiáng),克隆形成率明顯降低,細(xì)胞周期阻滯作用增強(qiáng)。U87細(xì)胞轉(zhuǎn)染p53突變質(zhì)粒后,細(xì)胞對(duì)resveratrol的敏感性減弱。結(jié)論:Cathepsin L參與了resveratrol對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)其凋亡和細(xì)胞周期阻滯的作用,抑制cathepsin L可以增強(qiáng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)resveratrol的敏感性,并且這種作用具有一定的p53依賴性。
【關(guān)鍵詞】:cathepsin L 白藜蘆醇 膠質(zhì)瘤細(xì)胞 凋亡 細(xì)胞周期
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R739.41
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-8
- 前言8-10
- 實(shí)驗(yàn)部分10-17
- 材料與方法10-17
- 一、材料10
- 二、實(shí)驗(yàn)方法10-17
- 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-29
- 1. Resveratrol作用于膠質(zhì)瘤細(xì)胞后cathepsin L的表達(dá)增加17-19
- 2. Resveratrol抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡19-22
- 3. 抑制cathepsin L可以增強(qiáng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)resveratrol的敏感性22-25
- 4. Resveratrol可以引起膠質(zhì)瘤細(xì)胞的周期阻滯25-27
- 5. 抑制cathepsin L加劇細(xì)胞周期阻滯27-28
- 6. U87 細(xì)胞進(jìn)行p53mut轉(zhuǎn)染后,對(duì)resveratrol敏感性減弱28-29
- 討論29-33
- 結(jié)論33-34
- 參考文獻(xiàn)34-40
- 綜述40-52
- Reference46-52
- 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文52-53
- 致謝53-54
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 ;Combined Detection of Serum Matrix Metalloproteinase 9,Acetyl Heparinase and Cathepsin L in Diagnosis of Ovarian Cancer[J];Chinese Journal of Cancer Research;2012年01期
本文關(guān)鍵詞:Cathepsin L在白藜蘆醇誘導(dǎo)的腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期阻滯中的作用,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):378155
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